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정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. mouse GAPDH의 mRNA 크기는 대략 어느 정도입니까? |
| 다른것같은데 왜 그렇게 되는겁니까?
보통 실험에서쓰는 GAPDH의 고유번호는 다들 어떤것을 쓰고 계십니까?
너무 많이 물어봐서 죄송합니다. 꼭 도와주세요 ... |
| A. 다른 것은 EST의 길이가 각각 다를수 있고, NCBI에서 검색해보면 gapdh랑 관련되어있는 것, 유사한 것 등등이 다 쏟아져 나오기 때문입니다.
그렇게 종류가 많으면 control로 쓸수 없게요? ^ ... |
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답변 1 | 2007.12.12 |
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| Q. GAPDH가 무엇인가요? |
| GAPDH가 무엇인가요
loading control 이라는데.... |
| A. 올래는 glycolysis과정에 관여하는 enzyme인데,...
그 발현량이 약물등에 의해서 잘 변하지 않습니다..
그래서 요런 house keeping gene들을 intra cellular control로 사용합니다.
즉...님이 로딩을 하였을때
각각의 웰 ... |
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답변 4 | 2009.07.19 |
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| Q. GAPDH가 two band로 뜨는 경우도 있나요? |
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다른 primer를 찾아야 할까요?? (다른 조직에선 잘 나왔던 GAPDH인데..ㅜ)
제가 조건을 못 맞추는 걸까요??..ㅠ
고수님들!! 도와주세요^^ ... |
| A. primer design시 blast search를 해보는 것이 좋습니다.
하지만 GAPDH는 full gene을 amplify해도 single band로 잘 뜹니다.
PCR조건이나 primer의 조건을 다시 한번 점검해 보도록 하세요 ... |
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답변 2 | 2008.06.19 |
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| Q. GAPDH와 Actin의 차이 |
| protein 을 확인할때는 actin을 사용했고,
RNA를 볼때는 주로 GAPDH를 사용했는데..
이유도 모른체 실험만 했었는데..이젠 이유를 좀 알고 싶네요,,ㅎㅎ
기준이 있는 것인지..가르쳐 주세요,,
너무 초보적인 ... |
| A. loading control로서 사용하면 안되겠죠
따라서 이때에는 GAPDH나 다른것을 사용해야 합니다
이처럼 모든 세포에 늘 발현하는 House keeping gene이라 할지라도 그 사용용도가 loading control에 지나지 않지만
때에 ... |
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답변 3 | 2009.06.18 |
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| Q. RT-PCR결과는나오는데 GAPDH는발현을 안해요~~ |
| 정말 이를어찌해야할지모르겠어요
각 primer로 RT를 만들어서 PCR을 돌려서 전기영동을 했는데 ...
전 정말 초보입니다
기초적으로 설명좀 해주세요
그리고 GAPDH 사이즈가 어케되나요? 350bp 아닌가요 ... |
| A. 아님 PCR reaction mixtuer나 condition에 문제가??
그리고 GAPDH 사이즈는 primer 위치에 따라 다르니 정해진 사이즈는 없습니다.
primer sequence와 target species가 뭔지? 그리고 PCR reaction mixture와 condtion을 좀 메일로 ... |
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답변 6 | 2006.07.18 |
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| Q. real time PCR 관련 문의사항 (GAPDH를 매일 새로 확인해야하나요?) |
| 보려면 GAPDH를 새롭게 또 확인하기
요즘 드는 생각은 굳이 GAPDH를 매일 새롭게 봐주어야 할까라는 생각이 들어서요ㅠ 샘플도 소모와 시간도 절약하고싶어서ㅠ
혹시 다른 연구자분들은 어떻게 하고 ... |
| A. 그렇다면 실험실에서 알져주신데로 house keeping gene인 GAPDH를 매일 새롭게 봐주어야하는 것이 맞는거 군요ㅠㅠ
친철한 답변 감사합니다. |
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답변 2 | 2023.01.03 |
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| Q. 대장암 cell line에서의 GAPDH발현이 안되요.. |
| 일직선이네요.. cycle은 40회 입니다..
다음주가 발표인데,, GAPDH가 발현되지 않으니.... 자료분석이 불가능하고...
어디서부터 뭐가 잘못되었는지 모르겠습니다..
고수님들 조언 ... |
| A. 안된다면 Primer의 문제일 것 같네요
저희 실험실의 경우는 GAPDH와 18SrRNA 두개의 Refrence를 걸어 실험하는데
18SrRNA나 beta-actin 같은 다른 house keeping gene으로 test 해보는건 ... |
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답변 2 | 2016.05.18 |
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| Q. housekeeping gene인 GAPDH가 흔들립니다. |
| protein prep 이후 그 양을 맞춰주는데도 불구하고 GAPDH가 흔들리는 data를 얻는다는 것이고, sample은 rat의 hippocampus와 cortical cell입니다...
비슷한 경험이 있으신 선배님들의 의견을 듣고 싶고, 혹시 제가 ... |
| A. 같은 실험을 진행하지는 않았습니다.
1. 그러나 이번 실험만 loading control이 차이가 나는것인가요? 아니면 다른 실험에서도 차이가 나는가부터 따져가야 할것 같습니다.
2. 여러 실험군의 prep을 젤을 걸 ... |
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답변 2 | 2020.02.25 |
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Q. GAPDH band가 일정하게 나오지 않을 때 |  첨부파일 |
| 계속 반복해도 GAPDH가 도무지 일정하게 나오질 않네요..
GAPDH가 일정하게 잡혀야 그 다음 MMP 등 다른 factor들의 extract 처리에 따른 양상을 볼 수 있는데 이 단계에서 넘어가질 못하고 있습니다
cDNA 합성전 ... |
| A. PCR에서 GAPDH band가 첨부사진 처럼 차이가 나면 cDNA 합성에 문제가
있을 가능성이 보입니다.
또한 rt-PCR 30cycs이상 증폭하면 density가 동일하게 보이기 때문에 증폭양 비교를
하기 힘듭니다.
증폭량 비교는 ... |
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답변 3 | 2020.10.27 |
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| Q. qRT-PCR (SYBR) GAPDH가 이상하게 나오는데 이유를 모르겠습니다......... |
| PCR palte에 넣어주었는데, 왜 더 양이 적은 kupffer cell에서 GAPDH Ct값이 더 높게 측정되는지 이유를 모르겠습니다....ㅜ ... |
| A. 1ug cDNA랑 1.6ug cDNA 둘 농도로 모두 qRT-PCR을 진행하면, 모두 GAPDH Ct값이 13정도로 나왔었는데, 더 희석해서 진행하면 될까요...??.. ... |
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답변 4 | 2022.12.12 |
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