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실험Q&A    2,799건 정확도순 날짜순
Q. transformation efficiency를 구할때 dilution배수는 어디에 곱해야 하나요?
알겠는데 희석배수로 인해서 volume spread수치와 total volume of transformation이 변하는 건지 궁금해요ㅜㅜ 3시간동안 구글 찾아봤는데 잘 모르겠네요 ㅠㅠ ...
A.  질문이 실제 실험한건가요? 이상한 점이 있는데.. 희석배수 X4000은 어떤 의미인가요? 25ul CP cell에 TF했는데 50ul cell을 plate에 spreading한다는건 어떤 의미 인가요? TF 효율은 cfu/ug DNA로 표시하기 때문에 TF ...
답변 1  |  2019.04.24
Q. transformation 질문입니다.
transformation을 하던데, 제가 만든 컴셀로 이런 방식으로 transformation할 수는 없는건가요? 궁금해서 여쭤봅니다 ...
A.  방법, Hanahan 방법 등이 많이 쓰입니다. 하지만 일반적으로 transformation 효율은 electroporation 방법이 훨씬 좋습니다. (http://bric.postech.ac.kr/myboard/list.php?Board=protocol&pkno=128 ...
답변 3  |  2011.01.07
Q. transformation이 안돼요 ㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠ
transformation을 하는데 잘 안되서 이렇게 글을 올립니다. ㅠ colony가 도무지 뜨지 않아서요 ㅠ 제가 사용 ... transformation이 안되는거 같아요 ㅠ 고수님들 ㅠ 이런경우 transformation 을 어떻게 해야 할까요 ...
A.  항생제가 amp라면 incubation을 빼버리고 깔아보세요. 그리고 com cell 효율도 한번 측정해 보시는 것이 좋을 것 같습니다.
답변 3  |  2010.07.19
Q. transformation후 colony가 저만 안떠요..
저는 8개 뜨고 선생님은 50개 이상 뜹니다.. 아무래도 transformation에 문제가 있는 것 같은데 선생님과 바로 옆에서 진행했기 때문에 같은 컴셀 사용, 시간, 조건 모두 똑같았습니다. 컴셀 넣고 탭핑 후 ice ...
A.  cempetent cell은 따로 사용하시는 건가요?
답변 3  |  2019.02.03
Q. bl21 transformation 콜로니가 안뜹니다.
transformation하였는데, colony가 아예 뜨질 않습니다. 일주일째 transformation만 하고 있는데, 어디서부터 잘못된건지, 혹은 이런 경험이 있으셨던 분들, 조언 부탁드립니다 ...
A.   그리고 BL21에 transformation하면 됩니다. 일반적인 single transformation보다는 많은 양의 플라스미드를 사용하세요. 500ng~1ug씩 (듬뿍듬뿍) 각각 섞어서 transform하면 됩니다. Kan이 있으니 heat shock후에 1시간 이상 ...
답변 2  |  2016.09.08
Q. transformation과 ligation에대해 질문하겠습니다.
heat shock 90초를 준것입니다. 그래서 제가 eletroporation으로 transformation을 하기위해 옆 실험실에서 DH10b 라는 electronic competent cell을 받아서 실시 하였는데, protocol 대로 진행 하였습니다. insert와 vector는 다 ...
A.  먼저 ligate가커서 안들어 가는 것은 아닙니다. 충분히 들어 갈 크기이며 ligase 또는 ligation 조건 문제 아닌가 생각이듭니다. vector를 잘라서 1)elution 후 바로 TF, 2)ligation 후 TF, 3)동일양의 안자른 vector TF 이 ...
답변 6  |  2010.09.04
Cloning의 마지막 과정인 Transformation의 노하우를 들려 주세요!
9:50) [나만의 노하우] kanamycin 저항성을 가지고 있는 vector로 transformation 하는 경우, 저는 ice에 10분가량 대기후, LB media를 50~100ul 추가하여 , 37도에서 1hr정도 incuvate후에 도말을 하면 잘 자라는 편입니다 ...
프로토콜
 |  2013.11.05
Q. 선형 Plasmid의 Transformation
Transformation을 한 결과와 같은 결과가 나오나요? 선형 DNA를 Transformation을 할 경우 암피실린을 저항하는 성질을 가지지 못한다고 들었는데.. ...
A.  선형 플라스미드나 RNA 플라스미드도 있습니다만, 일반적인 플라스미드는 원형의 DNA를 말하는 것입니다. selection marker는 암피실린 외에도 Kanamycin, Tetracycline 등 다양합니다. 그것은 플라스미드 내에 있 ...
답변 2  |  2016.06.03
Q. transformation 효율 비교 결과에 대해 질문이요!  |  첨부파일 첨부파일
넣었습니다.. 이 사진을 보며.. 제가 구입한 TA vector가 transformation 효율이 정말 낮구나.. c.cell 을 같이 판매하던데 살까...로 생각할 수 있는 결과인지 궁금합니다. 직접 세어보았을 때.. TA vector는 clonly가 ...
A.  실제로 실험을 하면 self ligation이 일어나죠... 아마튼 transformation 했을 때 거의 colony자체가 뜨지 않았다면 ligation mixture에 ligase 저해물질이 포함된 것으로 보입니다. insert인 PCR product를 깨끗이 정제하시고 ...
답변 1  |  2009.08.05
Q. ligation후에 transformation하고 나서 뜨는 콜로니
transformation하면 이런경우가 있나요? ligation후에 transformation하고 나서 뜨는 콜로니는 크기가 거의 일정한가요? 콜로니를 보면 어떤건 큰데 어떤건 작습니다. 작은 콜로니는 satelite는 아닙니다 ...
A.  yeast contamination으로 보입니다. 오염에 좀 더 주의하면서 해보시고 그래도 그렇다면, 그리고 competent cell을 만들어서 사용하신다면 그 자체가 오염되어 있을 수 있겠네요.
답변 2  |  2011.07.12
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