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실험Q&A    540건 정확도순 날짜순
Q. phenol 이 RT에서 결정이 생겼어요..
불투명한 허연색이 되었답니다. 이유를 모르겠네요? phenol의 melting point를 제가 잘못 알고 있는건가요? 아니면 DEPC가 어떤 영향을? ...
A.   즉, 500ml 의 50mM sodium acetate (pH 4.0) 에 500 g 의 crystallin phenol 을 첨가하여 55도씨에서 잘 녹여 주신 후, 상층을 제거하시고 다시 또 500 ml 의 50mM sodium acetate (pH 4.0) 를 첨가하여 섞어준다음 상층액을 ...
답변 2  |  2001.09.07
Q. phenol/chloroform 처리시에...
phenol/chloroform 처리시에 단백질을 제거하기 위해 phenol을 사용합니다. 보통 phenol의 pH 7.9 나 8.0 짜리를 사용하는데... pH 6.9 짜리 phenol을 사용해도 되나요?? 렙에 6.9짜리 밖에 없네여...ㅠㅠ
A.  0, 1 MM EDTA를 만들어서 페놀에 넣고 사용하시면 됩니다. pH7.9 phenol은 위의 용매로 saturation된 것이기때문에 굳이 새로 사실 필요 없이 위 solution과 페놀을 넣어 섞은 후 3시간 정도 기다린 후에 가라앉은 ...
답변 4  |  2008.08.28
Q. phenol/cracking 질문
phenol cracking이란 실험 방법에 대해 여쭤보겠습니다. transformation후에 colony를 따서 다른 배지에 colony별로 ... phenol cracking이라고 배웠는데 phenol은 들어 가지 않는데 왜 phenol cracking인지도 궁금합니다 ...
A.   이라고 부르기도 합니다. 하지만 님이 사용하는 buffer에는 phenol이 안들어가 있으므로 기냥 'cracking buffer'라고 불러도, 기냥 'cracking'이라고 불러도 법에 저촉되지 않습니다. ...
답변 2  |  2010.03.15
Q. Phenol Extraction 시에 위층과 아래층이 바뀌어 버리네요... ㅠㅠ
사용할때 섞어서 사용하는 것도 아닐텐데... 아니면 phenol단계 생략하고 Phenol/Chloroform 만 하는 게 나을까요??? 아시는 분 꼭 좀 답변 부탁드립니다. 찜찜해요...
A.  됩니다. 저는 그렇게 합니다. DNA solution에 DNA 농도가 높고 salt가 많으면 phenol층 역전이 일어납니다. 하지만 DNA purification에는 영향이 없으니 걱정 안하셔도 될듯하네요 ...
답변 1  |  2007.07.18
Q. RNA prep.용 phenol
RNA prep.할때 사용하는 phenol을 water saturation 시켜서 사용하는데 이때 phenol에 DEPC d/dw를 넣고 ... 보면 phenol 부분은 투명하고 water층이 뿌옇게 되는데 water가 phenol에 들어가면 원래 뿌옇게 변하나요 ...
A.  3차 DI water mixing 직후에는 물과 Phenol의 극성이 달라서 뿌옇게 변하는데 몇시간 saturation 후에는 ... 층으로 분리가 됩니다. 보통은 acidic buffer를 포함하여, DNA를 제거하는 Phenol 조합을 많이 사용합니다 ...
답변 1  |  2011.11.16
Q. water saturated phenol에 관한 질문이요~~
water saturated phenol을 써서 실험을 했다고 나와있는데,, 이 phenol을 실험실에서 만들수 있는건지,,아님 사서 써야하는건지좀 알려주세요 Molecular cloning 이랑 Lab Ref과 같은 책에도 안나와 있구,,인터넷 ...
A.  saturated phenol은 sigma에서 구입하시면 됩니다.
답변 4  |  2008.04.01
Q. RNA extraction 후 DNase I 처리시 phenol chloroform extraction하는데 이 때 phenol의 pH가 궁금합니다.
phase)라고 되어 있는데, Tris의 pH가 8.0인건지, 시약 아래층의 phenol은 pH가 8.0이라는건지 6.5-6.9라는 건지 입니다 ...
A.  산성, 중성 페놀 모두 사용가능하며 적혀있는 pH는 페놀의 pH입니다.
답변 5  |  2020.01.09
Q. phenol red-free medium을 사용하는 경우
위해서 갑자기 phenol red-free 배지를 사용하네요. 그래서 phenol red-free 배지를 사용하는 경우를 알고싶습니다. 그리고 이 경우에 꼭 서야 하는지 역시 궁금합니다. 참고로 논문에서는 MTT assay , Apoptosis 확인 ...
A.  ㅎㅎㅎ답변 감사합니다 ㅎㅎㅎ
답변 2  |  2014.02.04
Q. fluorescence 측정시, phenol red의 영향
측정시 꼭 phenol red free를 사용해야 하는지 알고 싶습니다. phenol red가 colorimetric dye이기 때문에..fluorescence에 영향을 주지 않을 거라는 말도 있는데..실제로 어떻게 해야 할까요? 답변 부탁드립니다 ...
A.  형광이라 할지라도 결과적으로는 대개 녹색, 빨강, 파랑 등 일반 가시광선 영역의에서 발생한 빛을 이용하기 때문에 phenol red와 비슷한 색깔이라면 상당부분 파장에 영향을 줄 것 같습니다.
답변 2  |  2007.05.23
Q. phenol Chloroform 을 이용한 dna 추출 궁금합니다. (cracking)
섞지않고 사용했을경우 그결과가 다를수있나요? 2. phenol : Chloroform : isoamylalcohol (sigma) 시약 첨가후 볼텍싱을 세개 할경우 섞는 세기에 따라 결과가 달라질수있나요? 3. 균을 냉장보관하였다가 ...
A.  . 흔들어 섞으면 안됩니다. 보통 시중에서 파는 phenol:chloroform:IAA같은 경우엔 위층에 Tris-HCl같은 수용액 층이 존재하는데, pipet을 이 층 아래로 집어넣어 아래의 유기용매 층만 따야 합니다. 2. 별로 상관 ...
답변 3  |  2014.05.31
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