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실험Q&A    2,080건 정확도순 날짜순
Q. HCT116(WT) freezing stock 에 관한 질문입니다 ^^
16(WT) freezing stock 을 60파이에 풀고 키운후에 media change 를 위해 dish suction 후에 PBS 로 세척하라고 나와있던데 세척후 다음날 cell 검경을 해 보면 cell 들이 다 터져 있습니다. 세척을 안하고 그냥 media 만 ...
A.  전 안합니다. 전 Starvation을 위한 배지 교환시에만 PBS washing 합니다.^^
답변 2  |  2010.12.27
Q. cell stock 질문이요ㅜㅜ
cell stock할때 95%FBS + 5% DMSO 혼합액으로 스탁하는데 1dish당 5ml가 필요하다고 프로토콜에 나와있는데 이말은 1dish당 1ml cell이 5 튜브 만들어진단 말인가요? 그리고 HK-2cell 은 크기가 크기때문에 3ml를 ...
A.  cell stock을 만들때는 어느정도의 cell 수가 있어야 안정적이기 때문에 보통 1dish에 cell이 차 있을때 5 튜브를 만들면 cell수가 적당하다는 뜻이겠죠 그래서 HK-2cell은 크기가 크기 때문에 디쉬에 꽉차있다고 ...
답변 1  |  2012.10.11
Q. cell stock 푼지 22hr 후에 계대 괜찮은지요?
stock 푼지 22hr 후에 계대 괜찮은지요? ->cell stock을 100파이에 풀었는데, cell 너무 많아서 12시간후에 배지 바꿔주고, 10시간 지나서 보니 배지 붉은색이 옅어지고 있더라구요; 너무 빨리 떼는 것 같은데. ...
A.  cell culture를 4년정도 하고있는 학생입니다. 경험은 부족하지만 경험을 토대로 말씀드리면, stable하게 유지되는 cell line을 freezing했던 것이라면, 일단 22hr후에 계대하는 것 자체가 cell signaling에 크게 문 ...
답변 1  |  2015.10.06
Q. Yeast glycerol stock 만들기 질문요~`
Yeast glycerol stock 을 만들려고 하는데... 어떻게 만들어야 하나요? E.coli 만들듯이 glycerol soln. 에 만들면 되나요? 근데 이때 몇 % 정도의 glycerol에 보관해야하나요? 감사합니다...
A.  E.coli와 같다고 생각됩니다. 15% glycerol..
답변 1  |  2008.07.29
Q. cell stock 시 FBS와 DMSO의 비율.. ㅠㅠ
지금 일반적인 FBS와 DMSO의 비율 10:1 정도 1ml : 100ul 을 넣어서 -20, -70으로 옮겨서 저장 하고 있는데요 이건 문제가 안되고 잘됩니다. 근데 이번에 deep freezer를 버리고? -40을 가지고 할건데 전혀 문제가 ...
A.  -40도로 바로 스탁을 얼릴 때 셀 상태가 좋았다면 다시 풀었을 때 50% 이상은 살아 있을 거 같네요 예전에 스탁을 만들어 -20도에 둔 걸 깜빡하고 일주일 넘도록 두었던 스탁을 후에 버리기 아까워서 풀 ...
답변 3  |  2009.03.03
Q. Cell stock만드는 법이요
cell수를 어느정도해서 만들어주나요???? 2. cell마다 stock만드는 법이 조금 다른가요???? 3. 이건 약간 다른 질문인데요 혹시 인터넷 사이트 중에 유전자 서열을 입력하면 그것이 친수성인지 소수성인지 ...
A.  00mm dish라면 대략 5-10 개정도의 1ml stock을 만들 수 있습니다 (cell의 종류에 따라 다릅니다). 유전자서열은 AGCT 이므로 소수성이다 친수성이라다는 개념이 없습니다. DNA 서열은 어떤 것이던 친수성입니다. ...
답변 1  |  2013.01.15
Q. cell 실험 초보자 입니당!! cell stock 풀때 관련해서 궁금한게 있어 질문올립니다!!
이유를 알 수 있을까요? 최근 실험에서 cell stock을 만들고, stock을 풀었는데 cell viability가 많이 떨어져있었는데 그러한 부분이 혹시 영향이 있을까 싶어 질문올려봅니다 ...
A.  저희가 마우스 Bone Marrow Macrophage cell 을 뽑아서 쓰는데, trypsin 처리로 cell을 때면 오히려 cell 들이 죽어서 scraper 로 긁어서 사용하고 있습니다. 저희방은 FBS를 더 첨가하지는 않습니다. 또한 질소탱크 ...
답변 5  |  2016.11.08
Q. cell stock 질문입니다
cell stock 만드는 것 관련해서 궁금한 점이 있습니다 ~ stock 되어 있는 cell 을 thawing 후 바로 stock을 만들어도 되나요 ? 아니면 계대 과정을 몇번 거친 후에 stock을 만들어야 하나요 ?
A.  적어도 한번의 계대를 거치는 것이 일반적입니다.
답변 4  |  2016.08.23
Q. glycerol stock...
glycerol stock을 녹이면 안좋다구 하는게 걸립니다.. glycerol stock를 녹었다가 다시 얼려두 시퀀스 하는데는 문제가 없을까요? 아니면 다시 만드는게 나을까요? 정말 초보적인 질문이어서 죄송합니다..^^; ...
A.  잘자랍니다. 오염이 되지않도록만 주의한다면 glycerol stock을 녹였다가얼렸다가해도 그리 문제되지않습니다. 정 찜찜하시면 다시 만들어서 보관도하고 보내는것도 좋겠지만 그리 걱정안하셔도 ...
답변 5  |  2003.12.16
Q. stock 후 실험
때 마다 stock에서 도말해서 콜로니를 얻는건가요? 아니면 stock을 만들고 바로 여러개의 고체 배지에 도말해서 필요할 때 (일주일에 1번 실험 예정) 마다 사용하는 건가요? 2. 유전자 형질 전환 실험 ...
A.  애써서 얻은 균주를 잃어버리면 낭패입니다. 어디서 균주를 얻으면 나중에 다시 사용하기 위해서 스탁을 만듭니다. 그래야 실험도중에 오염되도 저장해뒀던 스탁을 꺼내서 실험할 수 있거든요. 받은 ...
답변 1  |  2016.03.10
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