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'Cloning' 관련 검색광고입니다.
명품Enzyme NEB 의 DNA Assembly&Cloning! 문의: 02-2105-7020, 042-862-9636, FAX : 02-2105-7025 info@philekorea.co.kr
실험Q&A    6,808건 정확도순 날짜순
Q. cloning후 PCR로 insert를 확인 하는 과정에서 PCR size가 insert size 보다 크게 나옵니다
잘라서 확인을 해봤지만 이상이 없었습니다. PCR primer 는 cloning 할때 사용한 primer 로 사용 했습니다. frame shift 가 일어났다고 생각하기에는 size가 너무 크케 나오고 있습니다. 이때 insert가 ...
A.  full sequencing 해보셨나요??
답변 4  |  2014.12.16
Q. cloning할 때 insert크기 문제
있는 것을 제한효소 Nde1, Xho1으로 처리하고 다시 pET vector에 cloning하는 데 실험이 안되네요 이와 비슷한 크기의 insert를 가지고 실험하여 성공하신 분의 의견을 듣고 ...
A.  또는 어떤 크기의 DNA를 사용하고 있느냐에 따라 cloning방법에 있어서 차이를 보이는 것은 아닙니다. DNA정제시스템은 물론 사용하고 계신 enzyme들, 그리고 competent cell에 이르기 까지 모든 것이 완벽해야만 ...
답변 4  |  2009.04.08
Q. t-vector cloning  |  첨부파일 첨부파일
관계로 commercial한 T-vector를 무한정 쓸 수 없어서, T-vector를 cloning해서 쓰고 싶은데요. 찾아봤더니 enzyme처리와 primer를 다시 짜야 한다고 나오더라구요. 1. enzyme : 어떻게 선택해야하는지.. 2. primer design : ...
A.  갖고 계신 TA vector를 이용한 실험에서 Blue colony중 한두개를 얻어 Plasmid를 뽑은 후 EcoRV를 사용하여 잘리는지를 먼저 확인해 보세요. EcoRV에 의해 잘린다면 이는 T가 없는 EcoRV의 self ligate입니다. 이를 확 ...
답변 4  |  2009.04.28
Q. cloning(electorporation 시 vector 얼마나 쓰시나요?
생성되지 않아서 무슨 문제가 있는 건지 잘 모르겠습니다. cloning에 대해 잘 아시는 분들, 실험하고 계신 분들 vector 얼마정도 넣어서 실험하시나요 ...
A.  사용합니다. 이는 library를 만들기 위한 목적이며 단순히 cloning용으로는 electrotransformation방법을 사용하지 않습니다. 일반적인 chemical com cell을 사용해도 소기의 목적을 달성할 수 있는 충분한 수의 ...
답변 1  |  2013.03.28
Q. cloning이 잘 안됩니다
있는 plasmid에 약 2kb가량의 gene을 cloning하려고 합니다. 저의 cloning은 이렇습니다. - primer 설계시 제한효소 앞 염기 4개를 추가하여 제한효소처리의 효율 증가 - Taq polymerase 사용 (promega) - 제한효소 처리 ...
A.   "colony수가 아주 많다." 조금은 주관적인 표현인 듯 합니다. Cloning에서 가장 중요한 요인중 하나가 competent cell의 효율입니다. 가능한 10^7 /ug DNA 이상의 효율을 갖는 competent cell을 사용하는 것이 좋으며 ...
답변 1  |  2015.06.18
Q. cloning primer
cloning을 하기위해서 primer를 디자인하고 있는데, forward에는 BamHI을.. reverse에는 NcoI site를 첨가하려고 합니다. 그런데 단순히 제한효소 부위만 더 넣어준다고 되는것이 아니고 1-3개의 염기를 추가하여 ...
A.  그렇게 하는것도 가능하긴한데 그것도 효과적인방법이라고 보긴 힘드네요.. 제일좋은방법은 subcloning하는게 좋은데 보통 TA-Cloning을 먼저 해서 자르는것이 효율이 좋습니다
답변 2  |  2007.04.03
Q. cloning이 몇달째 안됩니다. 도와주세요.
kit를 사용해보기도 했습니다. 하지만 매번 뻥벡터(아무 cloning안한 벡터)와 반응시킨 competent cell에서만 콜로니가 뜨고 나머지는 뜨지가 않더라구요. 이제는 뭘 건드려야할 지 모르겠습니다. digestion한 ...
A.  cloning이란 참 쉬우면서도 어렵죠 써주신 대략의 protocol을 보면 틀린 부분은 없습니다. 하지만 이 과정만보곤 무엇이 잘 못 되었는지 알지 못합니다. 한가지 말씀을 드리자면 empty vector가 생긴다는 것은 ...
답변 9  |  2014.08.13
Q. Cloning ...
된 size에 뜬 것 포함해서 band가 너무 많이 떴습니다... cloning이 어디서 잘 못 된 것인지.. 알 수 없네요... 선배님들 답변 부탁드립니다! ...
A.  white colony라고 해서 target insert가 들어갔다는 보장은 없는데 얼마나 picking하셧는지? 잡 band가 많이 떳다는건 transformation과정에서 뭔가 잘못 됏을 가능성을 제기함니다
답변 4  |  2013.08.08
Q. cloning 질문
-->TF--> prep후 젤내려서 cloning 된것을 찾았죠 그후에 정말 cloning이 된것인지 확인하기 위하여 (bgl2-hind3, EcoRI single cut, xho1-not1 cut) 했죠 이것은 insert 내의 enzyme과 vector의 enzyme을 따져서 이렇게 잘랐죠 ...
A.  1. 그 다른 enzyme들, active한 거죠? control로 확인했나요? 2. TF 후 colony 몇 개나 찍어보셨나요? 이삼십개 ... 더 권장. 3. 프랩한 DNA 에 문제가 있을 수도 있습니다. 원 모어 타임. "Cloning에는 왕도가 없다. ...
답변 3  |  2007.02.16
Q. cloning 후 enzyme cut이 되지 않습니다.
친구는 sequencing을 해봐야한다 의견이 갈립니다. 보통 잘 cloning이 진행되었는데 이런 현상이 발생하는지 궁금하여 질문 드립니다 ...
A.  정보가 부족해서 뭐가 문제인지 잘 모르겠네요. 혹시 INSERT 크기가 너무 짧아서, 안보이는 것은 아닐까요? 짧아서 GEL을 빠져나간다는 것도 문제지만, 짧으면 그만큼 EtBr이 덜 달라붙기 때문에, band ...
답변 1  |  2016.08.18
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