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카스9 유전자가위의 향상 된 표적 특이성을 정량화하기 위한 단분자 형광 분석법의 활용
박진호
박진호 (서울대학교)
2022 BRIC 세미나 상반기  |  2022.01.26
카스9 유전자가위의 비표적 절단현상을 개선하기 위해 표적 특이성이 개선 된 카스9 변이체들이 많이 개발되었지만, 각각의 변이 카스9 의 작동 메커니즘에 대한 연구는 그간 수행되지 않았다. 이 연구에서는 단분자 형광 분광학 (프렛) 을 활용하여 다양한 카스9 변이체가 보여주는 향상 된 표적 특이성을 DNA:RNA 이중나선구조의 유연성 측면에서 관측하였으며, 그 결과, 카스9 변이체들은 DNA:RNA 상보결합과정 중 혹은 상보결합 이후 과정에서 더 효율적으로 비표적 DNA 를 구분하는 것을 새롭게 알아내었다. 이 연구에서 제시하는 동력학 분석법을 활용하여 각각의 카스9 변이체가 보여주는 향상 된 표적특이성의 기원을 밝혀낼 수 있었으며, 추후 더욱 다양한 카스9 변이체의 개발 방향성을 제시할 수 있을 것으로 기대한다.
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