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실험Q&A    45건 정확도순 날짜순
Q. sucrose gradient fractionation에 관한 질문!! 고수님들 도와주세요
raft실험을 실시하기 위해 sucrose gradient fractionation을 실시하였습니다 총 12 fraction으로 나누어서 30ul씩 SDS gel에 loading을 했는데, sucrose가 있는 상태에서 loading했더니 sample이 이상하게 내려오고 또 ...
A.  저도 이질문에 대한 답이 궁금합니다 제발 알려주세요 ㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠ 2007년도에 올려진 글이라 지금 보실지 모르겠지만 보신다면 꼭 알려주세요
답변 2  |  2007.09.10
Q. sucrose gradient를 이용한 바이러스 정제
안녕하세요 sucrose gradient를 이용하여 바이러스를 정제하려고 합니다. 처음 하는 실험이라 걱정이 되는 부분이 있는데, sucrose용액도 투명하고, 바이러스도 투명할거 같은데 ultracentrifuge 돌리고 나서 층 ...
답변 0  |  2015.03.20
Q. sucrose gradient centrifugation buffer
.. sucrose gradient centrifugation을 준비하는 사람입니다.. 한가지 궁금한것이요..10~50% sucrose buffer를 각각만들때... autoclave를 돌려서 만드시나요?? 아니면 녹일때까지(열을 살짝 가한다든지, vortex를 가하면서) ...
답변 0  |  2008.12.28
Q. Sucrose gradient centrifuge 관련 질문
안녕하세요. Sucrose gradient ultracentrifuge를 해서 plasma membrane fraction만 분리하려고 합니다. sucrose를 녹일때 그냥 DW에 녹여서 만들면 되나요? 아니면 다른 buffer에 녹여야 하나요?
A.  Typically, the buffer will be the same composition as the extract to be fractionated by centrifugation. The presence of Sucrose or Glycerol in the starting extract will also affect the migration of proteins.
답변 1  |  2009.04.08
Q. sucrose gradient 방법좀,,
protein 분리하는 방법중에 sucrose gradient로 분리하는 법좀 자세히 가르쳐 주시면 감사하겠습니다. sucrose %로 분리한다고 하던데, 어떻게 하나요? 25, 30, 35% 이렇게 사용하던거 같은데, 어디가 membrane extract ...
A.  %가 틀린데, 예를 들어 sucrose gradient하면 단백질이 어디있는지 확인하기 위해 sucrose gradient용 원심튜브에 60, 50, 40, 30, 20, 10%의 sucrose를 섞이지 않도록 넣고 제일 위에 가용화된 막분획을 apply해 25000rpm, ...
답변 2  |  2004.09.14
Q. Sucrose gradient(초원심분리), 어떻게 만드시나요?
50% cushion밑에 깔고 30%~0% sucrose까지 총 8개의 층으로 sucrose gradient를 만들고 있는데요 인터넷에서 검색해서 본 방법.. 즉 한층 위에 한층을 조심스럽게 까는것은 시간이 너무 오래 걸리더라구요 ㅠ.ㅠ ...
A.  발로 그려보았습니다. 요렇게 하면 접하는 면의 면적이 커져 디퓨젼이 더 잘(혹은 빠르게) 일어나게 한다고 합니다. (1) 고농도 먼저 넣고 위에 저농도를 조심스럽게 넣고 (보통 반반) 마개로 막습니다. ...
답변 1  |  2012.09.07
Q. sucrose gradient 방법...
membrane에 끼어있는 protein을 분리하기 위해 sucrose gradient 방법을 사용하려고 합니다. %에 따른 sucrose solution을 섞이지 않게 넣고, cell lysate를 넣어 원심분리하는 것까지는 대부분의 protocol에 ...
A.  간단합니다. 주사기, 피펫, pump연동 피펫 등으로 위에서 부터 층별로 받아도 되고 1층을 2개 fracrion으로 받아도 됩니다. 각각 투석, 정량, 전기영동 확인 하시면 됩니다.
답변 2  |  2009.02.02
Q. sucrose gradient centrifugation 관련
membrane을 fractionation을 하고 있습니다. 보통 sucrose gradient ultracentrifugation을 할때 3~4시간 정도 합니다. 그런데 만약 overnight을 할 경우, 문제가 될 소지가 있나요? 저는 initial tissue amount가 많을 경우에는 ...
A.  30~80kda 사이의 protein의 경우에는 18시간까지 돌리는 것을 보았습니다. tissue의 경우에는 어떻게 다른지 잘 모르겠습니다. 원하시면 관련 ref논문 메일로 드리겠습니다.
답변 1  |  2012.07.20
Q. sucrose gradient centrifuge  |  첨부파일 첨부파일
저는 sucrose gradient centrifuge 로 원하는 DNA를 fractionation 하는 실험을 하고 있습니다. sucrose % gradient는 15, 30, 45, 60, 70% 를 제조하여 ¢1.0 Cm X 5.0 Cm 규격의 Ultracentrifuge 용 튜브에 각각 200ul 씩 넣어 gradient를 ...
A.  보통 이런 실험을 하는 경우엔 gDNA를 chopping한후 또는 cDNA를 얻어 size fractionation을 하고 cloning작업에 사용하려는 경우가 대부분인데 전기영동 결과 사진을 보니 well의 옥상에도 걸려 있고 전개된 DNA의 ...
답변 2  |  2007.09.05
Q. percoll gradient centrifuge
percoll로 gradient를 주려고 하는데.. 랩에 percoll이 없네요..-_-;; sucrose gradient랑 percoll이랑 무슨 차이가 있을까요? percoll이 없는데 sucrose 써도 될까요??
답변 0  |  2009.08.05
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