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실험Q&A    14건 정확도순 날짜순
Stable cell line을 만들 때 필요한 실험 지식은???
plasmid for a selection marker (ca.10:1 ratio recommended) - Start with clean DNA since a ... selection marker gene to be expressed, subculture the cells and start selection. Make sure to keep unselected cells as control or backup. For drug selection, it is ...
프로토콜
 |  2013.10.02
제가 이제 막 실험을 시작해서 잘 몰라서 질문합니다ㅜㅜ cell culture하는데 1:2로 계대배양 해두라고 하는데 그러면 하나의 cell dish를 1:2로 계대배양하면 총 3개가 되나요? 2개로 해야하나요?
투표
 |  2020.01.16
Q. 논문에서 cell에 약물전처리 부분이 애매합니다ㅠㅠ
effect of test compounds and cell proliferation (MTT assay) was carried as described ... were added. Twenty-four hours later, cell culture medium and cell scrapings were harvested. 저는 OA와 durg을 동시에 처리해서 24시간 후에 샘플처리하거나 ...
A.  답변이 도움이 되실지는 모르겠습니다만 메소드에서는 보편적인 실험조건(물질 시약등)만 설명하고 시간과 같은 상세한 부분은 대게 피규어에 적혀있지요 같은 실험이라도 여러 관점(조건)에서 실 ...
답변 1  |  2014.04.08
Q. RNA prep시 trizol의 양과 cell의 양 관계???
RNA를 뽑는데, 매뉴얼에서는 10^7 cell (O/N culture 1mL사용) 당 trizol 1mL을 사용하 ... 1.5~2ug/mL의 농도와 1.9~2.0의 260/280 ratio가 나오지만 260/230 ratio가 1.3~1.5정도로 좀 낮게 나옵니다. 제 실험방법에 무슨 문제가 ...
A.  대부분 1ml 사용하면 잘 나오고요. 260/230 ratio가 나쁜 것은 organic solvent contamination 때문 입니다. cloroform 넣고 centri 돌린후 sup transfer 시 맘을 비우시고, 아래 red 부분이 들어가지 않도록 해보세요..
답변 1  |  2010.04.16
Q. palmitic acid(palmitate) RPMI에 용해시키는 법이 궁금합니다. 고수님들 제발 부탁요 ㅠㅠ
알아보는 실험을 진행중입니다. Cell은 96well plate에 culture하고 treat하는 PA의 최고 농도는 10 ... 그것을 BSA와의 비율이 10:1 molar ratio(PA:BSA)가 되도록 media에 희석해서 쓰라고 되어 있더군요. 논문에서 ...
A.  10% fatty acid free BSA와 혼합 후 37도에서 녹이면 됩니다. 8mM 까지 녹일수 있기 때문에 100uM 처리 농도는 충분히 만들수 있을 겁니다.
답변 6  |  2020.03.11
Q. 고수님들의 의견을 듣고자 합니다.(RNA 추출은 잘 되었으나 GAPDH발현이 매우 약함)
cell 이나 cell line으로 즉, single cell culture를 통하여는 많이 해보았고 ... 거쳐 RNA를 추출하였고 정량값과 ratio도 적정하게 나와 그 RNA를 이용하여 cDNA를 얻었습니다. 그리고 그 전과 동일하게 GAPDH발현량을 ...
답변 0  |  2010.06.22
Q. glutamate를넣어도칼슘이크게증가하지 않는이유는?
파장을 읽습니다. cell은 primary culture cell이구요. 처음 읽히는 intensity가 500-1000사이로 나오고 ratio는 2정도 나옵니다. cell에 fura는 잘 로딩이 된거 같은데 glutamate or Kc을 넣어도 크게 변화가 없습니다. 아주 ...
답변 0  |  2007.04.03
Transfection 이 잘 되도록 하려면......???
사용한다. - 정제도: 260/280 ratio가 1.8 이상인 것을 사용한다. ... THP-1, RAW264.7, etc.), microglia, primary culture cells.Because of the low cell toxicity, medium change after transfection is not required. Furthermore, this kit does not contain ...
프로토콜
 |  2013.08.05
Q. raw 264.7 cell subculture 할 때 density를 얼마정도로 해야하나요??
찾아보니 Subcultivation Ratio: A subcultivation ratio of 1:3 to 1:6 is recommended 라고 되어있는데, 이게 무슨 의미인지 잘 모르겠습니다 ㅠ culture dish에 subculture할 예정인데, 어느정도의 셀을 풀어야 할 지 ...
A.   : 3, 1 : 6은 cell : media 비율입니다. 보통 80%정도 자랐을 때 subculture를 하면되고 이때 cell을 1 정도 넣으면 media를 3 또는 6정도 넣으면 됩니다. 실험 목적마다 조금씩 다르지만 5 X 10^4 ~ 5 X 10^5/ml 사이에서 ...
답변 1  |  2019.07.15
Q. subcultivation ratio
ATCC에 보면 subcultivation ratio 하고 나와있는데... 이게 정확히 뭘 의미하는지 잘 모르겠어요;; 이번에 제가 B16F10 melanoma cell로 실험을 하게 되었는데요.. 1:10을 recommend한다고 되어있는데.. 무슨 말인지;
A.  셀을 spin down 후, 10ml로 pellet를 풀어주구요..거기에서 1ml만을 새 플레이트어 넣어라는 말입니다.. 1/10만을 넘기라는 이야기로 이해하심 되요...
답변 2  |  2013.04.27
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