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실험Q&A    1,950건 정확도순 날짜순
Q. plasmid mini prep kit 추천부탁드립니다.
dna를 새로하는데 prep kit 가성비 좋은걸로 구매하고자합니다. 해외 Q사는 너무 가격이 쌘거같고 옆렙에서는 국산ㅈ사와 해외R사를 사용하는거 같던데 효율이 떨어진다고 하더군요 어디메이커들 ...
A.  선생님 진올브랜드社가 가성비대비 좋습니다. KIT만 만든지 10년이상이구요, 해외 수출까지 하고 있습니다. 인천, 경기도이시면 저희 ISS에 문의 부탁드립니다. 샘플도 가능하고 벌크 구입 시 할인도 가 ...
답변 7  |  2016.03.15
Q. blood에서 gDNA prep!!
-------------------- 1. 혈액을 뽑은 그날 -4도에 보관하다가 (mini)prep합니다. -4도에 보관했다가 사정상 다음날 할때도 있습니다. 상온에서 락커에 흔들어 주다가 해야 더 낫나요? 2. kit protocol에 RNase A를 써도 ...
A.   동물조직이나 혈액, 식물 조직 종류에 상관없이 prep 과정 안거치고 샘플에다가 바로 lysis buffer 넣고 상온에서 1 2분? 정도만 반응시킨다음에 바로 PCR 할 수 있는거래요 시간엄청 단축되고 결과도 ...
답변 1  |  2012.10.29
Q. midi prep 관련제품문의
midi prep를 하려고 하는데.. colume 형식의 제품이 있나요? 저희랩에 초원심분리기가 없어서요.. 관련제품이 있으면 답변부탁드립니다..
A.  여러 회사마다(promega, invitrogen, sigma..) 다른 제품들이 나와 있지만 Qiagen midi prep kit이 가장 좋습니다. The Scientist라는 잡지에서도 DNA prep분야중 최고 회사로 1등을 주었지요.
답변 1  |  2006.03.23
Q. cell에서 RNA prep
질문이 2가지 입니다. 1. cell에서 RNA를 prep하려고 하는데요~궁금한게 있어서요 제가 아는 바로는 Trizol방식이 있고 kit을 이용할수도 있는데 둘의 차이점은 뭐가 있나요? yield의 차이나 뭐 다른게 있나요? ...
A.  1. 경험상 yield는 trizol이 더 잘 나옵니다. 대신에 trizol은 유기용매를 써야한다는 단점(?)이 있죠. purity는 별 차이 없을껍니다. 2. 글쎄요, downstream에 어떤 실험을 하냐에 따라 다르지 않을까요? 개인적으 ...
답변 1  |  2013.12.18
Q. mini prep buffer 질문입니다.
mini prep 시 P1 buffer 를 4도에서 보관해야 하는 이유를 알려주시면 감사드리겠습니다. 왜 4도에 보관을 안하면 안되는지 꼭 좀 설명 부탁드립니다.
A.  RNase A 를 첨가 하기 때문이 아닐까요? enzyme 이므로, 첨가후엔 4도씨 보관...
답변 2  |  2014.03.24
Q. midi prep 하고요~
midi prep 하고요~ gel 내려보니까 RNA bend 가 보이네요 RNASE도 잘 넣었고 한데 왜 그럴까요??
A.  넣어준 RNase 양이 적거나 활성이 낮거나 RNA 가 넘 많거나 한거지요. RNA 가 조금 있다고 해서 차후의 실험에 큰 영향이 없다면 그냥 무시해도 됩니다. 다음 단계 실험이 제한효소처리라면 반응액에 RNase ...
답변 2  |  2009.02.23
Q. chloramphenicol amplification 해보신분께 여쭤봅니다
일반적인 plasmid처럼 해보면 prep이 되지 않는 plasmid가 있습니다 low copy라고는 하는데요 이런경우 chloramphenicol 을 사용하여 prep을 해보신분 계시면 경험담 부탁드립니다
A.  chloramphenicol을 사용하는 이유는 대장균을 배양할 때 chloramphenicol을 낮은 농도로 투여하면 copy 수를 늘 ... 써도 mini prep으로는 한계가 있기 때문에 저같은 경우는 midi prep을 사용했을 때 잘 나왔습니다 ...
답변 2  |  2009.09.11
Q. Plamid prep을 했는데 이상한 band가 나와요.
해보고, Midiprep도 해봤는데... 이 band가 없어지지 않네요... Prep Kit가 이상한 걸까요??? 아니면 Construct이 이상한 걸까요 ...
A.  http://humgen.wustl.edu/hdk_lab_manual/image/plsmid3.gif 비교해보세요. 큰밴드 밑에 흐린밴드, 이상한게 아닌듯 한데요.
답변 1  |  2010.05.15
Q. midi prep. 중에,,
midi prep. 중에 있습니다. DNA elution을 하고 isopropanol을 넣고 뿌옇게 생긴 층을 확인하고,, 센트리로 다운시켰는데,, pellet이 생기지 않는 이유는 무었때문인가요? 대장균속에 벡터가 삽입이 안된건가요?
A.  잘 안보일수도 있는데.. EtOH로 와싱 하면 뚜렷히 보일껀데..한번 해봐요-
답변 3  |  2009.02.27
Q. pREP4 vector의 진짜 map은 무엇인가요? 어떤 항생제내성을 가지고 있나요?
pREP4 vector가 포함되어 있는 M15cell에 pET-28a vector를 transformation하고 있는 학생입니다. 제가 알기로는 M15cell에 있는 pREP4vector에 있는 Amp resistant 랑 pET-28a vector에 있는 kana resistant 때문에 Amp와 kana 두개다 LB에 ...
A.  제대로된 결과를 얻을수 있습니다. Kan을 사용한하면 결국 pREP4를 잃어 버릴수 있고... Amp를 사용안하면 selection과 expression plasmid를 읽어 버릴수 있습니다. 그리고 M15에서 pET 계열이 발현 가능한가요? ...
답변 1  |  2015.03.18
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