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실험Q&A    197건 정확도순 날짜순
Q. Cell thawing후 viability (2차 질문)
(완전궁금) 2. 현재 풀었던 cell이 불과 2~3주 전까지만 해도 thawing 후 이상없이 사용했다는 것입니다. 3. THP-1 CELL을 구매해서 passage별로 stock을 만들었는데 cell이 이상해서 같은 stock box에 있던 passage별로 ...
A.  안녕하세요. 현재 저도 위와같은 문제때문에 고민하고있습니다. 혹시 해결하셨나요?
답변 3  |  2011.05.19
Q. cell thawing 에 관한 노하우를 좀 알려주세요..
이 과정이 자꾸 찝찝할 수밖에 없네요.. 다른분들은 cell thawing 을 어떻게 하는지 노하우를 좀 알려주세요. ...
A.  녹이는 방법은 그리 큰 차이가 나는건 사실 없습니다. 우선 빨리 녹여서 DMSO등 없애고 dish등에 seeding 뭐 다 이렇습니다. 세포를 녹였을때 죽는건 일단 세포를 얼릴때 세포 상태가 안좋았기 때문일 가능 ...
답변 6  |  2008.07.21
Q. Cell thawing 후 seeding
했는데 그 이후 cell이 금방 죽어버리더라구요.. 이게 thawing 후 바로 cell을 떼서 damage를 받은건지 아니면 애초에 stock cell에 문제가 있는건지 궁금하네요... 조언부탁드립니다 ...
A.  cell을 thawing 한 후 바로 다음날 seeding을 하면을 하셨다는데 splite을 했다는것으로 말씀하시는 것 같네요. 무슨셀인지는 모르겠지만 다음날 splite를 했다고 셀이 다 죽었다는건 좀 이해가 안됩니다. ...
답변 2  |  2019.03.08
Q. Thawing-Freezing으로 세포를 깬후 fractionation 해보신분?
수행하였었으나, 그 homogenizer가 분실된 상태에서 thawing-freezing으로 같은 실험을 수행하면 어떨지 궁금해서 질문을 드립니다. 제가 제일 염려되는 점은 혹시 dounce homogenizer에 비해, thawing-freezing법이 ...
답변 0  |  2007.02.23
Q. cell thawing 이후 과정 질문입니다.
교체해줬습니다 약 1주일 후 confluency가 30% 도달했을 때 (thawing후 cell이 엄청 없는 걸 봄) 계대를 해줬습니다. 제가 알기론 cell이 상태 안 좋은 거 좋은 거 다 있을 수 있기 때문에 계대를 해주는게 좋다고 ...
A.  cell thawing에서 넓은 면적에 적은셀이 있으면 자라는데 문제가 발생할수 있습니다. cell viablilty가 적다면 6well 사이즈부터 시작해서 셀 증식을 만들어 가는게 좋을듯 합니다. 그외 셀이 죽은 이유는 그 ...
답변 3  |  2015.01.30
Q. sp20 cell thawing 과정좀 확인해주세요
자라서 60파이 2개의 plate에 나누어서 해보았습니다. 제가 thawing 한 방법이 맞는지 어떠한 점이 잘못되었는지 확인좀 해주세요 1. vial을 녹인 후. 배지를 넣고 suspension 2. 원심 분리를 하고 나서, 석션한 ...
A.  본인이 얼리신 셀이 아닌가보죠? 얼릴때 얼마의 셀을 이용해 stock을 했는지가 중요할것 같습니다. 만약 잘자란 60mm 디쉬를 1판을 이용해 1바이알을 얼렸고, 생존률이 좋다면 풀자마자 꽉 차 있는 모습 ...
답변 2  |  2020.02.26
Q. Cell thawing 할 때 vial 에 넣어준 cell 양의 반 이하로 cell 수가 나옵니다.
보통 일반적으로 하는 정도로 하거든요 (200g, 5분) thawing 하는 속도도 엄청 느리다고 생각하지는 않구요. 그 밖에 loss의 또 다른 원인이 뭐가 있을지 궁금합니다 ...
A.  loss 되는게 정상임. 많이 죽어요 민감한 ES cell 같은 경우는 90% 정도 죽기도 하구요
답변 2  |  2018.05.18
Q. cell thawing 시에 궁금한 점이 있습니다.
cell thawing 할 때 cell 해동한 후, vial에서 바로 따서 culture dish에 넣지 않고 centrifuge로 DMSO제거 후에 넣을 때 해동한 cell을 4~5ml media에 suspension한 후에 centrifuge하라는 protocol이 많은데, 4~5ml media volume을 ...
A.  제가 알기론 dilution하는 것입니다. DMSO가 cell에 상당히 toxic하기 때문에, 그리고 spin down중에도 DMSO의 영향이 미치기 때문에 많이 dilution해서 DMSO에 의한 damage를 최소화 하는 것일거에요~ㅎㅎ
답변 4  |  2013.04.25
Q. cell thawing시 녹이는 시간!!! ㅠㅠ
cell thawing 할 때 최대한 빨리 녹여서 (천천히 얼리는 것과는 반대로) 배지에 넣는게 좋다고는 알고 있는데요, 질소탱크에서 바이알을 꺼내서 항온조에서 녹여줄때! 1. 가만히 둔 상태로 녹여야 하나요, ...
A.  1. 가만히 둔 상태도 괜찮고, 흔들면서 녹여도 괜찮은 거 같아요. 그런데 너무 심하게 흔들면 바이얼 뚜껑에 묻어서 컨탐의 원인이 될 수 있으니 흔드실 때는 수평을 유지해가면 살살 흔들어 주세요. 2. ...
답변 4  |  2008.09.25
Q. Cell thawing 후 viability
THP-1 CELL을 STOCK (50% Media + 40% FBS + 10% DMSO)하여 사용하였는데 thawing후 cell을 count하면 거의 90% 이상이 살아있습니다. 그런데 flask로 옮겨 culture를 하면 cell이 단 몇시간만에 상태가 안좋아지고 debris들이 ...
A.  저도 공부하는 입장이라서 정확히 말씀드릴수는 없지만. stock에서 DMSO 가 너무 많은 비중을 차지 하지 않나 싶습니다. 저 같은 경우에도 DMSO 가 10% 라고 배우긴 하였으나 저희 실험실의 경우에는 DMSO 가 ...
답변 3  |  2011.05.18
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MIT682062 | 한국건설기술연구원 | 1999.01.15
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