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실험Q&A    815건 정확도순 날짜순
Q. Gel extraction 급합니다..
36정도 얻고 이걸 다시 gel extraction하면 적어도 20마이크로 ... 로스가 많아서요.. 제 gel extraction 방법은요., 1. 젤 무게당 QC 버퍼를 3배정도 넣고 50도에서 10분간 충분히 흔들어서 녹입니다. 2. 다음 젤 ...
A.  column의 capacity도 고려하여야 합니다. Gel extraction kit에 보면 loss가 거의 없다라고하지만 어느정도의 loss는 고려하셔야합니다 ...
답변 4  |  2005.08.26
Q. Gel extraction에서 isopropanol 역할
다름이 아니라 Gel extraction protocol관련하여 궁금한 ... 질문드립니다. Quiagen gel extraction kit 쓰고 있는데요, protocol에 보면 DNA size가 4kb 이상이거나 500bp 아래이면 1 gel vol. of isopropanol을 넣어주면 yield에 ...
A.  DNA가 녹아나오게 하는 역할 입니다. gel extraction과정중 culonm을 이용하게 되면 DNA가 작은 것들은 culonm에 잘 붙지 못합니다. 작은 DNA일 수록 charge가 약하기 때문에 잘 부착하지 못하는 것인데요 그것으로 ...
답변 1  |  2014.07.15
Q. gel extraction 문제  |  첨부파일 첨부파일
같은 결과가 나옵니다. gel extraction kit가 문제가 있나해서 ... 똑같네요. PCR결과와 gel extraction 후 결과를 첨부합니다. 선배님들의 의견 부탁드립니다. size는 2kbp 정도 됩니다 ...
A.  없습니다. 이런 젤 사진은 있으나 마나입니다. 젤 extraction과정은 kit에서 설명한 대로 하셨겠죠? 특히 gel조각의 무게와 solubilization 용액의 비율은 잘 맞추셨겠죠? 사진을 보면 DNA 밴드의 두께가 굉장히 ...
답변 6  |  2012.01.09
Q. gel extraction 수율이 너무 낮습니다.
떨어져 고민입니다. gel extraction kit을 이용해 ... gel에 전기영동실시. gel extraction kit에서 제공하는 protocol대로 진행 최종 남는 DNA양은 20 ...
A.  잘렸나요?) 전기영동 결과가 같다는 전제 하에, gel extraction 단계에서, 같은 버퍼, 시약, 키트를 사용했는데 본인의 수율만 낮게 나온다면 실험기구 조작에 따른 개인 편차라고 봐야겠지요. 그런데 ...
답변 3  |  2016.05.24
Q. Gel extraction
일단 문제의 gel extraction의 실험 순서를 ... 그리고 band확인 후 gel extraction protocol대로 실험하였습니다. 같이 한 다른 것들은 모두 얻어졌는데 이 vector만 안 얻어지네요 vector size는 약 6~7kbp입니다. gel ...
A.  제 생각에... gel 무게에 따른 melt buffer를 쓰시는게 좋습니다. 또한 melting후 isopropanol 사용 여부도 확인하시고요..
답변 1  |  2009.12.14
Q. gel extraction 시 문제..
처리하지 않은 DNA)를 gel-extraction한후 DNA를 확인 하기 ... 않습니다. 물론 control로 gel-extraction하기 전의 DNA를 transformation 하였을 때는 colony가 많이 자라구요.. Qia-EXⅡ Kit를 사용해 보았지만 결과는 ...
A.  일반적인 방법으로 추출정제하기엔 너무 큰 사이즈입니다. 게다가 과정중에 물리적으로 잘리기 쉽고요. QuiaEx2 프로토콜에 긴 것을 추출할때 주의사항이 있습니다. 이것도 50kb 이상에서 잘 뽑혀나올지 ...
답변 2  |  2014.07.01
Q. ligation을 위한 gel extraction..
저는 cloning을 배우고 있는 대학원생입니다 주변에 도와주는 선배가 없어서 혼자 끙끙대다가 질문합니다 먼 ... 이렇게 gel extraction 시킨후에 260nm에서 OD ... . 문제점, 조언, gel extraction tip, ligation tip ...
A.  사용한 insert의 양이 적군요. gel extraction의 경우 조금은 차이가 있습니다만 수율이 약 90%정도는 될 겁니다. insert를 더 많이 준비하고 마지막에 insert를 녹이는 과정에서 최대한 농도가 높도록 하는 것이 ...
답변 2  |  2012.05.30
Q. gel extraction 시....
gel extraction 할 때 최소한으로 ... ligation를 하기 위해 gel extraction 을 하려하는데 어느 정도의 DNA를 loading 해서 전기영동 한 것을 gel extraction해야하는 궁금합니다... 그리고 agarose gel electrophoresis 한 밴드를 ...
A.  없어서 extraction할때 50%를 날린다고 가정하고, ligation할때 100-500ng 사용한다고 계산하면 최소 1ug의 band가 gel에 있으면 되겠네요. 단, 그 DNA가 plasmid에 있는걸 얻는거라면, 만일 plasmid의 크기가 4kb이고 ...
답변 1  |  2009.03.16
Q. gel extraction 회수율 높이는 방법이 있을까요
였는데 enzyme 처리하고 gel extraction 하고 나면 13.5ng/ul로 ... 후 gel 걸어서 cutting 2. Gel extraction buffer(gel 무게의 3배) 넣고 60℃ 5min heating 후 중간에 한 번 잘 섞이도록 inverting 한 후에 다시 5min heating 3. 750ul ...
A.  회수율문제라기보단 다른 문제인 것 같은 느낌이네요,, restriction enzyme으로 cut 하실 때 얼마 만큼의 DNA를 쓰셨나요? 회수율이 낮아서 ligation이 잘 안되시나요??
답변 2  |  2016.09.02
Q. gel extraction 후 yeild가 너무 낮아요.
두껍게 뜹니다만 gel extraction만 진행하고나면 7.8~11ng ... ; kit는 RBC사의 High yield gel extraction kit를 사용하고 있습니다. 무엇이 문제인가요...미치겠네요 ...
A.  Elution buffer 너무 많이 넣었네요 20 ul 정도가 적당합니다 물을 증발시켜 좀더 농축하거나 그냥 그 농도로 실험을 진행해도 문제 없을듯 합니다
답변 5  |  2017.03.08
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