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실험Q&A    8건 정확도순 날짜순
Q. Lentiviral plasmid map 요청드립니다.
Systembio에서 판매하는 CD513-B1 map 제발 부탁드립니다ㅠㅠ CD513-B1 : pCDH-CMV-MCS-EF1alpha-Greenpuro 제발 부탁드립니다. nyj1350@gmail.com으로 연락주세요. 정말 제발 ...
A.  CD513B-1 map입니다. upload_image
답변 1  |  2019.09.19
Q. 클로닝 프라이머를 짜는중인데 막혀서 급하게 질문드립니다 ㅠㅠ
있는데 내일까지 해야하는데 막막하네요... 벡터는 지금 pCDH-RFP를 쓸려고 하고 타겟 gene은 XAGE1B입니다... 논문에서는 cloning site를 EcoR1과 XhoI을 사용했다고 해서 그대로 써보니까 이에 맞는 compatible ...
A.  primer design하는건 아는 사람은 길어야 30분이면 하는 작업인데, 처음 배우는 입장에서는 모든 원리를 이해해야 하니 힘든 작업입니다ㅎㅎㅎ "Speed" 님이 과정을 세부적으로 잘 설명해 주셨는데 아마 이 ...
답변 4  |  2019.07.14
Q. pcDNA 3.1 (+)에 클로닝한 유전자의 발현에 문제가 있습니다.  |  첨부파일 첨부파일
낮아집니다. 3. 이런 문제점은 pcDNA 3.1 vector 뿐만 아니라 pCDH vector에 cloning 하였을때도 동일하게 나타납니다. 4. Flag으로 tagging된 gene이 HA로 tagging된 gene의 발현을 억제할 가능성도 살펴보았지만 Flag만 ...
A.  데이터가 아주 깔끔하네요. 1. WT의 발현 자체가 너무 낮다고 말씀하시는 것의 근거는 무엇인가요? 첫번째 figure의 첫 row가 endo antibody로 probing한 것 같은데, mock control에 비해 충분히 overexpress된 것으로 ...
답변 7  |  2017.07.06
Q. pCD521(lentiviral vector)에 들어있는 promoter로 쓰이는 elongation factor 1의 sequence아시는 분 계신가요?  |  첨부파일 첨부파일
pCDH-EF1-MCS-T2A-copGFP vector구요 여기서 Elongation factor 1의 사이즈는 545bp정도 되더라구요... 시퀀스 알아내서 RE site좀 확인해보려고 하는데, 아시는분 계시면 좀 알려주세요 ㅠ
답변 0  |  2011.12.16
Q. vector에서 gene deletion될 수가 있나요?
. 제가 요즘에 cell line만들려고 infection실험을 하고 있는데, pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP 이 vector를 쓰고 있었습니다. 예전에는 회사에서 온 construct로 하고, 요즘은 그걸 Transformation한 후 miniprep해서 쓰고 있습니다. ...
A.  contam이 일어나면 충분히 가능한 일입니다. 그리고 DNA역시 장시간 냉동 보관하면 깨지더군요, 새로이 프렙하셔서 사용해 보시길 권해드립니다.
답변 8  |  2014.12.13
Q. quikchange ii ( or ii XL) 을 쓰는데 콜로니가 뜨지 않습니다,
해내고 있습니다. 그 중 하는 것이 10kb 정도 되는 (pLV 혹은 pcDH) 템플릿에서 아미노산 하나만 바꾸는 SDM 을 하고 있습니다. quikchange ii XL 로 하나의 SDM 은 성공했는데, 그 후로는 quikchange ii 로 진행하고 ...
A.  저의 경우에는 처음에 mix만들때 10x buffer + DW 먼저 채워서 솔루션을 만들어주고 거기에 primer, template를 넣고 pfu polymerase를 맨 마지막에 넣고 톡톡 쳐서 섞은 후 spindown해서 돌립니다. DW로 표시선까지 채 ...
답변 1  |  2018.01.15
Q. dominant negative CREB
글을 올립니다. 저는 protocadherin을 연구하고 있고, 그 중 PCDH8의 transcription에 CREB가 어느 정도 작용하는 것 같어...DN-CREB로 재확인 하는데, vector를 이용하려고 합니다. 연락처는 gungil@korea.ac.kr 입니다. ...
답변 0  |  2008.05.20
Q. Lentiviral plasmid sequence 요청드립니다.
안녕하세요. Lentiviral plasmid sequence요청드립니다. Systembio에서 판매하는 CD513-B1 vector sequence 부탁드립니다. 정말 제발 부탁드립니다ㅠㅠ nyj1350@gmail.com로 보내주시면 감사하겠습니다. 제발 부탁드립니다ㅠㅠ
A.  CD513B-1 plasmid sequence입니다. 8201bp 1 acgcgtgtag tcttatgcaa tactcttgta gtcttgcaac atggtaacga tgagttagca 61 acatgcctta caaggagaga aaaagcaccg tgcatgccga ttggtggaag taaggtggta 121 cgatcgtgcc ttattaggaa ggcaacagac gggtctgaca tggattggac gaaccactga 181 attgccgcat ...
답변 7  |  2019.09.19
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