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Q. Lysis buffer의 양
약간 더 나쁩니다. 이야기가 장황해졌는데, 어쨌든 cell lysis 후 최대한 농축된 protein을 얻고 싶으면 어떻게 해야 할까요. 도움 부탁드립니다. 미리 감사드립니다. ...
A.  저도 잘 이해가^^;;) 그리고 저도 c/f 후에 pellet에 다시 lysis buffer을 넣어 suspension 한 후에 다시 c/f 하는 방법도 해봤는데 (보통 2,3번정도까지 이런식으로 계속 반복하는 경우도 있더라구요) 저도 별 차이 ...
답변 3  |  2009.01.13
Q. cell lysis buffer에서 MgCl2와 MgSO4의 차이?
궁금한게 있어서요 보통 박테리아에서 단백질 실험할때 lysis buffer에 MgCl2를 넣는데요 이것을 MgSO4로 바꾸면 어떻게 될까요? 제 생각엔 Mg+가 단백질의 안정성에 도움을 주는 역할을 할 것으로 보여서 ...
답변 0  |  2011.03.18
Q. AGS cell lysis
얻은 pellet을 lysis 시켜도 관계없는지 궁금하네요. 또 그 lysis 시키는 시간은 얼음위에서 30분이면 충분하지도 ㅠㅠ. 그 후에 centrifuge을 하여 supernatant을 얻으면 되는 건가요? ㅠㅠ....
A.  scraper를 이용해서 cell을 긁어서 harvest를 하더군요 그리고 lysis는 4X SDS-PAGE loading buffer를 넣고 끓여서 하구요 아!! phosphorylation을 보는거니까 phosphatase inhibitor인 sodium vanadate 1mM/L가 들어있는 PBS를 넣어 scrape ...
답변 1  |  2006.03.10
Q. RBC lysis가 잘 되지 않는 이유가 뭔지 궁금합니다.
Conical에 전혈과 CANCER CELL을 넣고 Lysis를 하면 cancer cell이 잘 보이는반면에, 150~1500rpm까지 순차적으로 centrifugation 된 ... cell이 있는지 확인과정이 필요하기 때문에 RBC를 회수하여 lysis를 진행합니다. ...
답변 0  |  2019.09.25
Q. lysis buffer조성과 BCA assay관련 문의드립니다.
lysis가 잘 안되는건 아닌가요? (6well well당 100ul처리) lysis buffer에 protease inhibitor cocktail나 PMSF를 넣어줘야 하는건 아닌지 그렇다면 BCA정량시 수치에 영향을 주지는 않나요? BCA정량해서 protein양이 보통 ...
A.  degradation방지를 위해 넣어주는 것일뿐 cell을 깬다는 의미의 lysis와는 별 상관이 없는 조성물입니다. Protease inhibitor는 세포내에 존재하는 다양한 종류의 protease들이 세포가 깨지면서 방출되어 잡고자하는 ...
답변 2  |  2007.06.26
Q. Cell lysis 확인법에 대한 질문입니다.
lysis를 진행하는거에요 그러다 보니 다른 방법에 비해 lysis가 잘되었다 안되었다라고 판단이 될만한 지표가 필요한데 혹시 아시는 분있으시면 알려주세요~ protein, DNA quantification이나 tryphan blue염색, WB, ...
A.   또 아시다 시피 lysis된 셀은 단백질의 농도를 보면 쉽게 lysis 정도를 확인하실수 있으실것입니다. 단백질 농도가 수치화 한 데이터로 가장 편하실것 같습니다 ...
답변 3  |  2019.05.28
Q. lactobacillus lysis
했는데여.....시간이 1시간정도 지나면 lysis가 되지 않아서 lysis buffer와 cell 이 분리가 됩니다. 어떻게 해야할지 조언부탁드립니다 ...
A.  Bacilllus type의 균은 세포를 파쇄해도 buffer와 cell층이 분리가 됩니다. lysozyme을 먼저 처리를 한 후 sonic 처리를 하고 현미경으로 보면 cell 파쇄 여부를 확인 가능합니다.
답변 1  |  2009.08.18
Q. Western blot, cell lysis  |  첨부파일 첨부파일
inhibitor을 사용하지 않아도 된다고 하는데 ㅋㅋ 혹시 이 lysis buffer 쓰시는 분 있나요.......? 알려주세요ㅠㅠ 혹시 proteinase inhibitor 문제가 아닌 다른 조언도 감사합니다. . ...
A.  검출해 보세요. 아니면 RIPA나 다른 lysis buffer와 이제품으로 lysis한 시료를 전기영동해서 확연히 단백질 양에 차이가 나는지 coomassie 염색으로 확인해 보세요 ...
답변 2  |  2020.02.19
Q. cell lysis 질문입니다...
세포를 키워 lysis 시켜보신분 있으신지요? 아니면 혹시나 lysis를 성공시킬 다른방법이 있는지 ... 도와주세요 ...
A.  스크립퍼로 싹싹 긁어보세요. 아니면 일반 kit에 들어있는 lysis buffer을 뿌려보시는것도 좋구요. 예민한 실험일수록 proteinase inhibitor처리 꼭 해주시구요 ...
답변 2  |  2013.11.18
Q. Lysis buffer에 관해 질문드립니다.
등의 organelle 만 뽑애내려 합니다. 일반적인 lysis buffer 말고 lysis할 때 1X PBS에 EDTA와 sucrose만 넣어서 사용해도 될까요? 만약 안된다면 PBS에 어떤 물질을 더 추가로 넣어주는게 좋을지 알려주시면 ...
A.  google에 cell fractionation 이라고 치면 회사에서 제공해주는 protocol 있습니다.
답변 1  |  2013.06.26
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