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실험Q&A    942건 정확도순 날짜순
Q. mouse GAPDH의 mRNA 크기는 대략 어느 정도입니까?
다른것같은데 왜 그렇게 되는겁니까? 보통 실험에서쓰는 GAPDH의 고유번호는 다들 어떤것을 쓰고 계십니까? 너무 많이 물어봐서 죄송합니다. 꼭 도와주세요 ...
A.  다른 것은 EST의 길이가 각각 다를수 있고, NCBI에서 검색해보면 gapdh랑 관련되어있는 것, 유사한 것 등등이 다 쏟아져 나오기 때문입니다. 그렇게 종류가 많으면 control로 쓸수 없게요? ^ ...
답변 1  |  2007.12.12
Q. GAPDH가 무엇인가요?
GAPDH가 무엇인가요 loading control 이라는데....
A.  올래는 glycolysis과정에 관여하는 enzyme인데,... 그 발현량이 약물등에 의해서 잘 변하지 않습니다.. 그래서 요런 house keeping gene들을 intra cellular control로 사용합니다. 즉...님이 로딩을 하였을때 각각의 웰 ...
답변 4  |  2009.07.19
Q. GAPDH가 two band로 뜨는 경우도 있나요?
다른 primer를 찾아야 할까요?? (다른 조직에선 잘 나왔던 GAPDH인데..ㅜ) 제가 조건을 못 맞추는 걸까요??..ㅠ 고수님들!! 도와주세요^^ ...
A.  primer design시 blast search를 해보는 것이 좋습니다. 하지만 GAPDH는 full gene을 amplify해도 single band로 잘 뜹니다. PCR조건이나 primer의 조건을 다시 한번 점검해 보도록 하세요 ...
답변 2  |  2008.06.19
Q. GAPDH와 Actin의 차이
protein 을 확인할때는 actin을 사용했고, RNA를 볼때는 주로 GAPDH를 사용했는데.. 이유도 모른체 실험만 했었는데..이젠 이유를 좀 알고 싶네요,,ㅎㅎ 기준이 있는 것인지..가르쳐 주세요,, 너무 초보적인 ...
A.  loading control로서 사용하면 안되겠죠 따라서 이때에는 GAPDH나 다른것을 사용해야 합니다 이처럼 모든 세포에 늘 발현하는 House keeping gene이라 할지라도 그 사용용도가 loading control에 지나지 않지만 때에 ...
답변 3  |  2009.06.18
Q. RT-PCR결과는나오는데 GAPDH는발현을 안해요~~
정말 이를어찌해야할지모르겠어요 각 primer로 RT를 만들어서 PCR을 돌려서 전기영동을 했는데 ... 전 정말 초보입니다 기초적으로 설명좀 해주세요 그리고 GAPDH 사이즈가 어케되나요? 350bp 아닌가요 ...
A.   아님 PCR reaction mixtuer나 condition에 문제가?? 그리고 GAPDH 사이즈는 primer 위치에 따라 다르니 정해진 사이즈는 없습니다. primer sequence와 target species가 뭔지? 그리고 PCR reaction mixture와 condtion을 좀 메일로 ...
답변 6  |  2006.07.18
Q. real time PCR 관련 문의사항 (GAPDH를 매일 새로 확인해야하나요?)
보려면 GAPDH를 새롭게 또 확인하기 요즘 드는 생각은 굳이 GAPDH를 매일 새롭게 봐주어야 할까라는 생각이 들어서요ㅠ 샘플도 소모와 시간도 절약하고싶어서ㅠ 혹시 다른 연구자분들은 어떻게 하고 ...
A.  그렇다면 실험실에서 알져주신데로 house keeping gene인 GAPDH를 매일 새롭게 봐주어야하는 것이 맞는거 군요ㅠㅠ 친철한 답변 감사합니다.
답변 2  |  2023.01.03
Q. 대장암 cell line에서의 GAPDH발현이 안되요..
일직선이네요.. cycle은 40회 입니다.. 다음주가 발표인데,, GAPDH가 발현되지 않으니.... 자료분석이 불가능하고... 어디서부터 뭐가 잘못되었는지 모르겠습니다.. 고수님들 조언 ...
A.  안된다면 Primer의 문제일 것 같네요 저희 실험실의 경우는 GAPDH와 18SrRNA 두개의 Refrence를 걸어 실험하는데 18SrRNA나 beta-actin 같은 다른 house keeping gene으로 test 해보는건 ...
답변 2  |  2016.05.18
Q. housekeeping gene인 GAPDH가 흔들립니다.
protein prep 이후 그 양을 맞춰주는데도 불구하고 GAPDH가 흔들리는 data를 얻는다는 것이고, sample은 rat의 hippocampus와 cortical cell입니다... 비슷한 경험이 있으신 선배님들의 의견을 듣고 싶고, 혹시 제가 ...
A.  같은 실험을 진행하지는 않았습니다. 1. 그러나 이번 실험만 loading control이 차이가 나는것인가요? 아니면 다른 실험에서도 차이가 나는가부터 따져가야 할것 같습니다. 2. 여러 실험군의 prep을 젤을 걸 ...
답변 2  |  2020.02.25
Q. GAPDH band가 일정하게 나오지 않을 때  |  첨부파일 첨부파일
계속 반복해도 GAPDH가 도무지 일정하게 나오질 않네요.. GAPDH가 일정하게 잡혀야 그 다음 MMP 등 다른 factor들의 extract 처리에 따른 양상을 볼 수 있는데 이 단계에서 넘어가질 못하고 있습니다 cDNA 합성전 ...
A.  PCR에서 GAPDH band가 첨부사진 처럼 차이가 나면 cDNA 합성에 문제가 있을 가능성이 보입니다. 또한 rt-PCR 30cycs이상 증폭하면 density가 동일하게 보이기 때문에 증폭양 비교를 하기 힘듭니다. 증폭량 비교는 ...
답변 3  |  2020.10.27
Q. qRT-PCR (SYBR) GAPDH가 이상하게 나오는데 이유를 모르겠습니다.........
PCR palte에 넣어주었는데, 왜 더 양이 적은 kupffer cell에서 GAPDH Ct값이 더 높게 측정되는지 이유를 모르겠습니다....ㅜ ...
A.  1ug cDNA랑 1.6ug cDNA 둘 농도로 모두 qRT-PCR을 진행하면, 모두 GAPDH Ct값이 13정도로 나왔었는데, 더 희석해서 진행하면 될까요...??.. ...
답변 4  |  2022.12.12
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