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실험Q&A    51건 정확도순 날짜순
Q. expression vector.....wild or mutant ??
expression되어져 나온 것이 wild type인지 mutant type인지 ?? (특정 세포에 expression vector를 transfection 하였을때 어떠 실험으로 발현된 단백질이 wild type인지 mutant type 인지 알아보는 실험이 궁금합니다.) 아니면 ...
A.  서열이 곧 아미노산 서열입니다. Wild-type이라는 것은 원래 존재하는 것이고 mutant는 자연적인 것이던 ... 것입니다. 따라서 기존에 알려진 서열과 다름이 없다면 이는 wild-type입니다 ...
답변 1  |  2009.08.25
Q. wild type bacterial cell 에서 expression vector 사용??
균주들이 E. coli 가 아닌 다른 박테리아입니다. Wild type 균주가 하나 있고, 약 4-5개의 mutant 가 들어간 균주가 또하나 있습니다. 이 균주들에 pET 벡터를 넣어서 IPTG로 인덕션할 수 있을까요. 발현된 ...
A.  우선 발현유무에 앞서 사용하고자 하는 bacteria에서 plasmid가 유지 되는지 부터 확인을 하셔야 할듯합니다.
답변 1  |  2014.09.02
Q. (shuttle vector관련실험) 너무 막연해서 글올립니다. 고수님들 한수 부탁드립니다.
gene을 Amp 저항성 사이트를 갖고있는 e.coli용 shuttle vector에 삽입해서 psedoalteromonas wild-type균주에서 발현시키고자 합니다. 얼핏 알기로 shuttle vector는 돈주고사는방법, 분양을 받는 방법, 다른 논문을 보고 ...
A.  invitrogen, promega , stratagene, 등등 많이 있습니다. 직접 제작은 이분야 실험이 전무 하다니 말리고 싶고.... 위 회사들 대리점에 전화 하여 카다록을 살펴 본후 선택 해서 하시면 편리 할듯... 실험 스텝은 ...
답변 1  |  2011.04.11
Q. wild-type bacteria에 transformation 에 관해....
분리한 wild-type bacteria에 t/f을 ... t/f을 한 plasmid는 topo vector에 insertion된 것입니다. t ... 한번 생각해본결과 wild-type bacteria 의 plasmid 의 ori 부분을 cloning하여 vector에 넣은 후 t/f을 하면 어떻까 하는데.....
답변 0  |  2010.09.20
Q. Type II transmembrane protein을 secreted protein으로 만드는 벡터
반대로 C-terminal이 extracellular domain에 위치하는 Type II transmembrane protein입니다. Mammalina expression vector에다가 extracellular domain만 집어넣어서 fusion protein을 cell supernatant에서 harvest하려고 하는데요, Type II ...
A.  secretion한다고 하면, 기존에 가지고 있던 transmembrane domain이 없기 때문에 vector의 signal에 의해 결정될 것으로 생각됩니다만....
답변 1  |  2008.09.25
Q. stable cell을 만드는 vector가 따로 있는지요?
Vendor: Invitrogen Alternate Vector Names: pcDNA3.1+, pcDNA3.1 Vector Type: Mammalian Viral/Non-viral: Nonviral Stable/Transient: Transient <<<================ Constitutive/Inducible: Constitutive Promoter: CMV Expression Level: High Backbone Size (bp): 54 ...
A.  것 같습니다. Stable cell을 만들면서 예전에 많이 사용했던 vector가 pCI-neo와 pCDNA3.1이었는데 둘다 효율적인 면에서 나쁘진 않았습니다 ...
답변 3  |  2008.06.19
Q. wild type yeast 질문
wild type yeast 에 integration vector를 사용하여 유전자를 넣었을 경우 발현이 제대로 안된다고 들었습니다. 왜그런지 알고싶네요. 논문에도 안나오고 ㅠ diploid라 세대가 지나면서 gene이 없어지나요? 답변 ...
A.  효모에서 단백질 발현에 2u ori를 많이 사용합니다. 하지만 vector 방식은 copy no. stability가 낮기 때문에 배양 할 때 copy no.유지를 잘해줘야 합니다. 100% stability를 보이는 것이 integration vector인데 S ...
답변 2  |  2009.07.21
Q. 다양한 type의 neuron?  |  첨부파일 첨부파일
자라도록 해서 실험을 하고 있는데, 특히 GFP vector (alone) 만을 transfection시켜 일정기간이 지나 ... web을 검색해보니까 첨부한 그림처럼 다양한 type의 neuron이 존재한다는 것을 알 수 있었구요. 일단 궁금한 ...
A.  해마신경세포를 일차배양했을경우 말씀하신대로 여러가지의 모양의 세포들이 존재를 하게 되지요 해마신경세포에는 주로 피라미달신경세포가 주로 많이 존재를 하겠지만 그 이외에도 글리아세포들 ...
답변 1  |  2004.01.07
Q. luciferase가 secretion type인지 세포내에만 있는건지 확인하는 방법..?
다시 회사에 연락해보니, plasmid vector map 디자인에 따라 ... 사용중인 세포에 삽인된 plasmid vector는 pGudLuc7.ERE Plasmid입니다. 이 ... 루시퍼레이즈가 secretion type인지 아닌지 알 수 있는 방법이 없을까요? ...
A.  plasmid보면 ERE가 있네요. ERE: estrogen response element estrogen을 treat해야 발현하는거 아닌가요? 그럼 그냥 cell lysis 깨고 해봤자 안나오는게 당연한것 같은데요. cell에 estrogen을 treat하고 lysis후 루시페린처리하 ...
답변 1  |  2016.02.19
Q. vector를 좀 얻을 수 없을 까요?..
1 receptor, type 1 의 유전자와 tumor necrosis factor - alpha 의 유전자가 들어있는 vector를 얻을 수 없을 까요... PCR할 template로 사용하고자 합니다. 현재 HUVEC에서 RT-PCR를 하고 있는데 control primer는 잡히나.. 원하는 ...
A.  눈문을 보시고, 그 유전자들을 어느 랩에서 주로 제공받는지를 확인하신 후에 이메일로 좀 보내 ... 제공할 수없습니다. 그리고, 용어선택에서 이런 경우는 vector가 아니고 plasmid라고 하셔야합니다 ...
답변 1  |  2006.07.21
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