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실험Q&A    1,404건 정확도순 날짜순
Q. Gel extraction에서 isopropanol 역할
다름이 아니라 Gel extraction protocol관련하여 궁금한 ... 질문드립니다. Quiagen gel extraction kit 쓰고 있는데요, protocol에 보면 DNA size가 4kb 이상이거나 500bp 아래이면 1 gel vol. of isopropanol을 넣어주면 yield에 ...
A.  DNA가 녹아나오게 하는 역할 입니다. gel extraction과정중 culonm을 이용하게 되면 DNA가 작은 것들은 culonm에 잘 붙지 못합니다. 작은 DNA일 수록 charge가 약하기 때문에 잘 부착하지 못하는 것인데요 그것으로 ...
답변 1  |  2014.07.15
Q. Gel extraction 급합니다..
36정도 얻고 이걸 다시 gel extraction하면 적어도 20마이크로 ... 로스가 많아서요.. 제 gel extraction 방법은요., 1. 젤 무게당 QC 버퍼를 3배정도 넣고 50도에서 10분간 충분히 흔들어서 녹입니다. 2. 다음 젤 ...
A.  column의 capacity도 고려하여야 합니다. Gel extraction kit에 보면 loss가 거의 없다라고하지만 어느정도의 loss는 고려하셔야합니다 ...
답변 4  |  2005.08.26
Q. gel extraction 문제  |  첨부파일 첨부파일
같은 결과가 나옵니다. gel extraction kit가 문제가 있나해서 ... 똑같네요. PCR결과와 gel extraction 후 결과를 첨부합니다. 선배님들의 의견 부탁드립니다. size는 2kbp 정도 됩니다 ...
A.  없습니다. 이런 젤 사진은 있으나 마나입니다. 젤 extraction과정은 kit에서 설명한 대로 하셨겠죠? 특히 gel조각의 무게와 solubilization 용액의 비율은 잘 맞추셨겠죠? 사진을 보면 DNA 밴드의 두께가 굉장히 ...
답변 6  |  2012.01.09
Q. gel extraction 수율이 너무 낮습니다.
떨어져 고민입니다. gel extraction kit을 이용해 ... gel에 전기영동실시. gel extraction kit에서 제공하는 protocol대로 진행 최종 남는 DNA양은 20 ...
A.  잘렸나요?) 전기영동 결과가 같다는 전제 하에, gel extraction 단계에서, 같은 버퍼, 시약, 키트를 사용했는데 본인의 수율만 낮게 나온다면 실험기구 조작에 따른 개인 편차라고 봐야겠지요. 그런데 ...
답변 3  |  2016.05.24
Q. gel extraction 시 문제..
처리하지 않은 DNA)를 gel-extraction한후 DNA를 확인 하기 ... 않습니다. 물론 control로 gel-extraction하기 전의 DNA를 transformation 하였을 때는 colony가 많이 자라구요.. Qia-EXⅡ Kit를 사용해 보았지만 결과는 ...
A.  일반적인 방법으로 추출정제하기엔 너무 큰 사이즈입니다. 게다가 과정중에 물리적으로 잘리기 쉽고요. QuiaEx2 프로토콜에 긴 것을 추출할때 주의사항이 있습니다. 이것도 50kb 이상에서 잘 뽑혀나올지 ...
답변 2  |  2014.07.01
Q. ligation을 위한 gel extraction..
저는 cloning을 배우고 있는 대학원생입니다 주변에 도와주는 선배가 없어서 혼자 끙끙대다가 질문합니다 먼 ... 이렇게 gel extraction 시킨후에 260nm에서 OD ... . 문제점, 조언, gel extraction tip, ligation tip ...
A.  사용한 insert의 양이 적군요. gel extraction의 경우 조금은 차이가 있습니다만 수율이 약 90%정도는 될 겁니다. insert를 더 많이 준비하고 마지막에 insert를 녹이는 과정에서 최대한 농도가 높도록 하는 것이 ...
답변 2  |  2012.05.30
Q. gel extraction 시....
gel extraction 할 때 최소한으로 ... ligation를 하기 위해 gel extraction 을 하려하는데 어느 정도의 DNA를 loading 해서 전기영동 한 것을 gel extraction해야하는 궁금합니다... 그리고 agarose gel electrophoresis 한 밴드를 ...
A.  없어서 extraction할때 50%를 날린다고 가정하고, ligation할때 100-500ng 사용한다고 계산하면 최소 1ug의 band가 gel에 있으면 되겠네요. 단, 그 DNA가 plasmid에 있는걸 얻는거라면, 만일 plasmid의 크기가 4kb이고 ...
답변 1  |  2009.03.16
Q. Gel extraction kit으로 extraction 할 때 plasmid가 잘릴 수도 있나요?
Qiaz*n 사의 Gel extraction kit를 이용하여 cloning 할 insert를 agarose gel에서 extraction하였습니다. ligation 전에 vector와 insert의 농도를 비교하고자 다시 agarose gel 에 전기영동을 걸어서 확인해 보니, 오른쪽 그림과 ...
A.  경험상 gel extraction kit를 사용하였을때 plasmid가 잘린적이 한번도 없었습니다. gel ex.는 protocol 대로만 진행하면 어렵지 않은 실험입니다. 제 생각으론 lab에서 같이 쓰는경우 EB에 문제가 있는 경우를 몇번 ...
답변 2  |  2015.06.03
Q. gel extraction이 너무 안나와서요.. 알려주세요
kit중에 QIAEX II Gel Extraction Kit 말고 QIAquick Gel Extraction Kit 도 있던데 이둘의 차이가 먼지 알려주세요.. 그리고 어떤게 더 낳을지도요.. 빨리 추출이 되어야 해서요... 알려주시면 감사하겠습니다...
A.  플라스미드 DNA 밴드는 약 4.3kb 정도되고요... 이것을 잘라서 나머지는 kit에 따라서 하고 있어요
답변 4  |  2009.08.19
Q. Gel extraction 과정에서 원하는 size의 band를 자르고 1.5ml tube에 넣으면 파란색이 생겨요..  |  첨부파일 첨부파일
현재 Dokdo-Prep Gel Extraction Kit (spin type)를 이용하여 ... 파란색으로 보이고 Gel extraction buffer를 첨가하면 mixture가 파란색으로 보입니다.. Gel extraction이 끝나고 purified PCR product를 loading하면 너무 수율이 ...
A.  loading dye 색인것 같은데 추출 수율하고는 관계없습니다. 추출 방법적인 문제 일 것 같습니다. 현재 사용하는 kit는 95% 이상 band 회수 가능합니다.
답변 4  |  2020.06.27
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