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'효소/Enzyme' 관련 검색광고입니다.
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실험Q&A    2,477건 정확도순 날짜순
Q. enzyme 2cut
벡터와 인설트 enzyme 2cut하려구요 EcoR1->EcoR1 buffer, 1.2.3.4.모두 100% Sal 1->3+BSA 이렇게 나와있네요.이럴경우 1.이 두 엔자임 함께 넣어 자를때와 EcoR1 먼저 넣어 2시간 자른 뒤 Sal 1add 한 뒤 두시간 더 두는 ...
A.  버퍼가 틀릴 경우는 염도가 낮은 효소먼저 처리한후에 바로 다음 효소를 처리하시는 것이 낫지요. 아니면 BSA는 첨가되어도 그리 영향은 없으니 2가지 효소와 3번 버퍼+BSA 로 하시는것도 괜찮을듯 싶 ...
답변 2  |  2006.12.12
Q. enzyme cutting 방향성 질문입니다.
제가 가지고 있는 gene의 길이는 1,098bp이고 사용한 enzyme은 sac1 입니다. 저희 gene의 sac1 site는 335bp 입니다. 그러면 밴드는 444bp, 3669bp / 872bp, 3241bp 이렇게 두가지 상황으로 나올수 있는걸로 생각됩니다. ...
A.  pGEM-T Easy 벡터는 PCR product를 클로닝하는 벡터입니다. SP6에서 T7 방향으로 들어가야 정방향입니다. 왜냐하면 LacZ 유전자의 방향이 정방향이니까요. 유전자의 앞에서 335bp 떨어진 곳에 SacI 이 있고 클로닝 ...
답변 1  |  2016.02.23
Q. enzyme 처리후 incubation시간
size marker만 보일뿐 DNA는 전혀 관찰할수없었습니다. enzyme은 37도씨 incubation time이 16시간인데 16시간을 하다보니 증발하여 그렇게 된게 아닌가 싶은데..젤을 걸기전에 spin down을 시키기때문에 양은 ...
A.  R/E처리는 O/N해도 DNA에는 R/E site cutting외에는 문제가 발생하지 않습니다. 하지만 어디까지나 이론적인것이고 실제로는 장시간 처리했을 때 DNA가 완전 분해되는 경우가 종종발생하는데 가장 큰 이유는 ...
답변 5  |  2008.06.18
Q. enzyme purification & activity
enzyme을 정제하였습니다 vector : pet14b, his tag DNa : mouse 유래 protein size : 47Kda qiagen ninta 사용 sonication : 50mM Tris , 300mM NaCl wash : 50mM Tris, 30mM imidazole, 300mM NaCl (500ml) elution : 50mM Tris, 100mM imidazoel, 300mM NaCl ...
A.  온도에서도 쉽게 활성이 사라지는 것들이 있습니다. 그 enzyme의 성질이기 때문에 어떻게 해볼 도리는 사실 없습니다. 이경우가 그런 경우가 아니길 빕니다 ...
답변 2  |  2009.07.09
Q. dam methylation block이 있는 enzyme 사용 cloning 시
이고 reaction temp.는 50도 입니다. 아 그리고 2cut이 가능한 enzyme site 간의 최소 bp가 얼마 인지 간격이 20bp정도면 2 cut이 가능한지도 알고 싶습니다 ...
답변 0  |  2011.10.25
Q. enzyme kinetics 질문드립니다..(ATP, 기질 두가지 모두 비경쟁적 저해 현상..)
Enzyme kinetics 실험을 수행중에 있습니다.. 제 compound는 기질 농도에 대해 비경쟁적 저해를 보이는 것으로 확인되었습니다.. 질문드리겠습니다.. 혹시 기질농도에 비경쟁적 저해를 보이는 것이 ATP 농도에 ...
답변 0  |  2013.11.27
Q. 2개의 제한효소로 잘랐을 때.. (질문 약간 수정)
: A''GATCT 이고 XbaI : T''CTAGA 입니다.. TCTAG''A AGATC''T 그리고 enzyme은 모두 NEB 것입니다.. 제발 해결해주세요.. ㅠㅠ T vector(pGEM T-easy vector : promega), insert에도 BglII,XbaI site 모두 없어요.. Sequence도 2번이나 ...
A.  TCTAG''A AGATC''T 로 sequence가 붙어있는 것인가요? 바로 붙어 있는 경우라면 어떤 제한 효소가 자른 다음 남아있는 염기를 다른 제한 효소가 인식 못하기 때문일 것입니다. DNA 양 끝단에 바로 recognition site ...
답변 6  |  2008.01.25
Q. 2개의 제한효소로 잘랐을때..??
: A''GATCT 이고 XbaI : T''CTAGA 입니다.. TCTAG''A AGATC''T 그리고 enzyme은 모두 NEB 것입니다.. 제발 해결해주세요.. ...
A.  2-cut으로 잘렸을 때 인서트와 벡터의 각 사이즈가 어떻게 되는지요?..혹시..같은 사이즈는 아닌지.. 혹 인서트가 아니더라도 벡터내에 Bgl또는 XbaI자리가 있어서 잘리는 건 아닌지..그렇다면..양쪽 엔자 ...
답변 3  |  2008.01.24
Q. enzyme의 activity를 측정하려고 합니다.
uv-vis 를 이용하여 흡광도를 찍어서 반응물의 농도 변화를 보려고하는데 일정시간마다 흡광도를 어떻게 찍는건가요 그냥 cuvette에 넣고 시간 흐를때마다 찍어서 보면 되나요??
A.  보통 UV-vis 흡광도 기기를 control하는 software에는 흡광도를 측정할때, 고정된 파장에서 시간별로 흡광도를 측정하는 방식이 있습니다. 일반적으로 "kinetics" 라고 명명하는데, 물론 software 마다 다를수 있 ...
답변 2  |  2012.09.25
Q. restriction enzyme digest 에..문제가..
하는데.. volume도 buffer랑 enzyme 모두 500ul정도로 많구요.. enzyme이랑 buffer랑 잘 vortex도 하면서 시도도 해봤거든요.. 도대체 왜그럴까요..ㅠ ...
A.   DNA의 양이 많지 않다면 volume을 줄여주십시오. 또한 enzyme은 총 volume의 1/10을 넘지 않아야 합니다. 건승하시기 바랍니다 ...
답변 3  |  2005.05.10
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