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실험Q&A    6건 정확도순 날짜순
Q. competent cell
comptent cell 만드는데. 이노우에. 방법을 이용하려구합니다. .. 그런데.. pipes buffer 대신. mops 를 사용해도 될까요.
A.  글쎄요???? HEPES는 써봤는데 yield가 좀 떨어집니다.
답변 1  |  2004.07.08
Q. Competent Cell 제조시 1XTSS 에서 PEG의 역할??
Comptent cell 제조시 1xTSS를 이용해서 만들었는데요.. LB, MgCl, DMSO, PEG를 사용했어요 여기서 PEG 를 사용하는 이유, 역할이 궁금합니다. 답변 부탁 드릴께요^^
A.  PEG는 고분자물질입니다. 효소반응에 고분자 물질을 사용하는 이유는 분자간의 반응을 촉진하는 역할을 하기 때문입니다. PEG역시 이러한 이유로 사용되고 있으며 실제로 transformation효율의 상승효과를 ...
답변 2  |  2009.04.04
Q. yeast comptent cell
컴셀을 이용하여 효모를 삽입 하여야 하는데 yeast competent cell 은 어 떻게 만들 수 있나요? DH5a같은 호스트 셀처럼 살 수 있는 것인가요 ...
A.  pdf 파일 구할 수 있을 겁니다. 거기보면 피키아랑 사카로랑 cp cell제조방법 있습니다. 그리고 학생분이신가요? 보통 학교에서는 cp cell 만들어 쓰지 않는지요 ...
답변 1  |  2012.10.31
Q. ligation 실험 할 때
ligastion 실험 중에 ampicillin을 첨가하지 않은 배지를 comptent cell에 넣어주는 데 왜 넣어주는 건가요? 다른 배지와 결과를 비교하기 위해서 인가요?
A.  TF 후 recovery용 배지에는 항생제를 넣지않고 배양하는 것은 plasmid에서 균 cell wall recovery와 plasmid에 있는 항생제 내성 유전자의 초기발현을 위한 약간의 시간이 필요하기 때문입니다.
답변 1  |  2019.03.12
Q. Cloning시 Ligation이 안됩니다.
(4개의 mutants) 이제 이것을 cell culture시스템 에서 infection실험을 ... Ligation 시키고 다음날 바로 comptent cell로 transformation시켰습니다. 그후 콜로니를 키워서 nsi1로 자르면 8.8kb와 5.2kb가 나와야 정상일것 ...
A.  컴셀 뭐 쓰시나요? 컴셀을 바꾸셔야할듯합니다.. 그리고 라이게이션 볼륨이 어떻게 되나요? 사이즈들도 큰데 원컷이라서 더 그런것 같습니다. (셀프가 다수) 콜로니는 많이 뜨나요? 20개 정도 따 보 ...
답변 2  |  2015.03.13
Q. blue white assay (cloning) 질문입니다.
. 저희는 지금 LA plate를 만든 이후 x-gal 및 iptg를 comptent cell 도말 30분 전에 도말하여 사용하고 있습니다. 뭐가 문제일까요.. ...
A.  prep 해보면 DNA가 없는 것으로 나타났고요 제 생각이지만 cell이 오염이 된 게 아닌지 의심스럽습니다. 다시 competent cell을 만드시던지 stock에서 가져와야 할거같습니다. competent cell을 사서 하신거라면 ...
답변 1  |  2016.05.16
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