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| Q. 2D Gel sample의 보관가능기간 |
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얼마나 보관이 가능한지 궁금합니다.
단백질을 얻어서 sample 버퍼에 녹인 후에 70도에서 보관한다면
2주정도 지나도 괜찮을까요????
혹시나 단백질이 변하지 않을까 걱정이예요. ... |
| A. no problems! |
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답변 2 | 2008.01.28 |
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| Q. 2D Gel 용sample의 보관가능기간. |
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얼마나 보관이 가능한지 궁금합니다.
단백질을 얻어서 sample 버퍼에 녹인 후에 70도에서 보관한다면
2주정도 지나도 괜찮을까요????
혹시나 단백질이 변하지 않을까 걱정이예요. ... |
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답변 0 | 2008.01.28 |
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| Q. protein sample |
| 안녕하세요
protein sample을 약 1달간 -70도가 아닌
-20도에 보관했는데
이럴 경우 단백질들이 다 변성되거나.. 하여간
실험할 수 없게 되나요?
가르쳐 주십시오...
감사합니다. |
| A. 일반적인 실험하는데는 문제가 없을 듯 한데요 ^^
만약 sample 을 다시 구하기 어렵다면 한번 실험해 보심이 ... |
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답변 3 | 2007.02.20 |
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| Q. western sample loading 시 aggregation이 생겨요 |
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상황을 추가하였고
제생각에는 적은 sample양비 높은 농도이거나
centri 때문이지 않을 까 싶은데 어떻게 생각하시나요 ... |
| A. 허접때기 대학원생임니다.
상황을 더 잘 설명해주시던가.. 사진을 첨부하시면 좋아보이네요..
aggregation이 생기는 경우는 단백질이 산화되면 주로 생기는데...
조건이 어떤지 모르겟네요
산화됬거나 오 ... |
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답변 2 | 2012.02.16 |
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| Q. western sample준비과정 질문입니다.ㅠ |
| 중요한게 아니고
정량을 편하게 하려고 10ug으로 적정 sample량을 정한거긴 합니다만..
30ul에 15ug이 들어가도록 준비한 후 이중 20ul를 따서 사용하여
house keeping gene의 정량이 맞는다면..
이게 20ul에 10ug이 ... |
| A. 수 있기 때문입니다.
30ul를 준비해서 20ul를 loading하는 것이 sample이 한정적이기 때문이 아니라면 그 보다 많은 volume으로 준비하는 것보다 더 정확할 겁니다 ... |
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답변 1 | 2012.12.07 |
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| Q. 5x sds sample buffer 조성 질문드립니다. |
| glycerol 25 ml
1% bpb 0.5 ml
10% sds 10 ml
DW to 50 ml
다른 실험실의 5x sample buffer 조성과는 상관없이 그냥 저희 실험실 조성에 5배를 곱하여 만들면 될까요? ... |
| A. http://cshprotocols.cshlp.org/content/2016/3/pdb.rec088336.full?text_only=true
다른 버퍼들 recipe도 많으니 나중에 필요하실 때 참고하세요. |
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답변 5 | 2022.02.25 |
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| Q. 세포에 sample 처리하는 방식에 대해 |
| 2 mL media를 먼저 cell에 분주하고
그 cell에 10 uL sample를 바로 넣어주는 것입니다.
하지만 직접처리하게 되면 처리된 부분의 바로 아래 cell들이 다 죽어버립니다.
아무리 천천히 넣어줘도 cell이 뜨거나 ... |
| A. media에 혼합해서 처리하는 것이 가장 좋은데 직접 처리를 한다면 DMSO에
시료를 고농도로 제조한 후 media로 1차 희석 후 적정 농도의 DMSO농도로
만든 후 cell에 처리하는 것이 좋습니다. |
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답변 3 | 2020.04.09 |
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Q. SDS-PAGE시 sample이 well에서 끌리는 현상이 나타납니다. |  첨부파일 |
| 8)은 다시 만들고, 10% SDS는 제품을 이용하였으나, 다시 만든 sample buffer도 끌리는 현상이 나타났습니다.
어떤 시약 때문에 protein이 aggregation되어 loading이 되지 않는지 ... |
| A. 같습니다.
연구실에 BSA와 같은 정제된 단백질을 새로 만든 sample buffer에 넣어 PAGE로 확인해보시면 어떨까요 ... |
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답변 5 | 2020.10.15 |
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| Q. western에서 sample과 sample buffer의 온도에 대해.. |
| 위해 다시 녹이고 아이스에 꽂아서 하나씩 꺼내 gel에다가 sample을 넣고 전기영동을 합니다. 저희 실험실에서는 그렇게 계속 했는데요.
아이스에 꽂아두는 건 단백질이 변성되지 말라고 꽂아둔다고 ... |
| A. 있습니다.
자연 산회되서 더 쉽게 분해된다는 군요.
그런데 sample buffer에는 SDS같은 물질이 들어있으며 이런 detergent가 단백질의 2,3차 구조를 풀어주는 기능을 합니다. 끓여주면 더욱 확실하게 변성이 ... |
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답변 1 | 2013.08.19 |
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| Q. SDS-PAGE 에서 sample을 well에 주입시 sample이 가라앉지 않습니다. |
| D.W / 2. running buffer의 문제 / 3. sample loading buffer의 문제 / 4. sample 제작 과정의 문제 입니다.
피드백을 계속 해봐도 같은 실패로 이어져서 골머리가 아프네요.
제가 혹여나 놓치고 있는 점이나, 문제점을 ... |
| A. 저도 같은 생각입니다.
실제 10x buffer를 그대로 쓰는 사람을 본적도 있습니다. |
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답변 3 | 2013.07.18 |
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