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실험Q&A    11,681건 정확도순 날짜순
Q. Real time PCR 과 일반 PCR
좀 다르긴 했지만 그래도 sample 입장에서는 같은 조건으로 PCR을 했기 때문에 상대적인 발현양 차이는 보여야 하는게 아닐까...하는게 제 짧은 소견입니다. 답변 부탁드리겠습니다 ^ ...
A.  답변 감사드립니다. 두 가지 다 고려해서 다시 해 보겠습니다 감사합니다^^
답변 3  |  2009.08.05
Q. PCR 결과 두리뭉실한 밴드의 정체는?  |  첨부파일 첨부파일
많이 나와야 할 것 같은데 조금 나오는 것도 이상합니다. PCR을 30cycle 돌렸으면, cDNA가 조금만 있어도 엄청 많은 DNA가 만들어져야할텐데. ...
A.  첨부파일
답변 2  |  2006.02.02
Q. pcr에서 원하는 밴드는 않나오고 아주 맨밑작은 밴드만 나오네요 ㅜㅜ
제가 약 42kD 정도의 단백질을 프라이머를 제작해서 PCR을 했는데욤,, 나중에 최종적으로 확인해보니,,, 사이즈 마커 맨밑에부분에만 진하게 밴드가 뜨는거에욤,,ㅜㅜ 맨밑은 약 100bp정도 같은데,,, 훨씬 ...
A.  제일 아래 희미하게 보이죠.. 물론 그게 아니시라면... PCR 후 원하는 사이즈에 밴드가 나오지 않고 gel의 제일 아래쪽에 나오는 밴드는 primer dimer를 형성해서 그러는 경우가 있습니다. 아마도 100bp 보다 ...
답변 2  |  2006.10.06
Q. 정량PCR 대행해주시는 곳~
taqman을 이용하던, 다른 방법을 이용하던.. 발현 DNA를 정량하려고 하는데.. 정량 PCR을 해주시는 곳 있나요?
A.  cDNA, primer, 온도 조건, cDNA 합성후 확인차 하시는 PCR gel에서 one band확인- 4가지가 필요합니다. 2번의 경우라면 의뢰자가 농도나 copy가 확인된 standard를 만들어 보내주셔야합니다. 이 실험은 고가의 taq과 ...
답변 2  |  2005.04.21
Q. 일반 PCR에 대해서...
없을까요? 어휴 질문자체가 어수선 하네요... 그리고 PCR조건에서 마지막의 10분의 post extension 을 하지않고 각 싸이클마다의 extension시간을 1분씩 늘려서 셋팅하고 있습니다. 10분의 post extension 을 ...
A.  생각밖에 안들었습니다... 그래서 생각을 한게... 저희는 PCR 기계가 두개 있거든요... 그래서 extension 이 끝나고 post extension 을 10분 옆 기계로 맞춰놓고... 각 싸이클이 끝날때마다 꺼내서 옆에 기계로 ...
답변 7  |  2007.02.12
Q. Real time PCR 에 사용할 primer 제작
200bp 이하의 크기로 설계한다. 이러한점 말이죠.. 그밖에 RT-PCR시 유의해야할 사항같은 내용을 알고계시다면 작은 거라도 좋으니 많은 조언 부탁드립니다. (_ _ ...
A.  non-specific과 결합할 가능성이 높아지게 됩니다.. 그래야 pcr denature, annealing, extention시간을 짧게 줄 수 있고, non-specific으로 부터 오는 부정확한 값이 나오지 않도록 되는 것으로 알고 있습니다. ...
답변 2  |  2008.01.22
Q. quantitative PCR ....
안녕하세요, 실험초보 학부생입니다. quantitative PCR 이라 하면.. real time PCR을 하면 되는거죠?
A.  일반적으로 qPCR은 Real-Time PCR을 지칭합니다.
답변 1  |  2008.07.21
Q. PCR 결과좀 봐주세요  |  첨부파일 첨부파일
주형으로 PCR을 진행했습니다. 30cycle을 진행했구요 94--30초 annealing time--45초 72--30초로 했습니다. gel의 well은 가장 작은것을 이용했구요 loading양은 5ul로 했습니다. multi-channel로 건 쪽에서는 끌리는 것도 ...
A.  일단 annealing온도를 높여보는 것도 문제를 푸는 하나의 방법이기는 합니다. 하지만 그 이외의 다른 여러 요소들도 고려를 하셔야합니다. 프라이머의 농도, extension시간, cycle 수 이런것들을 변경해보아 ...
답변 4  |  2008.10.07
Q. PCR후 문제발생
Primer도 그렇게 맞춰서 짰는데요. 도대체 뭐가 잘못된건지 PCR product를 전기영동해 보았을때, 5kb정도의 밴드하나만 뜨네요. 뭐가 잘못된걸까요?; 프라이머는 프라이머 블라스트 돌려서 짠것이고 확실히 ...
A.  어떤 cell의 gDNA를 PCR에 사용하셨나요?
답변 3  |  2009.02.18
Q. RT-PCR 질문입니다.  |  첨부파일 첨부파일
따라했고 나머지는 그냥 b2-microglobulin과 같은 조건으로 PCR했습니다. 결과를 그림파일로 올렸습니다. 맨 마지막 set가 b2-microglobulin이고 하나의 밴드로 나왔는데 나머지 유전자들은 앞에 두개 유전자는 ...
A.  감사합니다. template는 같습니다... 그렇다면 조건 잡을때 이런 경우는 annealing temperature만 바꿔서 해보면 될까요?
답변 3  |  2009.04.27
Terumo bct
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