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정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. qRT PCR |
| real time pcr 을 하고 있는데요ㅡ,.-
ct 값이 actin 에서 14~19 정도가 나오고,
primer A 에서는 ct값이 24~29 나오고,
B에서는 35~39 가 나오는데요.
60 도에서 40 cycle 돌렸구요
단순히 A의 값은 신뢰할 수 없는걸까요?? |
| A. 무슨말인지 좀 더 자세히 써주세요..ㅡㅡ |
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답변 1 | 2011.09.05 |
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| Q. qRT-pcr protocol 문의. |
| RT-PCR만 해보고, qPCR이나 qRT-PCR은 해본적 없는 학생입니다.
qRT-PCR를 해보려고 셋업을 하고자 하는데,
몇가지 의문이 있어서 문의 드립니다.
1) 보통 qPCR할 때엔, 관심 유전자의 길이가 길더라도,
100-200 ... |
| A. sybr green PCR 하면 1), 2)번에 관해 아무리 들여다 보아도 알 수 없어요.
elongation, denaturation, annealing temp가 적절한지를 점검하는 gradient PCR이 별도로 있고, 그런 PCR은 큐피씨알 하기 전에 전통적인 "젤 베이 ... |
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답변 2 | 2018.04.27 |
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| Q. qRT-PCR 결과가 제대로 나오지 않습니다. |
| primer 사용했을 때 마우스로부터 얻어낸 cell에서는 제대로 qRT-PCR 결과가 나오는 것을 확인했습니다.
여러가지 찾아보았지만 도대체 왜 HUVEC cell과 Raw 264.7 cell의 경우는 제대로 결과가 나오지 않는지 알 ... |
| A. HUVEC cell (https://www.atcc.org/products/all/CRL-1730.aspx)
=> Human cell
Raw 264.7 cell (https://www.atcc.org/products/all/TIB-71.aspx)
=> Mouse cell
일단 프라이머가 세포에서 발현되는 유전자를 정확히 잡는지 NCBI에서 확인해 보시구 ... |
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답변 3 | 2017.06.16 |
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Q. qRT-PCR 그래프 해석좀 해주세요..ㅠㅠ |  첨부파일 |
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그래프 밑의 참조 내용인데요, 이 논문이 ddPCR과 qRT-PCR의 차이를 비교하는 건데
실험을 해본적이없어서 무엇을 나타내는지 무엇을 의미하는지 정말 모르겠습니다. ... |
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답변 0 | 2016.01.05 |
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| Q. qRT-PCR primer |
| 주문하였는데요
역시나 qRT 결과가 들쑥날쑥 하더라구요.
qRT-PCR로 사이즈가 큰 유전자를 검증할 때 어떻게 해야할까요 ㅠㅠ ... |
| A. 꼭 모든 유전자를 다 걸치게 프라이머를 짜서 증폭 시킬 필요가 없습니다.
해당 유전자의 가장 많이 발현하는 exon 정보를 파악하신 뒤
가장 dominant한 exon 을 1~2개 정도 걸치도록 짜시면 될 것 같습니다. ... |
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답변 1 | 2016.08.18 |
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| Q. qRT-PCR 질문입니다. (절대정량,상대정량) |
| 상대정량인지 절대정량인지 궁금합니다.
상대정량으로 qRT-PCR을 진행했는데, 요즘 갑자기 혼란스럽네요.
만약 절대정량이라면 실험상이나 Setting 또는 결과상에 차이가 있는지요??
답변부탁드립니다^ ... |
| A. 질문하신 내용은 absolute copy number를 뜻하는 것으로, 절대 정량입니다.
실험상의 setting과 결과상의 차이를 어떤 걸 질문하시는지 자세히 질문해 주세요. |
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답변 2 | 2016.08.23 |
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| Q. qRT-PCR primer 관련 질문입니다 |
| 7BL/6 마우스인데 제가 찾은 논문은 DBA/1J mouse 샘플을 이용한 qRT-PCR 결과입니다. 논문의 레퍼런스 primer set를 b6 mouse의 샘플에 사용가능한가요?
2. murine primer 중에서도 논문마다 사용한 sequence가 다른데 ... |
| A. 1.은 패스.
2. 스피시픽한지 아닌지 검증해보아 잘 들으면, 그 시퀀스를 가진 프라이머를 사용하면 되겠죠. 프라이머를 어떻게 결정하는지 알아요? 두가지 방법이 있어요.
첫째, 보스가 허락하면, 남이 ... |
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답변 2 | 2019.05.07 |
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| Q. Single blastocyst 샘플을 이용한 qRT-PCR |
| single blastocyst는 cell number가 50개 내외거든요.
그래서 one-step qRT-PCR kit도 고려해봤는데 invitrogen 사이트에 보니 종류가 꽤 많네요.
혹시 one-step kit을 써보신 분 계시면 좀 추천 부탁드립니다.
그리고 다른 ... |
| A. 저희 이효바이오에서 취급하는 Kapa 브랜드의 SYBR kit를 사용해보시는것을 권해드립니다.
Roche 기기 전용 SYBR kit와, Roche 기기 전용의 one-step SYBR kit 모두 제품이 나옵니다.
one-step SYBR kit 사용시, total RNA양 ... |
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답변 2 | 2012.01.04 |
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| Q. qRT-PCR 관련 질문 |
| Takara qRT-PCR 기기를 이용하여 qRT-PCR을 수행하였습니다. 실험시 dye는 SYBR Gr을 이용하여 실험을 수행하였습니다. 제 질문은 실험결과에 나타나는 SyG ct값과 Empty ct값의 차이는 무엇이고 최종적으로 fold ... |
| A. 설명서에 ct계산법이 있을거예요 ㅎ |
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답변 2 | 2011.03.14 |
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| Q. qRT PCR 실험 결과값이 예상보다 감소한 값이 나옵니다.. |
| mRNA 전사량이 비슷하다는 것을 증명하기 위해 qRT-PCR 을 수행해 보았습니다
예상값은 pcr 결과값이 비슷해야하는데 대조군에 비해 살짝 감소한 양이 나오더라구요
다른 논문들을 조금 찾아보니 우리와 ... |
| A. 보통 rt결과상에서 2배이상 차이나지 않으면 의미가 없다고 해석합니다 |
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답변 1 | 2018.10.01 |
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