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정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. protein solubility test |
| 최근에 solubility test로 단백질의 folding과 ... 생각되는데 정확하게 solubility test를 하는 이유를 모르겠어요.. ... |
| A. - 항체는 만들 때 넣어 준 단백질 만 인식합니다.
- A라는 단백질의 soluble, insoluble form이 구조가 다릅니다.
folding 또한 ...
- soluble form 단백질을 인식하는 항체를 만들기 위해 soluble test가
필요합니다 ... |
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답변 3 | 2022.05.19 |
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| Q. Expression test와 Solubility test의 실험 원리가 궁금합니다. |
| 안녕하세요. Transformation 이후 expression test와 solubility test를 진행하는데
이 실험들의 원리가 궁금합니다. |
| A. ex)IPTG)를 넣는데
expression test는 발현유도체를 넣어서
cell ... 녹아져있는 상태여야 합니다
solubility test는 단백질이 pellet으로 가지 않고
buffer에 얼마나 잘 녹여져 있는지 알아보는 ... |
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답변 1 | 2017.11.10 |
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| Q. 급질문.. inclusion body와 western blot |
| 가면 western 해도 밴드 안나온다고 하던데요..
solubility test할 때는 처음에 lysis할 때 triton x-100 같은 detegent 안 쓰고 그냥 PBS에 cell suspension해서 sonication 하고 원심분리 해서 나온 pellet 을 8M urea로 녹여서 SDS ... |
| A. Solubilization되는 최소 urea 농도를 찾은 다음, "그 농도의 urea가 들어있는 상태에서 정제를 한 후" dialysis를 하는 것을 말씀드릴려고 했었습니다. ""에 들어갈 내용을 빼먹었네요.^^ 최소 urea 농도를 찾는 ... |
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답변 6 | 2007.05.12 |
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| Q. 단백질 정제 관련 질문입니다 |
| 찾아봐야겠습니다ㅠㅠ).
Induction test 가 몇 번을 해도 되지 않았고 ... 필요합니다. 일단 저는 induction test와 solubility를 체크할 계획입니다.
*추가
rbs와 ATG 사이가 22bp 인거를 확인했습니다. 좀 긴거같은데 ... |
| A. pellet과 상청액 모두 확인)
필요하다면 Ni-resin 조금 넣어서 test 해 보아도 좋습니다.
목적 단백질이 많이 발현되지 않으면 생체 내에는 histidine 등 N을 가지고 있는 아미노산을 가진 단백질이 많습니다. ... |
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답변 1 | 2011.03.07 |
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| Q. MIC test하는데 항생제 stock을 어떻게 만들어야 하는지 모르겠습니다... |
| 실험실 입성 첫과제로 항생제mic test를 받았는데
농도를 어떻게 계산해야할지 막막합니다.
예를들면 ampicillin의 항생제solubility가 50ug/ml 이면
MIC최종 농도인 32mg/L의 항생제 1000배농축 stock을 만들어서
M.H ... |
| A. 용어를 정확히 해야할 것 같습니다.
- ampicillin의 항생제solubility가 50ug/ml 이면
: solubility가 아니라 working 농도아닌가요?
- solubillity가 50mg/ml인 항생제를 어떻게 32mg/L stock으로 제조할지
: 위 solubility는 stock ... |
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답변 1 | 2021.08.21 |
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| Q. DMSO에 녹인 약물의 PBS 희석액에서 PBS만 제거하는 방법이 있나요? |
| 균일하게 존재하지를 못하더군요. 애초에 solubility가 water insoluble한 약물이라...
sampling까진 vortex로 계속 섞어주기에 문제는 없습니다만, release test 함량측정을 위해 HPLC 대기하는 시간동안 응집이 ... |
| A. - 이전 답변에서 말씀하신 UF같은 경우에 liposome을 거르는 방법이 아닌가요?
: 당연히 분석시 혼입된 liposome을 100% 제거해야 합니다.
- UF로 분자량 1000미만의 분자단위 filtering은 어렵지 않나요?
: UF MWCO100 ... |
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답변 9 | 2021.04.05 |
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| Q. protein overexpression에서 solublilty좀 높일수 있을까요..? |
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이처럼 solubility가 낮아서 현재 solubility를 높이는 조건을 찾고있는데 잘 ... 37도 250rpm으로 배양한뒤 TEST를 했을때 solubility가 낮아서 이번엔 0.5mM IPTG를 넣고 4시간 30분동안 25도로 배양하여 TEST했으나 ... |
| A. 1. IPTG 농도를 줄입니다.
IPTG는 1mM에서 0.5mM로 줄이는 것은 차이가 거의 없을겁니다. 0.05 mM 를 써보세요
2. 온도를 낮춥니다.
IPTG 넣기 전까지 37에서 키웁니다. 그리고 온도를 낮춘후에 IPTG를 넣습니다.
... |
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답변 3 | 2010.10.28 |
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| Q. Affinity purification으로 antibody 정제시 |
| 합니다.
헌데 이 단백질이 조금 hydrophobic 해서 solubility test시 30-40% 정도만 sup에 있습니다.
20mM GEB로 elution해서 현재 aminolink plus coupling resin을 가지고 coupling test를
해보았더니 효율이 너무나 떨어져서 ... |
| A. 단백질에 따라 다르기 때문에 어떤것이 '좋다/나쁘다'를 말할 수 없습니다.
어떤 단백질은 CNBr에 커플링이 잘 되고 어떤 단백질은 Epoxy에 잘 됩니다.
간혹 aggregation이 생기기도 합니다.
아니면 다른 resin ... |
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답변 2 | 2015.01.07 |
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Q. protein purification하기 전 SDS-PAGE 결과입니다. |  첨부파일 |
| overnight입니다.
그리고 위의 결과를 토대로 좀더 solubility를 가져갈 수 있는 조건을 유추할 수 있을까요? IPTG ... 결과를 가져올 수 있을까요? small scale로 조건 test를 한 후 large scale로 옮겨갔건만.. ㅜㅜ ... |
| A. 이거 위에서 말씀하신 sonicator로 깨신건가요? cell은 잘 깨진듯 한데...
fusion tag을 붙이신건가요? 붙이셨다면 뭘 붙이셨나요? tag의 종류와 위치를 바꿔보는것도 경험상 solubilization에 도움이 되더군요.. ... |
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답변 4 | 2012.03.12 |
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