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실험Q&A    12건 정확도순 날짜순
Q. Anion exchange chromatography 하기 전
안녕하세요, Anion Exchange Chromatography를 하기 전, 제가 원하는 물질의 pI 값을 찾아 보기 위해 아래와 같은 실험을 진행하려고 합니다: upload_image 이 실험을 하기 위해서, 어떻게 하면 bead의 양을 동일하게 ...
A.  이온교환 수지를 이용한 pI 추정 실험은 resin과 sample의 pH를 test pH로 각각 평형화를해야 합니다. 예를 들어 첨부그림 처럼 pH를 test하려면 각 pH로 평형화된 5개의 resin과 5개의 sample을 준비해야 합니다. ...
답변 5  |  2019.08.23
Q. Anion exchange chromatography buffer 만들기
아래 표를 보며 pH가 다른 여러 Anion exchange chromatography buffer를 만들어 보려고 하고 있습니다. 만약 제가 L-histidine buffer (pKa 5.96)를 만든다고 하면, 이 버퍼의 25oC에서의 pH는 5.96이라고 봐도 되는건가요? ...
답변 0  |  2019.08.09
Q. ion exchange chromatography
chromatography후에 ion exchange chromatography를 하려고 합니다. 그런데 anion exchange를 해야 하는지 cation exchange를 해야하는지 몰라서 질문 드립니다. 제 단백질의 pI =8.5이고 분자량은 90kDa정도 입니다. buffer를 Tris ...
A.  pI8.5면 pH7.4를 사용하기에는 조금 불안합니다. 안정적으로 양/음이온 컬럼에 붙이려면 pI±1.2정도는 벗어나야 합니다. pI 보다 낮은 pH에서는 양이온 교환, pI 보다 높은 pH에서는 음이온 교환수지에 결합 ...
답변 1  |  2019.08.01
Q. ion exchange chromatography
글 올립니다. 제가 알기론 ion exchange chromatography 하는데, 버퍼를 Tris랑 ... Tris의 pH값에 따라 버퍼가 anion인지 cation인지는 자동으로 결정되는 건가요? 고수님들 답변 부탁드립니다. ...
A.  단백질의 pi에 따라 anion인지 cation cloumn 인지 버퍼의 ph 결정합니다. 예를 들어 cataion의 ph 5를 사용한다면 MES 버퍼를 사용하시면 됩니다. http://wolfson.huji.ac.il/purification/PDF/IonExchange/GE_IEXcolumns.pdf
답변 1  |  2014.02.18
Q. 이온교환 크로마토그래피할 때, 같은 pH인데도 이온수지에 따라 왜 다른 버퍼를 쓰는지 궁금해요
exchange chromatography할 때, 같은 pH인데도 ... 예를 들면, pH 8.1에서 anion exchanger(Q or DEAE)를 Tris-cl로 버퍼링 할 수 있는데 왜 Cation exchange(S or CM)할 때는 Tris 대신 HEPES 등을 쓰는지 궁금합니다. 아예 정제가 ...
답변 0  |  2011.05.06
Q. 부분 정제된 저분자 펩타이드의 분석을 하려고 합니다
작은 peptide이고, C18 을 거쳐 anion exchange chromatography를 통해 부분 정제된 상태입니다. peptide의 구조나 시퀀스를 분석하려하는데 제 sample이 trypsin, proteinase K, pepsin 으로는 분해되지 않습니다. MALDI-ToF 나 N ...
A.  완전 정제를 우선 해보세요. 정제를 위해서 지표가 있을 건데 물질 정제가 생각보다 어렵지 않습니다. 그리고 정제하기가 힘들면 부분 정제된 시료라도 원하는 peak를 알면 LC-MS나 LC-MS/MS에서 구조 분석 ...
답변 1  |  2020.02.17
Q. 비티민C와 glucose가 섞여 있는 혼합물.
올립니다. 어떤 특허에서는 anion exchange chromatography를 이용해서 음이온 수지에 비타민 c를 붙이고 물로 washing을 해서 glucose를 떨어 뜨려 주고 이후에 비타민c만 elution한다는 내용은 있기는 한데...직접 ...
A.  양이 많은지. 두 성분을 모두 보존해야하는지 - 포도당은 버려도 되는지. 순수하게 분리해야하는지 -불순물 제거도 포함해서. 이옴교환수지도 좋지만 역상수지를 채운 SPE 카트리지를 쓰던가. 장비여 ...
답변 1  |  2012.06.18
Q. GFP fusion protein을 만드는데요~
=0.2mM 25도에서 7시간 Induction하여 anion exchange chromatography를 해보았는데요.. pick도 안나오고.gel에서는 band도 안보이고. 너무너무 답답합니다. 정말 어떻게 해야할까요? fusion protein을 만들면 제대로 ...
A.  어떻게 Fraction 을 받으셨는지요? anion exchange chromatography는 gradient 등등의 조건을 매우 잘 셋업하셔야 합니다. ''peak이 안나온다'' 라는 것은 어떤 조건에서 elution 을 했는데 안나온다는 것인지..-.-;; ...
답변 1  |  2006.05.23
Lentivirus를 효율적으로 얻을 수 있는 방법에는 어떤 것이 있나요?
농도도 중요합니다. plasmid DNA의 anion-exchange chromatography 방법의 프렙 키트를 이용하는 것을 권장 드립니다. 어휴 (2016-08-26 10:15) [관련자료 링크] 레트로(렌티)바이러스 벡터에 대한 기본적인 것들이 ...
프로토콜
 |  2016.07.19
Q. isoeletric point 를 실험으로 알 수 있나요?
buffer pH 조건을 바꾸어가며 anion 혹은 cation exchange chromatography를 하여서 분리 조건을 잡아야 하는 것일가요? 사실 이 방법으로 하고는 있는데 쉽게 조건이 잡힐 것 같지 않아 막막하네요. ...
A.  pI를 몰라도 IEX로 기본 조건을 잡을 수 있습니다. 양이온 또는 음이온 교환 컬럼에서 pH5, 7, 9 조건에서 해보세요.. 예를 들어 음이온 컬럼을 사용하고 pH5 이상에서 붙는다면 pI는 3.5~4이하, 5에서 안붙고 ...
답변 1  |  2009.11.05
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ICS2500 | 한국에너지기술연구원 | 2004.01.02
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ICS-5000 | 한국표준과학연구원 | 2011.10.04
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