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| ⓘ 'Real Time PCR' 관련 검색광고입니다. |
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PCR master mix 조제부터 분주까지 자동화 |
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| 1,008건 |
정확도순 ㅣ 날짜순
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Q. qPCR melt curve가 이상합니다. |  첨부파일 |
| 보통 qPCR을 진행했을 때 melt curve가 예쁘게 one-peak으로 떴었는데
이번 실험에서는 melt curve가 그 전과 다르게 이상하게 뜹니다.
cDNA sample은 기존에 계속 사용하던 것이라 문제가 없을 것으로 생각되어서 ... |
| A. 정확히는 모르겠지만, melting curve를 나타내는 방식이 몇 가지 있었습니다.
메뉴에 melting curve를 peak 형태로 바꾸는 게 있을 겁니다.
확인해 보세요. |
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답변 2 | 2016.08.05 |
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| Q. qPCR 기계가 어느 방향에서 Fluorescein을 Detect하나요? |
| 300으로 RT-qPCR을 많이 하는 대학원생입니다.
그 동안 선임자가 형광물질이 96 well plate의 밑에서 Detect된다고 해서 그렇게 알고 있었는데
얼마전 다른 동료 대학원생이 위에서 Detect한다고 해서 의문이 ... |
| A. 회사마다 혹은 기종마다 검출메카니즘이 다를 수 있습니다.
Abi는 위에서 쏘고 받습니다. 그러니까 투명한 실링 필름을 사용하는 것이지요. 같음 이유로 투명한 웰은 불리합니다. 가계바닥에서. 또는 ... |
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답변 3 | 2012.09.26 |
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| Q. qPCR 고수님들께 한수 배우고자 합니다. |
| 될법도 한데, 무엇을 위해서 qPCR을 돌리는 걸까요?
qPCR과정이 왜 필요하며, 이 과정을 통해 무엇을 얻을 수 있는지 궁금합니다 ... |
| A. 단순 sequencing 할꺼면 굳이 qPCR 필요없겠지요.
qPCR은 정량하려는건데 similarity 확인하려는거면 필요가 없겠지요?
mutant를 확인하려고 2nd PCR하는거라면 몰라도 qPCR은 필요가 없겠네요 |
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답변 1 | 2014.08.06 |
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| Q. chromosomal DNA qPCR loading control |
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저의 경우는 쥐의 꼬리에서 chromosomal DNA를 뽑아서 genomic DNA qPCR을 하려고합니다.
이때 loading control을 어떤것을 사용할 수 있는지요?
암만 찾아봐도 제가 못찾는것 같습니다만, 혹 해당 실험을 하시는 ... |
| A. 같은 양의 genomic DNA에는 대부분의 유전자가 동일한 copy수로 존재합니다. 어떤 것이던 genome내에서 copy수가 변하지 않는 것이라면 loading control로 사용할 수 있습니다. GAPDH를 사용해도 무난할 겁니다. |
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답변 1 | 2014.05.22 |
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| Q. real time PCR과 DNA 농도 관계.. 도와주세요 | 첨부파일 |
| gDNA 가지고 qPCR을 하고 있는 중입니다
standard를 잡으려고 농도를 200, 100, 50, 25, 10 으로 물로 희석하여 실험하고 있는데요
소의 dna이고 조직에서 추출하였고 순도는 1.8입니다
product size는 667 이고요 ... |
| A. gDNA는 real-time 하기가 상당히 까다롭습니다. 같은 gDNA를 사용해도
매번 결과값이 다르게 나오기도 하구요.
저도 상당히 애를 먹은 기억이 나네요.
농도별로 한다고해서 log값이 비례해서 나오지를 않더 ... |
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답변 2 | 2015.02.12 |
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| Q. qPCR melting curve 분석 질문합니다~ |
| 브릭회원님들
다름이 아니라, qPCR analysis를 열심히 하고 있는데,
Melting curve 분석에 난항을 겪고 있어 도움을 청합니다.
그림 바로 보여 드리겠습니다.
upload image
그림 1. 동일 primer (qiagen predesigned)로 ... |
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답변 0 | 2014.11.19 |
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| Q. real time PCR 질문들이요... |
| primer 를 다른 부분으로 다시 짜야하는 것일까요??
3. 혹시 qPCR 할 때 중요하게 꼭 check 해야하는 것들이 있을까요?
힝....
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비가 옵니다. 다들 실험 열심히 하시구요...
비오니까 실험하기 시러요~ ... |
| A. 다른부분으로 다시 짜는게 좋을듯?!? 싶네요~
그리고.. qPCR 할때 중요시봐야되는거 한가지는 melt curve 인거 같습니다~ ... |
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답변 1 | 2012.07.06 |
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| Q. qPCR에 관해 여주어봅니다. |
| qPCR primer로 conventional PCR을 시행하고 PCR 산물을 이용하여 qPCR의 template로 하고 primer 없이 probe만 넣고 실험을 진행 한다면 예상 되느 ㄴ결과는 어떤것 일까요??? signal 확인이 가능할 까요?? 예상으론 약 20 ... |
| A. 붙지만 70C를 넘어가게 되면 probe만 붙습니다.
Taqman방식의 qPCR은 Taq pol의 3' to 5' exonuclease에 의해 probe가 깨지면서 나오는 형광의 쎄기를 측정하는 방식입니다. probe만 넣고는 signal의 변화를 볼 수 ... |
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답변 2 | 2014.06.23 |
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| Q. qPCR에 대해 궁금합니다. |
| 이럴 경우 어떻게 해야 하나요?
그리고 저번에 다른 sample을 qPCR할 때 Primer를 다시 디자인 하거나 해서 맞춰놨었는데
이번에 새로운 sample을 하니 잘 되던 Primer가 안 되거나 No Ct라고 뜹니다. 샘플을 바꿀 ... |
| A. 잘 되었는지 확인하기 위해 gel에 걸어봤는데 마지막 한 개(제일 고농도)가 옅게 나왔습니다. 그 이유는 어떤 것 때문인가요?
>> gel 에 걸어보셨다는 건 합성한 cDNA를 gel 에 걸어보셨다는 것 인가요?
cDNA ... |
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답변 3 | 2018.04.02 |
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| Q. qPCR정량 결과에 대해 질문합니다 |
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알고자하는 시료의 nanodrop 결과가 38ug/ml 정도 나왔는데 qPCR결과 quantity가 0.06밖에 나오지 않았습니다. 결과가 이렇게 나오는 이유가 뭔지 모르겠습니다.... |
| A. 다른 기기가 있다면 병행해서 DNA 농도를 재 보세요.
그리고 qPCR에 사용하는 primer를 다른 set으로 바꿔서도 시도해 보세요 ... |
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답변 1 | 2018.06.29 |
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