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실험Q&A    2,083건 정확도순 날짜순
Q. Western blot for 14kDa protein
14kDa protein 을 웨스턴 블랏을 이용해 확인하고자 합니다. 2uM pore 크기의 블랏을 사용하고 있고요, 젤은 10-14% 되는걸 쓰고 있습니다. 마커를 걸고 전기영동을 한 후에, 트랜스퍼된 멤브레인을 보면, 윗 ...
A.  14KDa 단백질이면은 많이 작은 단백질은 아니네요 젤 내리는거야 문제가 없겠구 트랜스퍼에서 문제가 있다는 말씀이신가요? 또 트랜스퍼와 단백질 발현에는 상관이 없구... 제가 보기에는 높은 전앞 ...
답변 4  |  2008.03.08
Q. vivaspin이나 ultrafiltration disc는 15/20kDa 단위는 없나요?
제거해야될 것 같은데 찾아보니 3,5,10,30...kDa만 찾아지더라구요 15kDa나 20kDa cutoff하는 방법은 없을까요? ...
A.  UF filter가 생각만큼 분자량 별로 c/o 되지는 않습니다. 정제 할 때 제거하는 것이 가장 좋습니다. 20Kda는 있습니다.
답변 1  |  2021.08.18
Q. 200kDa protein을 보려고 하는데요. 계속 안나와서 도움 요청합니다.
제가 실험실에서 200kDa size의 protein을 보려고 합니다. gel은 10%로 해서 보았는데 전혀 밴드가 보이지 않 ... % gel이 거의 30~50kDa이 많이 벌어진다고 하는데 10%gel에서는 아예 200kDa이 보이지 않는건가요 ...
A.  생성하게끔 stimulant를 처리한 샘플이요 그리고 aggrecan이 200kDa 정도밖에 안되나요? core-protein만 해도 200이 넘는 것 같은데... 일단 젤 퍼센트를 낮춰보시는게 좋을것 같아요GMT 언어를 ...
답변 7  |  2018.10.22
Q. 200kDa protein transfer 해보신분?!?!?!
3시간까지 해봣는데요 퐁슈해보면 거의 안보입니다 한 100kDa까지는 transfer가 된듯 한데요.. 마커고 일부만 넘어오고 gel에 쫌 남아있는 것 같습니다 membrane은 NC 쓰는데 혹시 바꿔봐야 할까요? pore size는 0. ...
A.  semy dry가 wet에 비해서 큰 사이즈 단백질 트랜스퍼 효율이 떨어집니다. wet으로 300KDa 짜리 루틴하게 보고 있는데요(endogenous protrein) 350mA로 90min 하고 있습니다.
답변 5  |  2012.03.29
Q. kDa을 M.W(분자량) g으로 변환하는 법.
안녕하세요. 질문드립니다. kDa을 M.W(분자량) g 으로 변환 시킬려면 어떻게 해야 하나요? 예를 들어 66.5kDa을 g 으로 변환 시키면 몇 g 일까요?
A.  Da, is also sometimes used as a unit of molar mass, especially in biochemistry, with the definition 1 Da = 1 g/mol 참고하세요~!
답변 3  |  2012.01.20
Q. bp를 kDa으로 변경하는방법?
기본적인 걸로 알고 있지만..잘 몰라서 질문합니다. DNA의 크기를 kDa으로 변경을 하는 공식이 어떻게 ... 100개의 아미노산으로 되어있는건 알겠는데..그다음 이것으로 몇 kDa인지 어떻게 알 수 있죠 ...
A.  300 bp --> 100 a.a. --> 100 x 110 Da = 11,000 Da 즉 11kDa 입니다. Triplet codon 이므로 코딩시퀀스(CDS) 길이/3이 아미노산의 수이며 아미노산의 평균 분자량이 약 110 이므로 110을 곱하면 단백질 분자량이 나옵니다.
답변 1  |  2006.01.11
Q. kda에서 nmol/L로 계산
질문합니다. ㅜㅜ도와주세요ㅜㅜ 시약 데이터 시트에는 9.6kDa이라고 써있고 그 시약을 사용한 논문들은 보니 사용한 양은 40nM이 더라구요. 그렇다면 9.6kda -> 9.6*10^12 nM으로 9.6*10^12 nM /40nM 하여서 몇번 ...
A.  따라서 몰농도(농도 단위)가 달라집니다 다시말해서 9.6 kDa이 9.6x10^12 nM이 아니라는 이야기죠 지금가지고 계신게 얼만큼의 양인지 얼마만큼의 부피로 녹일건지 정해져야 Stock의 농도가 결정되고 그래야 ...
답변 2  |  2022.06.24
Q. 1kDa은 몇 base pair인가요?
넘 기초적인 질문인데요 1kDa은 몇 base pair인가요?
A.  대략 28~30 base pair당 1kDa으로 생각하시면 될듯한데요^^
답변 1  |  2007.07.18
Q. kDa으로 변한하는 공식이 궁금합니다ㅠ
제가 지금 실험하는 유전자 크기가 789bp 입니다. SDS-PAGE GEL을 만들어서 로딩을 시킨 후 염색을 시켰습니다. 그런데 사이즈가 맞는지가 모르겠네요ㅠ 789bp 가 몇 kDa 인지 궁금합니다. 꼭 좀 알려주세요ㅠ
A.  대략적으로 3 nucleotides => 1 codon => 1 amino acid =>110Da 이렇게 봅니다. 789bp는 263개의 amino acid 이므로 약 29kDa 정도 될 것 같습니다. 생체 내에선 좀 다르니 절대적인 건 아니고 어디까지나 추정입니다.^^
답변 2  |  2009.11.12
Q. 8kda 웨스턴 조건좀 알려주세요
8kda 사이즈의 단백질을 확인하려는데요... 0.2um NC membrane 쓰는데 gel %랑 transfer 시간과 Votage나 mA는 얼마나 해야 할까요? 20% MtOH tris-glycine buffer 사용합니다. 아, 그리구요... transfer 후에 blocking, AB 처리 ...
A.  8kDa 같은 작은 size의 protein을 보신다면 일반적인 gel보다는 Tris-Tricine gel을 이용하셔야 좋습니다 Current protocol 같은 곳에서 Tris-Tricine system을 검색해보세요~
답변 1  |  2009.08.04
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