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실험Q&A    270건 정확도순 날짜순
Q. pfu premix 가격! 때문에... ㅠ
저희 실험실에서는 현재 intron 에서 나오는 premix type의 pfu 를 사용하고 있는데요,,, 결과는 만족스러운데, 많은 양의 PCR를 하다보니 가격의 압박이 있습니다. 그래서 DNA polymerase 와 dNTP 등을 bulk로 ...
A.  Bulk가 구입 시 충분히 가격을 맞춰드릴 수 있습니다. Pfu taq도 여러가지 종류가 있고 샘플 공급이 가능합니다. 기존 제품과 비교 테스트 후 가격은 추 후 논의하셔도 될 듯 합니다. www.insungscience.com upload ...
답변 1  |  2015.04.17
Q. Blunt PCR product의 a-tailing
그냥 dNTP를 넣고 a-tailing을 해줘도 상관 없을까요? 그리고, Pfu PCR product를 반드시 purification을 해준 다음에 a tailing reaction을 해줘야 할까요 ...
A.  dNTP를 넣어도 됩니다. Taq이 A를 선호하니까요. 하지만 Pfu는 (좋은 제품일 수록) 제거하시고 붙이세요.
답변 2  |  2009.10.29
Q. 엔자임사이트 단 올리고에 pfu 로 pcr하면...
인설트 넣어 PFU polymerase 넣어 pcr하면 과연 어떨까요? pfu는 블런트엔드라고하는데 과연 스티키로 잘리는 엔자민 달아서 한 올리고 사용한 것인데 괜찮나요? 정말 답답하고 궁금합니다 ...
A.   즉, Pfu건 Taq 이건 PCR만 나오면 아무거나 쓰면 됩니다. 단, Pfu등의 proofreading 기능이 있는 polymerase가 좀더 error 발생확률이 낮으니까 이것을 쓰면 좋다라는 이야기겠지요. (Taq의 경우라도 어차피 Sequencing ...
답변 1  |  2008.01.17
Q. 코스모진택님-pfu pcr 결과
젤런해서 타겟밴드 오려내어 엔자임자르고.... 아니면 pfu처럼 피시알 후 바로 트랜스포메이션하는 것인지요? 조언주시면 많은 도움이 되겠습니다 ...
A.  때문에 전화를 주시면 자세히 설명해드리겠습니다.) 저희 pfu 샘플을 써보실 생각 있으시면 연락처를 알려주세요^^ 광고하는거 같은데 저희 회사 cloning 서비스를 이용하시면 시간 및 비용을 ...
답변 2  |  2007.10.15
Q. Taq+Pfu polymerase
진행하면 되는지요? Taq hot start와 Pfu를 비교할 경우에도 Pfu가 훨씬 더 정확한지요..? 그리고 PCR 진행 시 Template의 양이 너무 많으면 PCR이 진행되지 않는 경우가 있다는데 이런 경우는 왜 그러하죠? 많은 ...
A.  만들어서 붙이거나. * Taq hot start와 Pfu를 비교할 경우에도 Pfu가 훨씬 더 정확한지요..? -> 네 그렇습니다. hot start 는 정확도를 올리는 것보단 PCR 의 첫 단계에서 실온에서 initial denaturation 온도까지 ...
답변 2  |  2016.04.15
Q. 국산 pfu taq과 takara ex taq... 으로 pcr할때,,,
elution된 pcr product을 template로 삼아서 다시한번 같은 primer로 pfu taq을 사용해봤는데 결과도 역시나 마찬가지로 낮은 사이즈에서 강하게 밴드로를 보이네요.. 제 생각에는 아무래도 primer끼리 붙는 경향이 ...
A.  그외에 다양한 제품들이 있습니다. 아직 국내에서는 Pfu를 제외한 다양한 Pyrococcus 효소들이 개발되지 않은 것으로 알고 있습니다 ...
답변 2  |  2010.01.29
Q. taq과 pfu
해서 클론 획득했엇거든요. 동일 조건으로 단지 taq대신 pfu썼는데 밴드가 이상한 사이즈가 여러개 보일뿐 타겟 사이즈는 없더라구요. 어쩌죠? ...
A.  없애고 ligation 하는 방법을 추천합니다. 제 생각에는 pfu 가 fidelity 는 높아도 위와 같은 문제가 생길 수 있습니다 ...
답변 3  |  2008.08.14
Q. pfu pcr 조건
RT-PCR을 진행하고 있는데... RNA isolation은 잘 된것 같고 rt진행후 바로 pcr돌렸는데요. pfu로 돌린건 band가 ... 확인했다고도 해서.. 어떤식으로 조건을 다시 잡아야 pfu에서 band를 확인할 수 있을까요? ...
A.  실험 목적이 무엇인가요? 클로닝인가요, 아님 유전자 발현양 비교인가요?
답변 4  |  2016.09.30
Q. pfu PCR 문제입니다
이용 pfu nested pcr 수행이후, 이 product를 template로 하여 pfu orf pcr 수행 정도 입니다. 고쳐야할 부분이 있다면!! 거침없이 지적해주시고 많은 조언 부탁드리겠습니다 ...
A.  짧았다고 생각하는데, 2분까지 늘려서 안되었다고 하시니...pfu를 바꾸시는게 좋을 듯 싶네요. 아래 조건에서 다시 안되면 정말 바꾸시는 것을 권고합니다. 95도 5분 - (95도 30초, 55도 30초, 72도 2분)30cycle ...
답변 4  |  2008.06.25
Q. 바이러스를 쥐에 감염 시 PFU 계산 및 표기법 도와주세요.
희석하여 처리를 해주면 되겠지만, 후자였던 100 PFU, 1000 PFU는 무엇을 기준으로 한 것인지 또한 의미가 무엇인지를 잘 모르겠네요. 감염 초보 실험자에게 많은 도움 부탁드립니다 ...
답변 0  |  2020.04.23
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