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실험Q&A    37건 정확도순 날짜순
Q. real-time(CFX96) Melt curveMelt peak 그리기
CFX96에서 제공하는 Melt curve 값으로 Melt peak를 ... 수 있습니다. upload image Melt curve Temperature A3 55.00 12614.3 55.50 12550.9 56.00 12487.4 56.50 12424.0 57.00 12360.6 57.50 12297.2 58.00 12233.8 58.50 12167.6 59.00 12100 ...
답변 0  |  2017.04.21
Q. qPCR melt curve가 이상합니다.  |  첨부파일 첨부파일
qPCR을 진행했을 때 melt curve가 예쁘게 one-peak으로 떴었는데 이번 실험에서는 melt curve가 그 전과 다르게 이상하게 뜹니다. cDNA sample은 기존에 계속 사용하던 것이라 문제가 없을 것으로 생각되어서 아마도 ...
A.  정확히는 모르겠지만, melting curve를 나타내는 방식이 몇 가지 있었습니다. 메뉴에 melting curve를 peak 형태로 바꾸는 게 있을 겁니다. 확인해 보세요.
답변 2  |  2016.08.05
Q. real time PCR시에 특정 실험군에서 melt curve가 2개 뜹니다.
해봐도 melt curve가 2개 뜹니다. 제가 디자인한 primer상에서 slicing variant가 있을 확률이 있나요?? 참 이상합니다. 현재 재차 확인을 해봐도 똑 같네요. 혹시 다른 chemical이 contamination이 되면 이럴수가 ...
답변 0  |  2010.04.20
Q. real time PCR에서 Melt curve에 관해서
PCR에 대해 초보자 입니다. real time PCR 결과에서 Melt curve의 의미를 알고 싶습니다. 특히 derivation reporter (-Rn')가 의미하는 것이 무엇이고, 이 그래프는 어떻게 해석을 해야 할 지 몰라 여쭤봅니다. 아시는 ...
A.  하시니 알아듣기 쉽게 말씀드리죠 melting curve란 반응되어 만들어진 product를 가지고 온도를 1도씩 올리면서 분석을하면요 지속적으로 denaturation되다가 어느온도에 올라서는 순간 product가 모두 denaturation ...
답변 1  |  2013.01.04
Q. real time pcr melt curve 질문입니다.(사진첨부)
조그맣게 1 또는 2,3이 적혀져 나오는 것과 melt curve가 너무 뒤죽박죽이라서 우선적으로 처리해야하는 문제점에 대해 알고 싶습니다. 답변 부탁드립니다.. 감사합니다 ...
A.  노란 세모는 QC summary 에 가시면 어떤것이 문제인지 알수있습니다 보통적으로... high standard deviation 이나 multiple peak 일 가능성?!? 이 높습니다 그리고 melt curve 같은경우에는 primer 이 문제 라고 알고있습니다
답변 1  |  2012.07.31
Q. real time PCR melt curve 2개 ?ㅜㅜ  |  첨부파일 첨부파일
PCR 왕초보입니다 ㅜㅜ real time PCR melt curve가 2개로 나왔어요..... iNOS 중에 군데군데 ㅜㅜ 이거 data 쓸수 있을까요??? melt curve가 무엇을 의미하는건가요?
A.  time PCR에서 melting curve를 그려주는 것은 (SYBR ... 확인해보세요). 따라서 melting curve의 결과만 보았을 때 iNOS primer를 다시 design을 하든지 annealing 및 amplification 조건을 수정해보시기 바랍니다 ...
답변 1  |  2012.08.29
Q. PCR MELT
안녕하세요? Tg 동물실험을 하려고 합니다. jackson laboratory 에서 search 결과 Method: MELT 라고 나오는데 이 MELT가 PCR에서의 그 Melt Curve Analysis인지 궁금합니다.  답변 부탁드립니다 감사합니다 ^^
답변 0  |  2015.11.04
Q. real-time PCR standard curve 질문입니다..
time PCR을 하고 있는데, standard curve도 잘 그려지지 않고 melt curve를 보면 멀티 피크가 뜹니다. 멀티피크가 뜨는건 밴드가 여러개 뜨는것과 마찬가지라고 하던데,, copy수가 많아도 그럴수 있을 것 같다고도 ...
A.  안녕하세요 제 실험경험상 RT-PCR과 real time PCR의 조건은 다릅니다~ annealing 조건을 다르게 해보심이 좋을것 같습니다. 그리고 이전에 했던 Real time PCR product는 반드시 전기영동하여 Target size가 맞는지 확 ...
답변 1  |  2011.07.29
Q. qPCR 데이터에서 melt curve two peaks이 나타납니다
세포에서 분리한 cDNA로 실험하고 있습니다 두 종류의 human세포에서 같은 프라이머로 같이 한번에 돌리고 있습니다 A 세포에서는 one peak로 깔끔하게 잘나오지만 B세포에서는 two peaks로 두가지 Tm값이 ...
A.  같은 human이면 모든 조직에서 같은 genome으로 존재하기 하니까요.. 말씀하신 내용으로는 B세포 실험할 때 gDNA contamination됐다고 밖엔... (primer 디자인할때 일부러 exon 1과 exon2 에 걸쳐서 짜니까요...)
답변 5  |  2016.08.11
Q. (사진첨부) rtPCR Bio-Rad CFX manager 사용을 하시는분께 질문드립니다.  |  첨부파일 첨부파일
너무 오래걸려서 Melt Curve cycle 중 취소를 했습니다.. 선생님들 께서는 Melt Curve cycle 설정은 어떻게 하시나요? 꼭 필요한 cycle인가요?? rtPCR 고수님들 도와주세요 ...
A.  온도를 높이고, 0.5도 간격으로 형광값을 읽는 것) melting curve, peak를 통해 PCR과정을 통해 생산된 product의 size와 product 종류, primer dimer 생성 여부를 알 수 있습니다. 그림에서와 같이 DNA 증폭 시 Cq값은 ...
답변 1  |  2017.11.20
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