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실험Q&A    7,799건 정확도순 날짜순
Q. 2D Gel sample의 보관가능기간
얼마나 보관이 가능한지 궁금합니다. 단백질을 얻어서 sample 버퍼에 녹인 후에 70도에서 보관한다면 2주정도 지나도 괜찮을까요???? 혹시나 단백질이 변하지 않을까 걱정이예요. ...
A.  no problems!
답변 2  |  2008.01.28
Q. 2D Gel 용sample의 보관가능기간.
얼마나 보관이 가능한지 궁금합니다. 단백질을 얻어서 sample 버퍼에 녹인 후에 70도에서 보관한다면 2주정도 지나도 괜찮을까요???? 혹시나 단백질이 변하지 않을까 걱정이예요. ...
답변 0  |  2008.01.28
Q. protein sample
안녕하세요 protein sample을 약 1달간 -70도가 아닌 -20도에 보관했는데 이럴 경우 단백질들이 다 변성되거나.. 하여간 실험할 수 없게 되나요? 가르쳐 주십시오... 감사합니다.
A.  일반적인 실험하는데는 문제가 없을 듯 한데요 ^^ 만약 sample 을 다시 구하기 어렵다면 한번 실험해 보심이 ...
답변 3  |  2007.02.20
Q. western sample loading 시 aggregation이 생겨요
----------------------------- 상황을 추가하였고 제생각에는 적은 sample양비 높은 농도이거나 centri 때문이지 않을 까 싶은데 어떻게 생각하시나요 ...
A.  허접때기 대학원생임니다. 상황을 더 잘 설명해주시던가.. 사진을 첨부하시면 좋아보이네요.. aggregation이 생기는 경우는 단백질이 산화되면 주로 생기는데... 조건이 어떤지 모르겟네요 산화됬거나 오 ...
답변 2  |  2012.02.16
Q. western sample준비과정 질문입니다.ㅠ
중요한게 아니고 정량을 편하게 하려고 10ug으로 적정 sample량을 정한거긴 합니다만.. 30ul에 15ug이 들어가도록 준비한 후 이중 20ul를 따서 사용하여 house keeping gene의 정량이 맞는다면.. 이게 20ul에 10ug이 ...
A.  수 있기 때문입니다. 30ul를 준비해서 20ul를 loading하는 것이 sample이 한정적이기 때문이 아니라면 그 보다 많은 volume으로 준비하는 것보다 더 정확할 겁니다 ...
답변 1  |  2012.12.07
Q. 5x sds sample buffer 조성 질문드립니다.
glycerol 25 ml 1% bpb 0.5 ml 10% sds 10 ml DW to 50 ml 다른 실험실의 5x sample buffer 조성과는 상관없이 그냥 저희 실험실 조성에 5배를 곱하여 만들면 될까요? ...
A.  http://cshprotocols.cshlp.org/content/2016/3/pdb.rec088336.full?text_only=true 다른 버퍼들 recipe도 많으니 나중에 필요하실 때 참고하세요.
답변 5  |  2022.02.25
Q. 세포에 sample 처리하는 방식에 대해
2 mL media를 먼저 cell에 분주하고 그 cell에 10 uL sample를 바로 넣어주는 것입니다. 하지만 직접처리하게 되면 처리된 부분의 바로 아래 cell들이 다 죽어버립니다. 아무리 천천히 넣어줘도 cell이 뜨거나 ...
A.  media에 혼합해서 처리하는 것이 가장 좋은데 직접 처리를 한다면 DMSO에 시료를 고농도로 제조한 후 media로 1차 희석 후 적정 농도의 DMSO농도로 만든 후 cell에 처리하는 것이 좋습니다.
답변 3  |  2020.04.09
Q. SDS-PAGE시 sample이 well에서 끌리는 현상이 나타납니다.  |  첨부파일 첨부파일
8)은 다시 만들고, 10% SDS는 제품을 이용하였으나, 다시 만든 sample buffer도 끌리는 현상이 나타났습니다. 어떤 시약 때문에 protein이 aggregation되어 loading이 되지 않는지 ...
A.  같습니다. 연구실에 BSA와 같은 정제된 단백질을 새로 만든 sample buffer에 넣어 PAGE로 확인해보시면 어떨까요 ...
답변 5  |  2020.10.15
Q. western에서 samplesample buffer의 온도에 대해..
위해 다시 녹이고 아이스에 꽂아서 하나씩 꺼내 gel에다가 sample을 넣고 전기영동을 합니다. 저희 실험실에서는 그렇게 계속 했는데요. 아이스에 꽂아두는 건 단백질이 변성되지 말라고 꽂아둔다고 ...
A.  있습니다. 자연 산회되서 더 쉽게 분해된다는 군요. 그런데 sample buffer에는 SDS같은 물질이 들어있으며 이런 detergent가 단백질의 2,3차 구조를 풀어주는 기능을 합니다. 끓여주면 더욱 확실하게 변성이 ...
답변 1  |  2013.08.19
Q. SDS-PAGE 에서 sample을 well에 주입시 sample이 가라앉지 않습니다.
D.W / 2. running buffer의 문제 / 3. sample loading buffer의 문제 / 4. sample 제작 과정의 문제 입니다. 피드백을 계속 해봐도 같은 실패로 이어져서 골머리가 아프네요. 제가 혹여나 놓치고 있는 점이나, 문제점을 ...
A.  저도 같은 생각입니다. 실제 10x buffer를 그대로 쓰는 사람을 본적도 있습니다.
답변 3  |  2013.07.18
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