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실험Q&A    19건 정확도순 날짜순
Q. FACS로 Annexin V/PI staining을 하려고 하는데요. FITC를 따로 staining해서 실험 할 수 있을까요??
Annexin V/PI double staining을 해보려고 합니다. 그런데 저희 방에 있는 annexin v antibody가 FITC가 conjugate되어있지 않은 antibody (SC제품의 FL-319) 입니다. 그래서 FITC를 따로 conjugation하려고 합니다. 나름대로의 ...
A.  될 것 같은데요... 어차피 구입해도 도착하는데 까지 시간 필요하니 해보세요. 2-3 단계에서 조심스럽게 washing 하구요^^ nonspecific binding 억제 하기 위함이죠. 또한 control로서 FITC 만 붙인 것 사용하시구요!!
답변 3  |  2012.07.24
Q. Annexin V/PI staining에 대해 여쭙니다~  |  첨부파일 첨부파일
다른 assay들과 함께 Annexin V/PI stating을 setting하고 ... 시간 후에 harvest한 다음 Annexin V/PI stating을 하였습니다. 그런데 육안으로 확인하였을 때는 과반수 이상의 세포가 죽어있었는데 실제 data는 첨부 ...
답변 0  |  2008.01.02
Q. MTT assay와 annexin-V/PI staining이 다를때
천연물로 항암효과를 보았습니다. MTT assay에서는 proliferation의 inhibiton이 일어나는데 annexin-V/PI staining에서는 아무 변화가 없습니다. 어떻게 해석해야 할까요??
A.  .PI 는 cell impermeable 한 nucleus staining dye 로 세포막 붕괴로 인한 ... 만약 여기서도 안된다면 Annexin V/PI 가 이상한 것이겠지요.. 실험이 잘되던 잘 안되던 대조군은 항상 필요하니까 꼭 같이 수행하세요 ...
답변 3  |  2010.03.29
Q. Annexin V/PI staining 고수님들께 질문드립니다.  |  첨부파일 첨부파일
다른 assay들과 함께 Annexin V/PI stating을 setting하고 ... 시간 후에 harvest한 다음 Annexin V/PI stating을 하였습니다. 그런데 육안으로 확인하였을 때는 과반수 이상의 세포가 죽어있었는데 실제 data는 첨부 ...
A.  FACS를 한지 오래되어 기억이 가물거리긴 하지만.. 기억에 그냥 blue tip 가지고 suspension 한듯 합니다. 물론 세게 하진 않았지만.. 그렇다고 크게 조심하며 실험하진 않은듯 한데;;
답변 2  |  2007.12.29
Q. Annexin V/PI 실험할 때에...
Annexin V/PI staining 할 때 조건별로 cell counting을 해야 하나요? 보통 drug를 세포에 처리해서 apoptosis를 유도한 후 assay를 할테구 그렇다면 control 그룹과 drug처리 그룹간의 세포수에 차이가 많이 나게 될텐데요...
A.  Mixed cell 이 아니라면 정확하게 같은 수를 시용하는 것이 좋습니다. (권장한다는 말이지 그렇게 안하면 틀리다! 는 말은 아닙니다)
답변 3  |  2007.12.22
Q. Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit 사용하시는 분 계신가요?
다른 회사의 제품이라도 Annexin V/PI staining을 하신 분들께 여쭤보고 싶은게 있습니다. 분석하고자 하는 세포를 약1x106cells/ml로 준비한다. 0.5ml의 세포 현탁(5x105cell/ml)을 microtube로 옮긴다. 1000 x g로 5분간 ...
A.  Annexin-V는 세포막인 인지질에 있는 phosphatidyl serine에 붙는 것이기 때문에 fixation을 따로 해주면 안되는 것으로 알고 있습니다.. (말씀하신 fixative들은 인지질 성분을 녹일 수 있는 유기용매이니까요..) ...
답변 1  |  2020.04.09
Q. Fixation in apoptosis study using FITC-Annexin V/PI counterstaining
PI의 peak이 잘 나오나요?? Annexin V/PI의 counterstaining의 protocol을 정확하게 알고 계신 분들 있으시면 답변 부탁드립니다. 배경 지식이 없는 상태에서 실험을 하려니 참, 난감하네요. --;;;;; 고수님들 ...
A.  cells을 관찰하기 위하여 왜 annexin-V와 PI (혹은 7-AAD)로 염색을 하는지에 대해 생각을 ... 안쪽에 위치해있던 PS가 바깥으로 이동되는 것을 annexin-V로 잡는 것이기 때문에 fixation을 하지 않습니다. PI의 ...
답변 1  |  2010.03.13
Q. [최종입니다..] 이대로 FACS 진행해도 상관없을까요??
너무 스트레스 받습니다ㅜㅜ annexin V/PI staining으로 FACS 찍어보신 분들이 이 글을 보신다면 수정할 사항이나 이렇게 진행해도 괜찮을 꺼 같다라고 꼭 ...
A.  annexin v/PI staining protocol은 kit에서 나온대로 하면 상관 없을 것 같습니다만 저도 지금 공부중이라..ㅠㅠ 그런데 처음하는 실험인데 너무 무리하는거 아닐까요. 우선 비싼 독소 처리 안하고 대체 가능한 ...
답변 1  |  2020.04.09
Q. Annexin-V/PI staining할때요~
세포내로 유입되어 staining될 수도 있는건가요? Annexin-V/ PI staining 할 때 PI가 nonspecific internalization되어 staining된다면 그런 경우도 생길 수 있는지 궁금합니다 ...
A.  annexin 과 PI 염색할 때 쉽게 실수하는 것 중 하나가 샘플을 fix 한 후 ... 바로 직전에 PI 를 넣어 섞어준후 바로 찍어야 합니다. 또한, annexin 의 경우 특정 버퍼를 사용해야 합니다. 두가지 유의점 확인해 ...
답변 1  |  2007.09.20
Q. FACS에서 Annexin-V (-)/propidium iodide (+) 세포 줄이는 법  |  첨부파일 첨부파일
Flowcytometric analysis with annexin-V/PI double staining로 분석하고 있습니다. 산화스트레스를 주었을 때 과거에는 RLQ (annexin-V(+)/PI(-))와 RUQ (annexin-V(+)/PI(+)) 세포들이 증가되었는데 최근에는 LUQ (annexin-V(-)/PI(+) ...
답변 0  |  2008.03.08
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