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실험Q&A    1,119건 정확도순 날짜순
Q. real time PCR 결과물 상대정량 계산법이요
real time PCR 초보래서 상대정량 계산법에 대해 문의드리고 싶어서요 전 동물(대조군 6마리, 비교군 6마리)에서 RNA를 추출해서 PCR을 수행하였는데 상대정량 비교를 할때 2^-(비교군 값 - 대조군 ... 위 ...
A.  housekeeping gene의 expression level로 나눠주는 것이 공정한 normalization 방법이라 생각합니다만, 왜 2의 제곱이 되는지는 언뜻 이해가 안가요...;;
답변 2  |  2007.06.26
Q. real-time PCR에 관련한 질문입니다.
taqman probe로 real-time PCR을 하고있습니다. ... 되어서말입니다.. real-time PCR이 초보라서 이렇게 선생님들의 조언을 구하고자 글을 올립니다. 답글부탁드립니다.^^; ...
A.  글쎄요. undetermined 값을 가진 샘플의 cDNA에서 control은 잘 잡히나요? 예를 들어서 b-actin이나 gapdh 같은 gene 말이예요. control gene도 undetermined로 나온다면 cDNA가 깨졌거나 없는 것이겠고, 측정한 농도 값도 ...
답변 1  |  2008.06.13
Q. real-time pcr에서 ct값의 허용 오차범위는?
real-time pcr을 duplicate로 실험하고 있는데요 같은 샘플의 ct값이 pipetting에 문제가 있는건지 차이가 조금씩 나는 것도 있습니다. ct값의 오차범위를 어느정도 까진 그냥 사용해도 무방할런지요? 어디서 ...
A.  평균값을 이용합니다. Ct가 2-3 차이나는 것은 너무 많이 나는 것이네요. 어느 선까지 가능한지에 대한 문제보다는 duplicate이나 triplicate으로 하였을때 편차값으로 본인의 결과 신뢰값을 나타내주면 됩 ...
답변 1  |  2005.07.18
Q. real time PCR에 관해 질문드립니다.
스트레스에 대한 발현양을 비교해보는 중이라 real time PCR을 하고 있는데요. control로는 16s rRNA 를 쓰고 있구요.. 오히려 다른 gene들은 실험결과가 그럭저럭 괜찮은듯 한데, 16S가 전혀 안잡힙니다.. ...
A.  어느 system에서나 100% 확실한 control은 없는 것 같습니다. 저 같으면 GAPDH, 18S rRNA, cyclophilin을 모두 사용하고 있는데, 각 control마다 약간씩은 차이가 있습니다. 그리고 cell line에 따라서, tissue에 따라서, 어 ...
답변 5  |  2006.12.04
Q. real-time pcr에 관해 알고 싶습니다
real-time pcr을 처음 시작하려는 ... 상대정량법으로 real-time pcr을 실행하려면 어떻게 해야 하는지... data계산은 어떻게 해야하는 건지 알고 싶습니다. 처음하려니 뭐가 뭔지 모르겠군요. 많은 조언 ...
A.  처음 시작을 하시려는 분 같습니다. 처음하시려니 잘 모르시겠죠? 처음 실험을 하실 때는 textbook을 먼저 읽어보시고 여기에 질문하십시오. 아니면 여기 검색창에 realtime만 검색해봐도 기본은 쉽게 나 ...
답변 1  |  2005.05.07
Q. real time PCR 값 통계처리
Real time PCR 상대정량에 대해 문의한 학생인데요. 저는 in vivo 실험을 대조군 6마리 비교군 6마리를 사용하여 진행하였습니다. 대조군을 1로 했을때 비교군 값을 비교를 하였고 모두 평균값으로 계산을 ...
답변 0  |  2007.06.27
Q. real time pcr 의뢰
real time pcr 실험을 대행하는 업체를 찾으려고 합니다. 리플 부탁드립니다. ^-^
A.  옛날 학회에서 씨젠인가 하는 회사에서 대행해준다는 팜플렛을 봤던적이 있습니다.
답변 4  |  2008.03.24
Q. real-time pcr probe design 문의 드립니다..
Real-time pcr 초보입니다.. 이번에 real-time pcr(Taqman probe)을 하려고 하는네.. 여러 회사에서 universal한 probe가 있지만 제 실험하고는 안맞아서.. 직접 probe design을 하려고 합니다.. Taqman probe design시 고려해야될 ...
A.  음... 제가 몇번 디자인해본적이 있어서 짧은 소견이지만 말씀드린다면... product 사이즈를 100-200bp사이로 나오게끔 디자인 했고, Annealing tem.을 62-63도 사이로 하였습니다
답변 1  |  2008.05.20
Q. real-time PCR의 standart curve...
real-time PCR과 standard curve를 ... 어찌되는 건가요? real-time PCR 경험이 있으신 분들의 답변을 부탁드립니다 ...
답변 0  |  2011.04.11
Q. real-time pcr ct값에서...
real-time pcr로 실험을 하고 있습니다. 그런데 꽤 여러개의 데이터에서 refernce gene보다 제가 실험하고 있는 gene이 더 빨리 뛰어서 ct값이 적게 나와 refernce gene과의 차가 (-) 값이나오네요. 제가 이런 경우를 ...
A.  -값이 나오면 mRNA 양이 더 많다는 뜻 아닌가요? 2^-△△ct 로 계산해보세요 그럼 +값으로 fold change 구할수있습니다.
답변 1  |  2009.09.08
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