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실험Q&A    1,105건 정확도순 날짜순
Q. real time PCR 결과물 상대정량 계산법이요
내서 계산을 해도 되는지요? real time PCR을 사용하시는 분들 계시면 방법을 알려주시면 정말 감사하겠습니다 ...
A.  housekeeping gene의 expression level로 나눠주는 것이 공정한 normalization 방법이라 생각합니다만, 왜 2의 제곱이 되는지는 언뜻 이해가 안가요...;;
답변 2  |  2007.06.26
Q. real-time PCR에 관련한 질문입니다.
측정이 되어서말입니다.. real-time PCR이 초보라서 이렇게 선생님들의 조언을 구하고자 글을 올립니다. 답글부탁드립니다.^^; ...
A.  글쎄요. undetermined 값을 가진 샘플의 cDNA에서 control은 잘 잡히나요? 예를 들어서 b-actin이나 gapdh 같은 gene 말이예요. control gene도 undetermined로 나온다면 cDNA가 깨졌거나 없는 것이겠고, 측정한 농도 값도 ...
답변 1  |  2008.06.13
Q. real-time pcr에서 ct값의 허용 오차범위는?
real-time pcr을 duplicate로 실험하고 있는데요 같은 샘플의 ct값이 pipetting에 문제가 있는건지 차이가 조금씩 나는 것도 있습니다. ct값의 오차범위를 어느정도 까진 그냥 사용해도 무방할런지요? 어디서 ...
A.  평균값을 이용합니다. Ct가 2-3 차이나는 것은 너무 많이 나는 것이네요. 어느 선까지 가능한지에 대한 문제보다는 duplicate이나 triplicate으로 하였을때 편차값으로 본인의 결과 신뢰값을 나타내주면 됩 ...
답변 1  |  2005.07.18
Q. real time PCR에 관해 질문드립니다.
발현양을 비교해보는 중이라 real time PCR을 하고 있는데요. control로는 16s rRNA 를 쓰고 있구요.. 오히려 다른 gene들은 실험결과가 그럭저럭 괜찮은듯 한데, 16S가 전혀 안잡힙니다...그니까,, product양이 ...
A.  어느 system에서나 100% 확실한 control은 없는 것 같습니다. 저 같으면 GAPDH, 18S rRNA, cyclophilin을 모두 사용하고 있는데, 각 control마다 약간씩은 차이가 있습니다. 그리고 cell line에 따라서, tissue에 따라서, 어 ...
답변 5  |  2006.12.04
Q. real-time pcr에 관해 알고 싶습니다
없는건가요? 상대정량법으로 real-time pcr을 실행하려면 어떻게 해야 하는지... data계산은 어떻게 해야하는 건지 알고 싶습니다. 처음하려니 뭐가 뭔지 모르겠군요. 많은 조언 부탁드립니다. 감사합니다 ...
A.  여기에 질문하십시오. 아니면 여기 검색창에 realtime만 검색해봐도 기본은 쉽게 나옵니다. 질문을 보니 전혀 감이 없으신듯해서 한말씀 올립니다. 쉽게 얻은 지식은 자기것이 쉽게 되지 않는 ...
답변 1  |  2005.05.07
Q. real time PCR 값 통계처리
지난번에 Real time PCR 상대정량에 대해 문의한 학생인데요. 저는 in vivo 실험을 대조군 6마리 비교군 6마리를 사용하여 진행하였습니다. 대조군을 1로 했을때 비교군 값을 비교를 하였고 모두 평균값으로 ...
답변 0  |  2007.06.27
Q. real time pcr 의뢰
real time pcr 실험을 대행하는 업체를 찾으려고 합니다. 리플 부탁드립니다. ^-^
A.  옛날 학회에서 씨젠인가 하는 회사에서 대행해준다는 팜플렛을 봤던적이 있습니다.
답변 4  |  2008.03.24
Q. real-time pcr probe design 문의 드립니다..
time pcr 초보입니다.. 이번에 real-time pcr(Taqman probe)을 하려고 하는네.. 여러 회사에서 universal한 probe가 있지만 제 실험하고는 안맞아서.. 직접 probe design을 하려고 합니다.. Taqman probe design시 고려해야될 ...
A.  음... 제가 몇번 디자인해본적이 있어서 짧은 소견이지만 말씀드린다면... product 사이즈를 100-200bp사이로 나오게끔 디자인 했고, Annealing tem.을 62-63도 사이로 하였습니다
답변 1  |  2008.05.20
Q. real-time pcr ct값에서...
real-time pcr로 실험을 하고 있습니다. 그런데 꽤 여러개의 데이터에서 refernce gene보다 제가 실험하고 있는 gene이 더 빨리 뛰어서 ct값이 적게 나와 refernce gene과의 차가 (-) 값이나오네요. 제가 이런 경우를 ...
A.  -값이 나오면 mRNA 양이 더 많다는 뜻 아닌가요? 2^-△△ct 로 계산해보세요 그럼 +값으로 fold change 구할수있습니다.
답변 1  |  2009.09.08
Q. Real-time PCR에 대해 궁금한게 있어서요....
궁금합니다 ㅋㅋ 마지막으로 Real-time PCR을 할 때 Kit를 사용하는 것과 mixture를 사용하는 것 중 어떤 것이 더 저렴한가요??ㅋㅋ 좋은 답변 기다리겠습니다^ ...
A.  같은 프라이머를 사용해도 되지만 리얼타임 피시알로 할 경우에는 사이즈가 200 (사이버그린)보다 작을 경우입니다. 사이버그린으로 할 경우 사이즈가 커버리면 에러가 많이 나겠죠. 저는 사이버그린 ...
답변 1  |  2010.09.20
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