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Q. Enzymatic Assay of PROTEASE 로 IC50 구하기 |  첨부파일 |
| Enzymatic Assay of PROTEASE Casein as a Substrate 로써,
첨부 파일에 있는 프로토콜 대로 진행해서
천연물의 alpha-chymotrypsin IC50 값을 구하려고 합니다.
첨부 파일로 하려면 IC50 값을 구하려면 어떻게 계산을 ... |
| A. 사수분께서 첨부파일에 있는 프로토콜로 실험해보라고 하셨어서 해보려고 합니다... 시그마에 나와있는 방법인데 여기에 나와있는 계산은 효소 units/mg protein 으로 최종계산이 되는데 이걸로 어떻게 ic ... |
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답변 4 | 2021.07.14 |
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| Q. Protease assay buffer의 NaCl 농도가 왜 그렇게 높은가요? |
| Protease assay 방법을 개발해 보려고 ... 듭니다. 일반적으로 protease assay buffer에 0.2M 정도의 NaCl이 사용되는데 그 이유가 무엇인지요? 그리고 Caspase assay에는 10mM의 DTT가 포함되어 있는데 TCEP으로 ... |
| A. protease의 최적활성이 나타나는 농도가 200mM이기 때문일 겁니다. 200mM NaCl은 그리 염려할 만큼의 높은 농도가 아닙니다.
TCEP는 DTT와 같은 reducing agent입니다. 않될리가 없다고 보여지지만 그래도 결과적인 ... |
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답변 1 | 2008.07.10 |
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| Q. Protease assay를 하는데 발색은 어떻게 하죠?! ㅡ.ㅡ;; |
| 제가요 Protease assay를 하고 있는데요..
첨하는거라 어떻게 하는게 좋을지 난감합니다..ㅜ.ㅡ;;
일단 균을 ... 제가요 Protease assay를 하고 있는데요.. ... 되는건가요?
누가 protease assay 법 좀 알려주세요~ ... |
| A. 저는 pretease의 활성에 대해서 측정을 해보지는 않았습니다. 주위에서 하는걸 보기만 했는데 답변이 될지는 모르겠네요.
1. 어떠한 균인지 알아야 배지의 사용에 대해서 말씀드릴 수 있겠네요.
2. NaOH를 ... |
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답변 1 | 2006.03.13 |
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| Q. Protease resistance assay 농도질문 |
| Protease resistance assay 조건 검토를 하고 있는데요
목적 protein 정량 결과 6480 ng/ul 가 나왔고, 이걸 100 ng 에 protease 처리를 하여 protein 의 안정성 실험을 western 으로 확인해보려고 합니다
현재 제가 세운 ... |
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답변 0 | 2022.10.05 |
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| Q. Protease resistance assay 에 관하여 |
| 한 HEK293 의 prptease resistance assay 를 진행하려고 합니다. 이 실험을 해본 적이 ... 있으실까요 ㅜㅜ 검출은 Western 으로 하려고 하고 protease 는 trypsin 입니다
참고로 한 논문의 프로토콜 입니다
COS-1 cells ... |
| A. ul 가 나왔다고 가정합니다.
프로토콜대로라면, protease 처리군당 100ul의 cell lysate가 필요 (100ug protein).
protease의 경우 squecial concentraion으로 처리를 한다고 가정할 때,lysate 내 protease 최종 농도가 50-100-150-200 ... |
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답변 1 | 2022.01.19 |
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| Q. protease 활성을 확인하기 위해 casein plate assay 중 배지,.,질문.. |
| protease 활성도가있는지 없는지 균을 접종시켜서 clean zone 확인 하고싶은데,..
casein plate assay 를 하려고 합니다.
..배지를 뭐 를써야하고 어떻게 실험해야하는지 방법 순서 간단히라도
알려주시면 ... |
| A. 있습니다...
그런데,, clear zone이 보이지 않는다면,,
protease가 없는거 아닐까요?
있는지 없는지 확인하는 중이라 하셨는데,,
꼭 clear zone이 나오라는 법은 없자나요 ^^;;
casein이 의심되시면 skim milk를 ... |
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답변 1 | 2011.02.18 |
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| Q. protease assay에 관해서 |
| protease assay시 casein 과 resorufin 이 사용되는이유? |
| A. casein은 말 그대로 universal protease substrate이기 때문이죠.
resorufin는 casein에 labeling시켜 반응후, 조각난 peptide를 쉽게 detection (UV나 Fluorescence로) 하기 위함이고요... |
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답변 1 | 2009.07.27 |
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| Q. promega reporter assay |
| 판매하는 luciferase(or b-galac...) reporter assay kit
을 사용하려고 합니다.
그런데 프로토콜을 보면 protease inhibitor에 대한 언급이 전혀 없습니다.
혹시 이거 사용하시는 분 protease inhibitor 넣고 cell lysis 하시나요? ... |
| A. promega사에서 나오는 lysis buffer는 그냥 그대로 사용하셔도 잘 나옵니다
따로 protease inhibitor처리할 필요는 없습니다 |
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답변 1 | 2008.06.12 |
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| Q. Protease 역가 계산 질문드립니다. |
| 안녕하세요.
protease assay
효소액 88ml중 120ul 채취하여 사용하였습니다.
실험방법은 효소액 120ul와 azocasein 480ul를 80분 동안 반응시킨 후 20% TCA용액 600ul로 섞고 원심분리하였습니다.
그리고 위 용액중 10 ... |
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답변 0 | 2022.09.22 |
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