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| Q. permeabilization의 목적은? |
| 막단백질을 형광 staining 할때, permeabilization을 해야 한다는데요.
permeabilization을 하는 이유는 무엇인지요? |
| A. 막단백질을 잡은 Ab가 막단백질의 세포막 바깥부위를 잡는것이면 상관 없습니다.
하지만 세포막 안쪽부분을 잡는 Ab라면 permeabilization시켜야만 Ab가 들어가 붙겠죠. |
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답변 3 | 2007.04.26 |
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| Q. Flow cytometry; Fixation/Permeabilization 시, Live cell이 너무 많이 감소합니다,, |
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1. 2개의 surface staining.
2. 1개의 surface staining -> Fixation/Permeabilization -> 1개의 intracellular (nucelar) staining.
Staining을 하기 전까지의 모든 과정은 동일하게 진행합니다.
Fixation/permeabilization 단계에서는 'eBioscience ... |
| A. Fix/perm을 하면 세포가 죽는다는 것은 알고 있습니다. 다만 live cell을 gating 하기 위해 fix/perm 과정 이전에 live/dead antibody(ebioscience, Fixable Viability Dye)를 이용하여 live cell을 gating하는데, 이 경우에 세포의 ... |
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답변 5 | 2022.03.27 |
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| Q. 과도하게 permeabilization을 할 경우 |
| permeabilization 이 제대로 되지 않아서 염색이 안되는 것 같아서
에라이 !! 하고 perm을 과도하게 해봤는데도 염색이 안됐습니다...
sample은 frozen section 이고, 12um 으로 section 한 조직이구요...
1) 0.3% Triton X-10 ... |
| A. 해당 Ab의 문제인지 모르니 다른 control을 걸어보세요.. |
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답변 2 | 2019.02.27 |
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| Q. DAPI 염색시 permeabilization을 먼저해야돼나요 ?) |
| 어떤 말이 맞는지요
또 permeabilization이 반드시 필요하다면 permeabilization시 GFP가 세포밖으로 빠져나오지 않을 까요 혹은 형광을 나타내는 데 문제가 있지 않을까요?
위의 실험방법에 관해 ... |
| A. 주변에 실험하시는 분들은 permeabilization step 없이 해도 잘 되던데요. |
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답변 3 | 2006.07.04 |
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| Q. Hoechst 33258 staining시 fixation과 permeabilization 질문 |
| 하는 경우에는 70% ice-cold EtOh로 하면 되나요?
이 경우에는 permeabilization이 필요하지 않나요?
다른 fixative로는 어떤게 있나요 ... |
| A. 저두 잘은 모르지만 저 같은 경우 스태이닝 할때
고정하는 방법으로 ice-cold acetone을 사용합니다.
스탠인후 마지막에 hoechst로 핵을 염색하는데요..잘 나오는 편입니다...... |
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답변 1 | 2007.01.06 |
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| Q. IHC의 permeabilization |
| 하거든요.
그 원리가 어떻게 되는지 아세요? 그리고 다른 permeabilization 방법과 각각의 장단점에 대해 comment를 주실 수 있으신가요 ... |
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답변 0 | 2006.12.25 |
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| Q. permeabilization에 대하여 질문드립니다. |
| permeabilization에 대하여 질문이 있습니다.저희는 permeabilization 위하여 0.1% triton X-100+0.1%citric acid 용액을 사용하는데 몇 분정도 처리 해야하나요??
tunel assay하는데 잘 염색이 안됩니다 ㅜㅜ고견 부탁드립니다. |
| A. 저희 실험실에서는 RT에서 5분동안 처리합니다. |
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답변 1 | 2015.10.05 |
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| Q. immuno stain 에서 permeabilization 과정 |
| 과정이 필요할 때가 있는데
target 이 cell membrain 에 있는 경우에도 permeabilization 을 해주는 이유가 따로 있을까요?
저는 CD68 을 stain 하여 형광으로 보는 실험을 하고있습니다 ... |
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답변 0 | 2017.11.21 |
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| Q. TUNEL permeabilization |
| 잡아야 하는 지 궁금합니다.
0.1% triton X-100으로 30분 treat 해도 되는건가요?
permeabilization 을 너무 오래 세게 하면
cell 이 다 터지면서 TUNEL 염색이 되나요 ... |
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답변 0 | 2022.10.26 |
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| Q. permeabilization |
| 핵막? 정도 까지 염색이 되는 것 같습니다.
proteinase K 로 permeabilization 을 시키고 있는데
trition X 로 해도 될까요? 보통 cell 실험에서 사용하던데 혹시나 해서 질문드립니다 ... |
| A. tx100 0.1% in pbs 로 rt incubation 20분 정도 . 하시면 잘됩니다.
이후 pbst로 wash out 하고요. |
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답변 2 | 2016.12.12 |
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