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실험Q&A    2,574건 정확도순 날짜순
Q. western에서 samplesample buffer의 온도에 대해..
중 protein assay를 통해 단백질 정량을 하고 sample buffersample을 섞어주고 가열해주는 과정이 있자나요. 단백질을 1차구조로 변성시키기 위한 과정으로 알고 있는데 이 과정 후 가열한 sample을 다시 ...
A.   자연 산회되서 더 쉽게 분해된다는 군요. 그런데 sample buffer에는 SDS같은 물질이 들어있으며 이런 detergent가 단백질의 2,3차 구조를 풀어주는 기능을 합니다. 끓여주면 더욱 확실하게 변성이 되지요. ...
답변 1  |  2013.08.19
Q. sample buffer를 만들때 실제로 넣어야되는양
upload image 이 zymography sample buffer 실제로 만들때 어떻게 해야되는지 가르쳐주세요 ㅜㅜ 막상 만들려고 하니까 어떻게 해야할지를 모르겠어요 이것만 가지고 만들수 있는건가요?
A.  4x라는 것은 4배 농축이라는 의미입니다. 만들고자 하는 sample의 총 volume을 기준으로 1/4 만큼을 넣으란 의미입니다. 가령 총 volume이 20ul 라면 4x sample buffer는 총 volume의 1/4인 5ul가 들어가야 합니다.
답변 2  |  2014.09.19
Q. IP할때, sample buffer 사용관련 질문입니다.
단계에 보면 40ul의 1x sample buffer를 넣으라고 되어 ... 궁금한게 있는데요, 1x sample buffer 라는게 2x(또는 4x) sample buffer를 lysis buffer를 사용하여 1x로 희석시킨 다음에 40ul를 넣으라는 건가요..? 아니면 sample ...
A.  x 또는 4x sample buffer를 DW를 넣어 1x로 만든 후 넣으면 됩니다. Bead의 volume은 중요하지 않습니다. Bead를 얼마나 쓸 것인가는 내가 하는 실험에 따라 결정할 문제로서 제품에 나와있는 표준 protocol은 그냥 ...
답변 1  |  2014.02.17
Q. sample buffer 에 대한 질문입니다.
까 하는데.. 1. 그런데 sample buffer 제조 방법을 찾아보니까 ... "For best results, do not store sample buffer with β-mercaptoethanol" 이렇게 쓰여 있네요;;;;;; 이럴수가. 월요일날 당장 다시 새로 만들어서 해봐야겠어요.;; ...
A.  있습니다. 그래서 sample buffer에 넣어두면 조금씩 ... 오래 보관하고 싶다면 sample buffer를 냉동해서 보관하면 휘발성이 낮아져서 장기간 보관은 가능합니다만 실험할 때 바로바로 넣어주는 것이 가장 좋은 ...
답변 6  |  2012.03.17
Q. 2X sample buffer 에 관해서~
X sample buffer 를 사용해서 단백질을 염색한 후 SDS-PAG를 하려고 하는데요. 토탈 볼륨에 2X sample buffer를 꼭 절반을 사용해야하나요? 1/4에 해당하는 볼륨을(2X sample buffer)을 넣어도 염색도 되고 페이지를 ...
A.  X 버퍼를 꼭 sample 볼륨과 동일하게 사용하라는 법은 없습니다. 2X sample buffer 라고 해도 조성이 저마다 다르니까요. 한 예로 5X 버퍼는 어떤 경우에는 glycerol 이 50% 인것도 있는 반면 어떤 경우에는 30% ...
답변 2  |  2009.11.02
Q. western 할 때 sample buffer..질문합니다!!!
제가 찾아보기로는 이 sample buffer가 gel에 내릴때 보이게 ... . 그리고ㅠㅠ sample buffer를 다 써가는데, 사든지 만들든지 알아서 하라....고 하십니다.. 이렇게 끓여서 쓸 수 있는 샘플버퍼가 있는지요? ...
A.  저도 이거 몰라서 뒤적거리고 있었는데... 감사합니다 ㅎㅎ
답변 5  |  2010.10.13
Q. Western blot sample preparation
blot sample preparation 단계입니다. Bradford ... volume을 계산한 뒤 나머지를 sample buffer (Laemmli buffer 950 uL + 2-mercaptoethanol 50 uL)로 채워 total volume이 20 uL가 되도록 한다. 라고 가지고 있는 protocol에 나와있습니다. ...
A.  Sample buffer가 2x라면 1:1되게 ... 하에 말씀을 드리면 10ul sample buffer 6ul Protein sample 4ul DW -------- total 20ul 하시면 됩니다 ...
답변 1  |  2018.04.04
Q. sample buffer안의 단백질 정재하기
bead와 antibody분리 시 SDS sample buffer에 넣어서 끓인 후 ... 되면 IP한 단백질들이 sample buffer 안에 들어있게 되는데요... 2-D를 위해서는 따로 정재가 필요하다고 하네요. sample buffer에 있는 단백질을 어떻게 ...
A.  IP를 할 때 bead와 antibody분리 시 SDS sample buffer에 넣어서 끓인 후 분리하거든요... -> 이렇게 분리된 단백질을 다시 회수하기는 어렵다고 봅니다. co-IP를 했다면 단백질들에 tag을 달았을 것 같은데 flag ...
답변 3  |  2008.06.13
Q. sample buffer 문의
없고.. 논문에 보니 따로 lysis buffer를 사용하지 않고 sample buffer넣고 끓여서 사용하는 경우도 있던데.. 엘피스에서 나오는 Sample Buffer, Laemmli’s, 2x (EBA-1051) 사용해도 무방한가요? 그리고 whole cell lysates을 ...
A.  cell을 끓여서 영동을 건다면... cell 양 잘못맞추면 떡져서 내려갑니다. spin down했을때 tube끝 ... 놓고 씁니다. (Laemmli 950ul + mercaptoethanol 50ul) 이 dye가 sample과 1:1 로 들어갔을때 1X로 dilution이 되는고로. ...
답변 3  |  2007.07.12
Q. 5X sample buffer
blot을 시행할려고 5X sample buffer 10ml을 만들었는데 쓰고 남은건 어디다가 보관해야 할까요? 보통 그냥 RT에 보관하시는 분도 봤고 4도씨에 보관하시는 분도 봐서,, 30kda으로 밴드가 분리가 잘 안되는 것 ...
A.  실온에 보관해도 무방하고 변하지 않습니다...그러나 실온보관시에는 오염에 주의해야합니다...
답변 4  |  2011.08.12
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