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실험Q&A    3,791건 정확도순 날짜순
Q. western blot에서, band의 감도 측정법??
편집 등의 작업을 하는데요.. 혹시 이 프로그램에서 band의 강도를 수치화하는 기능이 있나요?? 아시는 분 .. 답변 해 주세요~^^ 부탁드립니다 ...
답변 0  |  2009.04.09
Q. western band가 흐리게 잡히네요..
1차는 his-tag Ab를.. 2차는 Mouse IgG HRP를 사용합니다. ECL만 뿌리면 target band가 형광으로 눈에 띄게 보이는데 필름을 exposure하면 band가 답답할 정도로 흐리게 나오네요... 왜그럴까요..
A.  다른 것 잡을때도 그런가요? 다른때와 비교해서 적어주시면 많은 분들이 답변하시기 편하실 것입니다..
답변 2  |  2008.09.23
Q. western blot band를 봐주세요.  |  첨부파일 첨부파일
stock한걸 희석해서 사용한거라..분명 같은 조건이면 같은 band가 나와야 하는데 요즘 모든 실험 결과가 엉망입니다ㅠㅠ 처음에는 Ab를 의심했는데 다시 만들어 새로 실험해도 역시나 같은 결과 입니다. ...
A.   SDS-PAGE에서 해상도와 분리도는 아주 중요한 요인으로서 band의 모양과 두께를 결정합니다. 이러한 문제가 생기는 원인은 많습니다만, 몇가지만 추려보면, 1. Sample protein의 over loading 2. unsuitable stacking ...
답변 3  |  2010.01.08
Q. PCR band가 갑자기 안나와요.  |  첨부파일 첨부파일
잘못됐을까봐 gradient 돌려서 확인했는데도 gradient 조차 band가 하나도 안나오네요. pre-mix를 사용중이고요. pre-mix에 primer forward&reverse 1ul씩, DNA 1ul, DW 17ul 넣어서 조건은 95℃ 5분, (95℃ 30초, anneeling- 55℃ 3 ...
A.  사진에서 marker제외한 well이 전부다 smear가 보이는데 DNA양이 너무 많아서 그런건 아닐까 생각되네요 cDNA 인지 gDNA인지 모르겠지만 gDNA라면 농도를 1/10, 1/100 정도로 희석해서 해보시는게 좋을 것 같습니 ...
답변 5  |  2015.11.25
Q. westernbolt band문의입니다.  |  첨부파일 첨부파일
안녕하세요~ westernbolt band문의입니다. 첨부파일에서 맨처음 있는 band가 NOS1인데요,, 다른 band에 ... 더 잘나오는데요,, NOS1은 지나간 흔적이 심하고 band가 선명하게 뜨지 않습니다. 조언 부탁드립니다. ...
A.  protein전체가 끌리고 있다면 결과적으로 최종 data인 western band의 모양이 좋을 수 없습니다. 과도하게 sample을 걸더라도, 좀더 sample을 깨끗이 정제한 후 loading했다면 이와같은 끌림현상은 다소 완화시킬 수 ...
답변 1  |  2010.04.29
Q. gel에서 band 위치에 따라 진하기가 달라집니다.
할수 없을 정도로 흐릿하게 나옵니다.. one band 라서 다른 band가 끼이거나 그러진 않은거 같은데... 도저히 모르겠습니다. ...
A.  gel이 편평한 경우, DNA는 이동하면서 윗표면으로 조금씩 손실됩니다. 따라서 전기영동을 하면 할 수록 농도가 떨어져 흐리게 보이게 됩니다. 1kbp와 100bp를 동량으로 loading한후 나중에 보면 100bp가 같은 ...
답변 3  |  2011.01.26
Q. 웨스턴시 band 읽기...?
.. 이럴때는 처치후 밴드가 보이지는 않지만 control의 Two band가 확연히 보이는 develp time으로 실험을 해야하는지요? 아니면 처치후의 밴드도 희미하게 잡혀 어느정도 읽을 수있는 시간으로 정해야 하는 ...
A.  실험할때마다 똑같은 디벨롭 시간동안에 밴드가 나올거란 생각은...쫌 아닌거 같구요.. 차라리 단백질 양을 줄이는게 나을 듯 싶네요.. 또한가지 방법은 디벨로퍼 액을 담는 통(보통 반찬통쓰죠?)밑에 ...
답변 2  |  2006.10.16
Q. western 시 band의 density....???
.. 이럴때는 처치후 밴드가 보이지는 않지만 control의 Two band가 확연히 보이는 develp time으로 실험을 해야하는지요? 아니면 처치후의 밴드도 희미하게 잡혀 어느정도 읽을 수있는 시간으로 정해야 하는 ...
A.  Control과 보시고자 하는 sample의 농도가 동일하다면 문제가 없을 것 같은데요. Control의 two band가 하 ... 더 벌리시면 될 듯 합니다. Exposure 시간을 조절하시는 것도 band의 진하기를 조절하실 수 있구요 ...
답변 1  |  2006.10.17
Q. Western band ,,,,
band 가 이쁘게 나오는데, 40KD 이하의 band 는 울퉁불퉁하고 band 의 구분이 모호해지면서 옆으로 쭉 이어지게 나오는데, 이건 무슨 이유인가요 ? pH 의 문제가 있는가요 ? 같은 membrane 을 strip 해서 사용해도 ...
A.  1. protein loading 량을 줄여본다. 2. antibody 희석을 더 해본다.
답변 2  |  2007.03.23
Q. [Western Blot] develop 후 특정 band
들어 parp, casp3, actin 등 과같은 band는 잘나오는데 p53, mdm2와 같은 band가 잘 나오지 않습니다. 똑같이 loading을 했는데 왜 어떤 밴드는 나오고, 어떤 밴드는 나오지 않는 걸까요 ...
A.  membrane에서 떨어져나가기 때문에 나중에 확인하는 Ab의 band가 약하게 나오거나 안나오는 경우가 있습니다 ...
답변 1  |  2016.09.21
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