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실험Q&A    1,829건 정확도순 날짜순
Q. hek293A cell staining 방법
뚜렷하게 보이는 방법으로) 혹시 가능하다면 plate상에서 staining이 되는지 이 방법이 실현이 가능한지 궁금합니다. H&E를 생각하고 있는데 어떻게 진행하면 좋을까요 ...
답변 0  |  2016.06.27
Q. Sliver staining이 잘 안돼요,,
다 빼잖아요, 1. 코마시 염색약이 다 안빠진 부분은 silver staining이 안되나요? 2. fixer에 제가 2주동안 담궈뒀는데, 그러면,, 염색이 안되는건지, ...
A.  1. silver stain 방법에서 develop에서 사용된 시약의 등급이 낮은 경우 염색이 잘 되지 않습니다. 2. 각각의 step에서 wash단계를 기준치 이상으로 했을 경우에도 문제가 생기구요.. (특히 senstizer단계에서는 정 ...
답변 2  |  2008.09.08
Q. DAPI를 예쁘게 staining 하고 싶어요
참 흐려서 사진이ㅣ 잘 찍히지 않습니다. 방법은 다른 것 staining하고 난 후에 PBS에 DAPI를 희석하고 10분간 두었다가 PBS-T에 두번 washing 하고 mounting합니다.. 좀더 예쁘게 할 수 있는 조언 좀 부탁드립니다 ...
A.  염색시약들을 보면 회사에 따라 quality차이가 많이 납니다. 아마도 이때문이 아닌가 합니다만, 다른 곳에서 조금 빌려서 해보시거나 또는 DAPI는 그리 비싼 시약이 아니므로 다른 회사의 제품을 구매해 ...
답변 2  |  2009.02.27
Q. (고수님들...급 부탁요!) intracellular staining 에서요
permeabilization 후에 FACS 분석을 해 보았는데,,,, --> surface staining 한 sample이 20% 정도도 안 나옵니다. 혹자는 cell fixation 및 permeabilization 시 조심스럽게 해야 한다고 하더군요. surface가 다 망가져서 surface ...
답변 0  |  2009.11.04
Q. 2DE silver staining이요~
coomassie blue로 염색할 경우에는 250~300ug을 사용한다면 silver staining의 경우에는 10배 정도 작게해도 된다. 모 이런거 처럼요... 물론 sample마다 틀리겠지만 혹시 대략적인 수치가 있다면 좀 알려주세요- ...
A.  굳이 실버로 할 필요는 없다고 봅니다. coomassie G250 staining 하면 소량의 단백질도 왠만큼 볼수 있습니다. 실버가 더 민감하긴하지만 프로테인 많이 로딩해서 G250으로 보면 좋은 결과 얻을수 있습니다. ...
답변 1  |  2006.04.03
Q. comassie staining 할때요.. 원래 destaining하기 전엔 밴드가 안보이는게 정상인가요?
완전 파랗게 되서 밴드가 안보이던데..;; 그리고 rapid staining 방법으로 전자렌지에 살짝 데우는 방법이 있던데.. 해보신 분 계신가요?ㅎ 조언 부탁드립니다 ...
A.  Staining buffer를 직접 안만들어봐서 조성을 봐야하는데 재사용안한 staining buffer면 5분정도 staining하고 자세히 보면 보이긴 보여요. 젤 고정시키고 통 기울여서 잘 보면 보여요.
답변 6  |  2013.01.08
Q. MMP-2 staining solution
Brilliant Blue R staining 말고 다른 다른 staining 방법 있나요.. coomassie blue staining 이라던가.. 답변 부탁드려요ㅜㅜ 당장 필요한데.. Brilliant Blue R 시약이 떨어져서요ㅠ 부탁드립니다~ ...
A.  R250 staining이 정확한 말로서 Coomassie staining이나 Brilliant blue R staining이나 같은 것입니다. Gel상의 단백질을 염색하는 방법은 아주 많습니다. 하지만 MMP-2라는 전제가 있어 답변을 드리기가 참 어렵습니다 ...
답변 1  |  2008.12.29
Q. IF staining Trouble shooting
중에서도 비슷한 경험을 하신 분이 있으신가요? 아, 참고로 staining에서 fixation은 주로 PFA 3.7-4.0%로 하구 있구요. methanol, saponine등으로도 시도를 해보았습니다. 또 이런 현상을 어떻게 해석해 볼 수 ...
답변 0  |  2011.10.13
Q. confocal staining 할때 질문입니다.
이런 결과가 나오더군요.. 개인적인 생각에는 cell을 staining하고 wash 할 때, 300g에 3min centrifuge 돌리는데 이 과정중에 cell이 loss가 많다고 생각되고, nuclear가지 permeablization이 잘된 cell은 거의 터져서 그런게 ...
A.  Suspension cell이 바닥에 잘 안붙는게 사실입니다. 바닥에 붙인 후 wash 단계에서 천천히 해주시는게 좋을 듯합니다. 그리고 fixation은 세포마다 다른 솔루션을 사용합니다. 예를 들어 저희 연구실에서 사용 ...
답변 3  |  2014.04.11
Q. FACS intracellular staining도 fixation해서 보관 가능한가요?
안녕하세요, FACS로 intracellular staining을 처음 실험해보는 연구생입니다. surface staining시에는 항 ... 생각이 듭니다ㅠ 제 생각이 맞나요?? 혹시 Intracellular staining 후에 fixation해서 보관해보신 분 계신가요 ...
A.  시간까진 모르겠으나 경험상 Fixation후 일정시간 냉장보관후 찍어도 무방했던 기억이 있네요.
답변 2  |  2016.04.11
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