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Q. gel purification에 대한 질문  |  첨부파일 첨부파일
purification이후의 전기영동 결과입니다. 사진으로 봤을 때 purification하고 난이후의 밴드가 확실히 전보다 희미해지고, band가 거의 보이지 않는 경우도 있는 데, 이는 왜 이런 결과가 나오는 건가요?? ...
A.  GB buffer가 어느제품인지는 모르겠습니다만 agarose gel extraction buffer는 보통 젤 무게의 3~4배정도 넣는다고 알고있습니다. 그리고 GB buffer 두껑입구에 salt가 많이 있었다면, 새제품을 사용하세요. 이유는 ...
답변 1  |  2014.11.05
Q. DNA extraction 후 purification 과정에서 도와주세요
안녕하세요 DNA 뽑는 것부터 버벅대고 있는데 좀 도와주세요ㅠ 지금 제가 bacterial cell에서 DNA extraction ... proteinase K 처리는 해봤지만 purity는 더 떨어지기만 합니다ㅠ DNA purification 과정 좀 도와주세요 ...
A.  답변 감사합니다! 제가 잘 몰라서 그러는데ㅠ A260/280 1.8~ 과 1.5 정도는 data값이 차이 나지는 않나요? real-time PCR 할 때 1.5~ 까지는 괜찮은건가요? -------------------------------------------------- 청개구리 명품남 ...
답변 2  |  2013.10.30
Q. tubulin purification
결과, 아주 깨끗하게 나왔습니다. ㅡㅡ; Protein Expression and Purification 45(2006) 183-190 논문 참고 하였구요, material과 method 모두 동일하게 했습니다. 처음에 이 논문에 나온대로 2*10의 9제곱의 cell로 ...
답변 0  |  2010.09.07
Q. kit로 DNA purification후에 gel purification할때 질문입니다 ㅠ
겔 영동한후에 well을 잘라서 어디에 담아서 gel purification을 진행해야하는지 또 buffer volume을 gel volume에 3배, 1배 이런 말들이 있는데 이걸로 gel의 volume은 어떻게 알수있는지 프로토콜에 나와있지 ...
A.  프로토콜대로) 겔 영동한후에 well을 잘라서 어디에 담아서 gel purification을 진행해야하는지....'에서 왜 DNA 100uL을 왜 37도에서 incubation을 하시는가요?? ...
답변 4  |  2016.01.12
Q. cloning할때 dna purification을 할 때 왜 cut한 vector는 gel purification을 하고 insert는 PCR purification을 하나요?
cloning 할때 dna purification을 할 때 왜 cut한 vector는 gel purification을 하고 insert는 PCR purification을 하나요?
A.  cloning 시 사용하는 vector와 insert의 정제는 불순물 종류에 따라 권장하는 정제방법이 달라집니다. 1. vector - 1 cut해서 사용하는경우 : EtOH 침전만으로 사용가능, gel elution해도 무방 - 2cut해서 사용하는 경 ...
답변 3  |  2019.05.14
Q. linearized plasmid 의 purification
알고있는데요, PCR product purification kit 혹은, plasmid purification kit 를 사용해도 괜찮을까요? 다른 방법이 있으시면 알려주심 감사하겠습니다 ...
A.  코스모진텍에서 나오는 gel extraction kit를 이용해보세요
답변 2  |  2013.02.12
Q. Phage display에서 DNA purification
그래서 이번에 DNA 샘플을 의뢰할때에 PCR이나 gel purification을 부탁했었는데요, 업체에서 하는말이 plasmid sSDNA라서 PCR이 불가능하다라는 말이었습니다. 그래서 이번에도 의뢰한 샘플의 대부분을 제대로 ...
A.  어느 업체에 sequencing을 맡기셨는지 모르겠지만, 농도와 purity가 낮아서 안된다는 말이 참 웃기네요. 게다가 ssDNA라 PCR이 안된다니...만약 농도가 낮다면 더 많은 양의 phage를 얻어서 DNA prep을 하시면 될 ...
답변 3  |  2017.03.29
Q. Vector CIP처리 후 Purification 궁금해요!
진행해야 하는데, 또 agarose gel을 내리고 다시 band 자른 후 purification 하고 있는데요 이렇게 두번 gel을 내리자니 yield가 떨어지는것 같은 기분이 들어서... 한번에 하는 좋은 방법 없을까요? ...
A.  restriction enzyme 처리하고, 거기에 cip를 바로 처리가능 합니다. 회사마다 다르기는 한데. reaction vol * 1.5배로 해서 처리하면 잘 됩니다. 그리고 gel 달리고 elution
답변 1  |  2018.03.13
Q. plasmid 를 restriction enzyme으로 자른후 purification하면 손실이 너무 커요.
ligation반응후에도 마찬가지로 인트론 사의 fragment DNA purification kit를 이용했을 경우 recovery효율은 90프로 정도로 잘 나옵니다. 혹시 restriction enzyme buffer때문에 pH져서 그러나 의심을 해보았는데 kit의 ...
A.  키트로 정제하지 않고도 ligation 가능합니다. 벡터를 500ng넣고 Restriction enz 이랑 thermosensitive CIP (alkaline phosphatase, TSAP) 같이 넣고 반응시킨뒤 80C에서 10분해주고 바로 인서트넣고 ligation 해도 됩니다. TSAP ...
답변 2  |  2016.02.25
Q. gel purification 후 DNA농도..
잘 보이지 않습니다... 뭐가 문제가 있는걸까요.. 보통 gel purification시에 gel은 최대한 잘라내며, gel 무게의 3-4배의 권장 버퍼량을 사용하여 정제를 합니다.. DNA 정제가 잘 되지 않으니, 염기서열 분석 ...
A.  band이거나 잡밴드가 main 밴드보다 미미할 경우에는 그냥 PCR purification kit를 사용해서 정제하고 실험을 진행합니다. 미량의 잡 밴드는 보통 실험의 대세에 큰 영향을 미치지 않으니까요. 만일 내가 ...
답변 3  |  2012.02.15
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모델명 없음 | 한국원자력연구원 | 2006.04.12
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multi unit PureSolv micro solvent purification system | 기초과학연구원 | 2013.04.26
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