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3광자 현미경을 통한 살아있는 생쥐의 림프절 전체 깊이 영상화
최기백
최기백 (Cornell University)
2022 BRIC 세미나 상반기  |  2022.04.22
지난 20년동안, 살아있는 생쥐의 림프절 내에 면역세포들의 상호작용을 실시간 관찰하기 위하여 공초점 (Confocal) 현미경 및 2광자 (two-photon) 현미경이 활발히 사용되어왔습니다. 하지만, 이러한 기존 현미경들은 투과 깊이의 한계(<300µm)로 인해 림프절의 일부만 관찰 할 수 있었습니다. 본 연구에서는, 주로 뇌 영상화에 사용되고 있던 3광자 (three-photon) 현미경을 림프절 영상화 목적에 맞게 개선하여 림프절 전체 깊이(600-900µm)를 영상화 할 수 있었습니다. 이 기술을 이용하여, 림프절내 깊이에 따른 CD8 T 세포와 CD4 T 세포의 움직임을 비교할 수 있었으며, LPS를 주입한 염증 모델에서 CD4 T 세포는 얕은 곳에 비해 깊은 영역에서 운동성이 떨어지는 것을 발견하였습니다. 또한 germinal center dark zone과 같이 B 세포가 밀집된 영역에서 기존 2광자 현미경에 비해 higher contrast 이미지로 B 세포의 움직임을 영상화 할 수 있었습니다. 이와 같이, 기존현미경으로 볼 수 없었던 깊은 영역의 면역세포들의 상호작용을 연구하는데 앞으로 3광자 현미경이 많이 사용 될 것으로 기대됩니다.

생체내 3광자 현미경 (intravital three-photon microscopy), 림프절 (lymph node), T/B세포 움직임 (T/B cell migration)
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