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실험Q&A    2,525건 정확도순 날짜순
Q. transfection에 관해..
transfection 시 DNA prep을 mini로 하면 안되나요? 처음으로 하는 실험이라 midi prep이 준비가 되지 않아서요.. 효율이 많이 떨어진다고 하던데.. 왜그러나요? 조언 부탁드립니다.
A.  않기 때문이라 볼수 있습니다. 그래서 보통 양도 양이지만 transfection시에는 midiprep을 더 선호하는 것이구요. endotoxin free로 나온 kit이 따로 나와 있고 midiprep kit으로도 가능합니다. 효율은 많이 ...
답변 3  |  2006.03.21
Q. transfection할때 꼭 DNA 농도를 동일하게 맞추어야 하나요?
를 가지로 하고 있거든요. 3. HEPG2 와 HEP3B 중 어떤 세포의 transfection 효율이 더 높은 가요? 실험해 보신분들의 조언 부탁드려요~ ...
A.  1. 높은 농도로 뽑으신 후 다이루션하심.... 2. 트랜스팩션 방법이나 여러가지 조건에 따라 다르죠.. 농도는 따로 잡으심이... 3. 둘다 잘 안되던데요.....
답변 3  |  2006.07.11
Q. prostate cancer cell-transfection
prostate cancer cell 인 PC3 cell line 에 transfection 하는데요, efficiency 가 너무 낮거든여? 혹시 대가님들의 노하우가 있으시면 좀 알려주세요,,, <[^..^]>
A.  저두 PC3 cell line 에 Transfection 하는데...실험도중 세포에 문제가 생겨서 곤혹을 치르고 있습니다. PC3 cell line 분주 가능할까요~부탁드립니다..
답변 2  |  2006.07.22
Q. transfection할때요.....
transfection을 위한 plasmid DNA를 뽑을때요... 꼭 large prep를 해야한다고 하는데요.. 왜 그래야 하나요? mini prep는 안돼나요?
A.  miniprep보다는 midi 이상의 prep이 DNA quality가 좋은 편이고, transfection은 DNA를 많이 쓰는 편이기 때문에 될수 있으면 같은 quality의 DNA를 좀 많이 뽑아놓는 것이 이후 실험을 위해서 편하죠. ...
답변 1  |  2007.10.08
Q. fibroblasts에 transfection시에
fibroblasts에 transfection시에 원래 잘 안돼나요? effciency를 올리려니 셀 데미지가 크고.. 셀 데미지를 줄이자니 effcfiency가 낮고.. 찾아보니 fibroblasts에 transfection시 reagent가 따로 있던데... 그걸 사용해야하나요?
A.  어떨까요? ^^ fibroblast도 종류가 많습니다. 대체적으로 transfection이 잘 안되는것 같습니다. electroporation을 하는게 가장 좋은 방법인데 설명하시는거 보니 아마도 이 방법을 사용하시는것 같군요.. 조건만 ...
답변 1  |  2007.11.16
Q. transfection 할때요~
보통 mini-prep kit를 사용하는데,, 괜찮을련지요? RNA가 있으면 transfection 효율이 떨어질까요? 그리고 항생제는 네오마이신을 사용할 껀데요~ 사용해 보신분 적정 농도좀 알려주세요~ 지금 항생제 내성 ...
A.  그렇고..) 그런후 DNA농도도 2-3개 정도 transfection을 해보시고.. 급해도... Midi-prep 뽑는데 하루 반이면 되는데... 그쵸 ...
답변 1  |  2008.02.19
Q. Lipofectamine(In..사 제품)을 이용하여 transfection
다음에 incubation을 했습니다. 근데 반대로 하니까 생기네요 transfection은 어떻게 하나 아주 자~~알 됩니다 ...
A.  spin해보진 않고 transfection후 현미경 관찰해보면 동글동글 떠다니는게 보이던데... 그게 liposome이라 생각했구요.. 님께서 말씀하신 pellet도 liposome이 아닐까요? 아님 lipofectamin에 down되는 성분이 따로 있을지...
답변 1  |  2008.05.08
Q. transfection에 2가지 vector를 삽입하려고 하는데요???
2가지 vector를 transfection이 가능한지에 대해 질문을 하려고 합니다. 똑같이 overexpression이나 knock-down만 하는 2가지 vector를 삽입하는게 것이 아니라 overexpression과 knock-down vector를 삽입하려고 하는데 즉, ...
A.  하나는 sh RNA이겠지요?? 어찌되었든 selection marker만 다르면 문제없습니다^^
답변 2  |  2008.11.27
Q. transfection이 안되는 이유가 뭘까요?
잘 된다고 하시는데 저는 왜 안되는 지 정말 미치겠습니다. transfection 효율에 영향을 미칠 수 있는 인자들에 대해서 아시는 분들 답변 부탁드려요....-
A.  먼저 조건을 찾으셔야 합니다. Reagent에 얼마나 cell이 transfection 되는지 혹은 damage를 받는지 조금씩 다 다릅니다. 따라서 조건을 맞추어 보신일이 없다면 한번 time, reagent dose, DNA 양, media volume등을 ...
답변 1  |  2006.07.06
Q. transfection시에 cell 양
않을까요? 이렇게 하는 이유는 효율이 좋아서인가요? transfection하고 나서 12시간 후에 media change하면 그 후부터는 DNA가 세포내로 들어가지는 않는것 아닌가요? 혹시 media change 안 해 주나요 ...
A.  삼일정도라면 80%는 무리입니다. 셀이 너무 꽉 잘아서 셀이 상당한 스트레스를 받게됩니다. 따라서 시그널 분석의 어려움이 생깁니다. 방법은 트랜스펙션 시간을 단축시켜서 실험하시거나 24이후 서 ...
답변 2  |  2008.11.20
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