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실험Q&A    559건 정확도순 날짜순
Q. digestion할 때 Urea처리시에 thiourea를 왜 함께 넣나요?
단백질 digestion할 때 Urea처리시에 thiourea를 왜 함께 넣어주나요? Urea와 thiourea의 차이점이 어떻게 되며, 왜 urea만 넣어주는 것이 아니라 thiourea도 함께 넣어주는 것인지... 답변 부탁드려요. 그리고 꼭 ...
답변 0  |  2010.08.16
Q. digestion에 관해 질문 있습니다.
어느것이 맞는지 가르쳐 주세요 토탈 양, enzyme 양, sequential digestion 할때 버퍼는 얼마나 넣는지 .... 자세히 가르쳐 주시면 감사하겠씁니다 ...
A.  NEB ctalog 보시면 분자생물학에 관해 특히 DNA 를 잘라 붙이는 다양한 기술들이 서술되어 있습니다~ 한가지만 말씀 드리면 SELF-LIGATION 되어서 VECTOR COLONY 가 많이 뜨는 것 같네요. alkaine phosphatase 를 처리해 ...
답변 2  |  2007.05.28
Q. digestion이 제대로 잘 되지 않는 것 같아요 ㅜㅜ
vector만 들어있는 control plate에서는 14개 정도가 나오네요. digestion에서 제대로 안 잘려서 self ligation이 되었다는건데.. 생각해봐도 어디가 문제인지를 모르겠어요 ㅜㅜ 도움 주시면 감사하겠습니다 ...
A.  Bgi2라는 효소가 있나요? Bgl II (비글 2) 아닌가요? 궁금해 REBase라는 데이터베이스까지 찾아봤는데 Bgi2라는 효소는 없어서 하는 얘기입니다. 보통 이런 결과는 Insert이나 vector가 잘 안잘렸기 때문에 나온 ...
답변 1  |  2013.12.21
Q. 잘되던 Double digestion이 안되네요...
들어간것 같긴한데..그래도 Donor plasmid에서 잘 잘리던 double digestion 방법이 갑자기 안되는것이 의아하네요.. 제한효소사이트 Sal1, Hind 3 입니다. 이런 경우도 있나요 선생님들 ...
A.  1. 정말로 insert가 들어갔는지 확인하세요. 자르지 않은 플라스미드는 전기영동으로 그 크기를 가늠할 수 없습니다. 싱글컷이라도 해보세요. 아니면 다른 제한효소를 사용할 수 있는지도 체크해보세요 ...
답변 4  |  2015.03.10
Q. plasmid enzyme digestion 관련하여 여쭙겠습니다.  |  첨부파일 첨부파일
plasmid 추출에 이용하였습니다. (매우 뿌얘진 상태) double digestion에는 nano drop으로 측정한 1ug의 plasmid를 이용하였으며 (10ul) enzyme은 엘피스 바이오텍의 XmaI과 NheI을 사용하였고 instruction상에 둘다 4번 ...
A.  오른쪽 사진에서 보면 uncut과 cut 세개의 밴드 모양이 다릅니다. uncut은 밴드가 그냥 평범해 보이지만 cut한 것 세개는 모두 밴드 위쪽으로 무슨 좁쌀 알갱이가 붙은것처럼, 또는 왕관 모양으로 보이죠? ...
답변 1  |  2016.04.21
Q. Digestion 과정 실패 요인에 대해서 여쭙니다.
있지 않을까 생각이 들어 물어봅니다. 시간이 적어서 digestion이 안 된건지도 의문이 들구요. 그리고 insert는 제한효소 처리가 됐는지 안 됐는지 확인할 방법은 없는걸까요? 이건 다른 조의 실험이였어요 ...
A.  Insert이 들어간 것이 한개 밖에는 없기 때문이 아닐까요? 다 들어갔는데도 잘린 것이 하나밖에 없다면 그 sample만 깨끗하고 나머지는 효소반응에 문제가 될 수 있는 다른 물질들 (salt나 phenol, alcohol과 같 ...
답변 1  |  2012.10.05
Q. DNA Digestion
하는데 두개로 나온 것은 다 안잘려서 인거 같습니다 일단 digestion이 잘 안된 것은 알겠는데 gel extraction을 위해서 전기영동을 어떻게 해야하는지 조언 부탁드립니다 ...
A.  lane을 합쳐서 loading하셔도 문제 없습니다. 잘린 DNA band도 보이긴 하네요. 실험상황을 정확히 모르니 답변이 될 수 있을 지는 모르겠는데, 일단, 전기영동 버퍼(TAE, TBE)가 오래되었는지 gel만든 buffer의 농 ...
답변 1  |  2012.06.06
Q. DNA digestion 프로토콜
P1(from Penicillium citrinum) 및 alkaline phosphatase를 이용해 DNA digestion 경험이 있으신 분 도움 부탁드립니다. 즐거운 하루 보내세요 ...
A.  nuclease P1은 RNA나 ssDNA와 같이 단일가닥 핵산을 자르기 때문에 분리한 dsDNA에 처리해도 반응이 일어나지 않습니다. alkaline phosphatase는 DNA 5' 말단의 인산을 제거하기 때문에 DNA를 분해하는 효소는 아닙니다.
답변 1  |  2020.09.18
Q. sequencial digestion에 대해..
buffer를 쓴다면 두번째 digestion은 enzyme만 넣는건지.. 아니면 처음 digestion했던게 template로 써서 다시 buffer랑 enzyme등을 다 넣어야 했던건지... 아리송~ 하네영 그럼 좋은 하루되세여~^ ...
A.  두번째 사용하는 효소의 첨가량이 전체 부피의 1/10 을 넘지 않으면 효소만 넣어도 됩니다.
답변 1  |  2006.05.11
Q. double digestion 실험할때요
먼저 한다음에 Hindlll의 salt농도를 맟춘다음에 Hindlll를 넣고 digestion하는건가요? 3. 시간은 각각 1시간씩 하면 되는것인가요? 머리가 나빠서요^ ...
A.  Buffer salt 농도 EcoR I : 50mM NaCl Hind III : 100mM NaCl이 필요합니다. salt농도 보다 Tris농도가 너무 차이가 나서 순서적으로 cutting하는 것은 어렵습니다. 1 cutting -> 정제 -> 1 cutting으로 실험하시는게 가장 좋을 ...
답변 3  |  2008.06.25
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