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실험Q&A    160건 정확도순 날짜순
Q. TaqMan miRNA assay이용해서 qPCR할때..
한건데 왜 유독 Ct값이 높게 나오는지 모르겠습니다. miRNA실험을 시작한지 얼마 안되서 도저히 이유를 모르겠어서 이렇게 질문드립니다. 도와주세요~ ...
A.  템플레이트양이 그런경우는 양이 너무 적어서 그런것같네요, 이론상보시면 메소드 관련 논문보시면....알거에요 원래 miRNA의 양의 그리 많지 않고, 컨버젼할때 낮은 농도의 total RNA를 쓰기 때문에 적음
답변 1  |  2009.02.18
Q. miRNA target gene 분석 (microrna.org)
Non-good mirSVR score, Conserved miRNA 4. Non-good mirSVR score, Non-conserved miRNA 4가지의 DB가 존재하는데 각각의 의미를 잘 모르겠습니다. 해당정보에대한 도움과 일반적으로 어느것을 사요하는지 도움을 받고싶네요~ ...
A.  miRNA array서비스를 받으실려고 하는게 아닌가요? 저희는 Agilent社 tool을 이용해서 서비스를 해드리고 있습니다. 031-296-0116으로 전화주시거나 www.insungscience.com으로 오셔서 질의를 해주시면 성심성의껏 ...
답변 2  |  2012.01.20
Q. primary miRNA 서열 검색 가능한 사이트 아시는분
mirbase 사이트에서는 mature와 precursor miRNA 서열은 검색이 가능한데 그 이전의 primary miRNA transcript 서열을 검색할만한 사이트를 못찾겠네요 ㅠㅠ 아시는 고수분의 지도 부탁드립니다 ㅠㅠ
A.  pre-miRNA sequence 따와서 ucsc genome browser같은데서 blat search하면 됩니다.
답변 1  |  2012.06.18
Q. miRNA transfection 후 real time PCR
없어야 할 것같은데.. 왜 이런 현상이 나타나는 건가요? miRNA를 넣었을 때 target gene이 증가하기도 하는건가요? 고수님들 부탁드려요 ...
A.  선임께서 말씀을 하셨으니 실험은 더 해봐야 겠죠. miRNA는 유전자의 기능을 조절(감소 또는 증가) 하는 목적이므로 정확한 실험을 위해서는 mimic과 inhibitor, negative control 등을 확인해 보셔야 합니다. ...
답변 3  |  2012.04.05
Q. pre-miRNA도 주문제작 가능한가요?
것으로 알고 있는데요, 시약회사 (AB)에서 판매하는 miRNA mimic은 double strand 인것으로 알고 있는데 어떻게 특정 5p 또는 3p를 따로overexpression 시키는지요 ...
A.  보통 mirna duplex를 transfection하죠. precursor로 집어넣으면 dicing이 되긴 될텐데 굳이 그렇게 할 필요가..? 5p, 3p를 결정하는건 우리가 아니라 세포입니다. 5p가 major인 duplex를 집어넣으면 5p가 주로 argonaute에 ...
답변 4  |  2013.10.09
Q. microRNA 실험 질문 드립니다
있다고 논문들에서 보았습니다. total RNA를 축출하면 miRNA의 cDNA 합성 효율성이 많이 낮을까요? 아니면 꼭 small RNA를 축출한후에 RT를 해야하는 건가요..? 세팅하려고 하니 이것저것 알아볼게 많네요.. ...
A.  때문입니다) 큰 사이즈의 RNA만이 분리가 되버려서 목표한 miRNA를 뽑지 못하는 경우가 있을수 있습니다. 제가 추천해드리는방법은 DirectZol RNA prep kit(http://www.zymoresearch.com/rna/rna-isolation/rna-from-trizol-tri ...
답변 2  |  2016.03.09
Q. rabbit으로 실험하시는 분들 도와주세요 ㅠㅠ
가지고 실험을 하고 있는데요 연골세포를 이용해서 miRNA 실험을 하려고 합니다. real time PCR 을 하려고 하는데 internal control이 필요하잖아요 논문을 읽어보니 U6를 많이 사용하시는 것 같던데 이것이 ...
답변 0  |  2011.03.25
Q. microRNA에 대해서 궁금한것이 있어서요....
공부중인데요 공부하다보니 miRNA-21, miRNA-199머 이런식으로 miRNA뒤에 숫자가 붙잖아요 그 숫자는 무엇을 의미하는지 아시는분 계시나요?? 왜 그렇게 숫자를 붙이는지 이유를 알고싶습니다... 그리고 숫자 ...
A.  Family라고 하는데 mature miRNA 서열은 똑같지만 유래된 precursor miRNA 가 다른 경우 이들을 구분하기 위해 붙여줍니다 ...
답변 2  |  2010.07.28
Q. miRNA와 siRNA의 차이점은 뭔가요??
있는지... 2. siRNA대신 miRNA를 사용해서 얻는 장점과, miRNA대신 siRNA를 사용해서 얻는 장점이 있나요?? 굳이 둘이 따로 구분해야할 이유를 못찾겠습니다. 생성과정에서 위와같이 차이점이 있다 라고 ...
A.  pri-miRNA라 하죠?) 로부터 생성되며 하나의 hairpin에서 하나의 miRNA duplex만이 만들어집니다. siRNA의 경우 long double-stranded RNA가 Dicer에 의해 sequential하게 잘리며 duplex 형태로 전환됩니다 ...
답변 4  |  2014.02.03
Q. lipofectamine2000 을 이용한 miRNA transfection 질문입니다.
확인하는 실험을 진행중입니다. miRNA mimic protocol에는 miRNA mimic 활성이 최대 24시간 후에 나타나고, 24-72hr 후에 assay 할거면 24hr 후에 media change 하라고 나와있거든요 그런데 lipofectamine protocol에는 4-6hr 후에 ...
답변 0  |  2015.01.19
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