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실험Q&A    4건 정확도순 날짜순
Q. qRT-PCR negative control에서 ct가 뜰 때
안녕하세요! 비생물랩에서 혼자 pcr하느라 여기 실험게시판 큰 도움 받으며 살고있는 원생입니다. miRNA의 qRT-PCR을 하는데요 두번에 한번꼴로 negative control(template cDNA 대신 버퍼를 넣음)에서 30 중후반의 ...
A.  primer dimer일 확률이 높아 보이네요. gel 걸어서 non specific band인지 dimer인지 확인해보세요
답변 2  |  2018.12.06
Q. 분자생물학 실험용 얼음은 어떻게 만드시나요?
안녕하세요! 실험게시판에서 항상 큰 도움 얻어가고있는 원생입니다. 간단한 질문 드립니다. miRNA qRT-PCR에 얼음이 필요하다고 하는데, 이 얼음은 어떻게 만드는지 궁금합니다. 혹시 DW로 만들어야 하는 ...
A.  실험에서 얼음은 대부분 특정 샘플이나 시약이 들어있는 튜브나 용기를 꽂아놓고 온도를 낮은 온도로 유지 하는데 활용됩니다. 즉 실험에 직접적으로 첨가되지는 않으므로 수돗물로 하셔도 무방하구 ...
답변 1  |  2018.07.18
Q. rt kit에 들어있는 enzyme이 녹아있네요....
현재 miRNA qRT-PCR 하고 있습니다. -20도 냉동고 몇 번 열었다 닫았더니+방에 에어컨이 잠깐 꺼진 사이에 rt kit 속 구성품인 enzyme이 녹아있네요..... 참고로 Qiagen miScript RT kit 사용중입니다. 키트 속 다른 것 ...
A.  상용 enzyme이라면 얼지 않고 끈적한 용액상태로 있는 게 정상입니다. 단백질의 경우 freeze-thaw 과정에서 변성되기 때문에, glycerol 등으로 안정화시키는데 이로 인해 ㄷ 동결 자체가 잘 되지 않습니다.
답변 5  |  2018.08.16
Q. sphere 형성된 cell에서 qRT PCR이 안됩니다.
안녕하세요 sphere culture를 하게 된지 6개월이 되었는데 결과가 없어서 이렇게 올려봅니다. 문제는 sphere cell로 자란 HCT116,, HT-29와 플레이트에서 부착되어서 자라는 HCT116, HT29 세포를 모아서 qRT-PCR을 하면 ...
A.  sphere배양하신 세포를 뽀게서 RNA를 뽑는게 생각보다 쉽지않지요?? 잘 안뽀게 질꺼예요~2-mercapto?! 맞나 암튼 최대한 잘 뽀게야 합니다. 그리고 보시는 SOX2 나 Nanog유전자는 생각보다 유전자 발현양상이 ...
답변 1  |  2015.05.20
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