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실험Q&A    114건 정확도순 날짜순
Q. Enzymatic Assay of PROTEASE 로 IC50 구하기  |  첨부파일 첨부파일
Enzymatic Assay of PROTEASE Casein as a Substrate 로써, 첨부 파일에 있는 프로토콜 대로 진행해서 천연물의 alpha-chymotrypsin IC50 값을 구하려고 합니다. 첨부 파일로 하려면 IC50 값을 구하려면 어떻게 계산을 ...
A.  사수분께서 첨부파일에 있는 프로토콜로 실험해보라고 하셨어서 해보려고 합니다... 시그마에 나와있는 방법인데 여기에 나와있는 계산은 효소 units/mg protein 으로 최종계산이 되는데 이걸로 어떻게 ic ...
답변 4  |  2021.07.14
Q. Protease assay buffer의 NaCl 농도가 왜 그렇게 높은가요?
Protease assay 방법을 개발해 보려고 ... 듭니다. 일반적으로 protease assay buffer에 0.2M 정도의 NaCl이 사용되는데 그 이유가 무엇인지요? 그리고 Caspase assay에는 10mM의 DTT가 포함되어 있는데 TCEP으로 ...
A.  protease의 최적활성이 나타나는 농도가 200mM이기 때문일 겁니다. 200mM NaCl은 그리 염려할 만큼의 높은 농도가 아닙니다. TCEP는 DTT와 같은 reducing agent입니다. 않될리가 없다고 보여지지만 그래도 결과적인 ...
답변 1  |  2008.07.10
Q. Protease assay를 하는데 발색은 어떻게 하죠?! ㅡ.ㅡ;;
제가요 Protease assay를 하고 있는데요.. 첨하는거라 어떻게 하는게 좋을지 난감합니다..ㅜ.ㅡ;; 일단 균을 ... 제가요 Protease assay를 하고 있는데요.. ... 되는건가요? 누가 protease assay 법 좀 알려주세요~ ...
A.  저는 pretease의 활성에 대해서 측정을 해보지는 않았습니다. 주위에서 하는걸 보기만 했는데 답변이 될지는 모르겠네요. 1. 어떠한 균인지 알아야 배지의 사용에 대해서 말씀드릴 수 있겠네요. 2. NaOH를 ...
답변 1  |  2006.03.13
Q. Protease resistance assay 농도질문
Protease resistance assay 조건 검토를 하고 있는데요 목적 protein 정량 결과 6480 ng/ul 가 나왔고, 이걸 100 ng 에 protease 처리를 하여 protein 의 안정성 실험을 western 으로 확인해보려고 합니다 현재 제가 세운 ...
답변 0  |  2022.10.05
Q. Protease resistance assay 에 관하여
한 HEK293 의 prptease resistance assay 를 진행하려고 합니다. 이 실험을 해본 적이 ... 있으실까요 ㅜㅜ 검출은 Western 으로 하려고 하고 protease 는 trypsin 입니다 참고로 한 논문의 프로토콜 입니다 COS-1 cells ...
A.  ul 가 나왔다고 가정합니다. 프로토콜대로라면, protease 처리군당 100ul의 cell lysate가 필요 (100ug protein). protease의 경우 squecial concentraion으로 처리를 한다고 가정할 때,lysate 내 protease 최종 농도가 50-100-150-200 ...
답변 1  |  2022.01.19
Q. chip assay 할 때 protease inhibitor를 얼만큼 넣나요?
넣으시는지 조언을 구하고 싶습니다. 아시다시피 protease inhibitor가 가격이 많이 비싸서 많이 넣기에는 ... 제대로 안 될까봐 걱정이 됩니다. 이번주부터 chip assay를 하게 된 거라 모르는 것 투성이네요. ...
답변 0  |  2010.01.21
Q. protease 활성을 확인하기 위해 casein plate assay 중 배지,.,질문..
protease 활성도가있는지 없는지 균을 접종시켜서 clean zone 확인 하고싶은데,.. casein plate assay 를 하려고 합니다. ..배지를 뭐 를써야하고 어떻게 실험해야하는지 방법 순서 간단히라도 알려주시면 ...
A.  있습니다... 그런데,, clear zone이 보이지 않는다면,, protease가 없는거 아닐까요? 있는지 없는지 확인하는 중이라 하셨는데,, 꼭 clear zone이 나오라는 법은 없자나요 ^^;; casein이 의심되시면 skim milk를 ...
답변 1  |  2011.02.18
Q. protease assay에 관해서
protease assay시 casein 과 resorufin 이 사용되는이유?
A.  casein은 말 그대로 universal protease substrate이기 때문이죠. resorufin는 casein에 labeling시켜 반응후, 조각난 peptide를 쉽게 detection (UV나 Fluorescence로) 하기 위함이고요...
답변 1  |  2009.07.27
Q. promega reporter assay
판매하는 luciferase(or b-galac...) reporter assay kit 을 사용하려고 합니다. 그런데 프로토콜을 보면 protease inhibitor에 대한 언급이 전혀 없습니다. 혹시 이거 사용하시는 분 protease inhibitor 넣고 cell lysis 하시나요? ...
A.  promega사에서 나오는 lysis buffer는 그냥 그대로 사용하셔도 잘 나옵니다 따로 protease inhibitor처리할 필요는 없습니다
답변 1  |  2008.06.12
Q. Protease 역가 계산 질문드립니다.
안녕하세요. protease assay 효소액 88ml중 120ul 채취하여 사용하였습니다. 실험방법은 효소액 120ul와 azocasein 480ul를 80분 동안 반응시킨 후 20% TCA용액 600ul로 섞고 원심분리하였습니다. 그리고 위 용액중 10 ...
답변 0  |  2022.09.22
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