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실험Q&A    525건 정확도순 날짜순
Q. trizol로 RNA 뽑을 때 cytosol에 있는 RNA도 뽑히는 겁니까?
transient transfection을 하고 있는데 어디선가 total RNA isolation이 chromosome에 있는 RNA를 뽑는거라 transient transfection 후 mRNA로 PCR을 돌리는게 의미가 없다는 말을 들었습니다 알고싶은것은 transient transfection후 ...
A.  트리졸로 뽑으면 당연히 mRNA도 뽑힙니다... 누가 그런 황당한 소리를 했는지 모르겠으나 그분의 요점은 mRNA의 양이 상대적으로 매우 적으므로 실험 결과에 필요한 yield 가 안 될수도 있다는 것 같습니 ...
답변 2  |  2008.03.06
Q. trizol의 원리
trizol을 RNA분리할 때 쓰이는 것으로 알고 있습니다. trizol을 처리하고 chloroform을 처리하고 centrifuge ... 그렇다면 mRNA가 절대적으로 필요한 것 맞죠?? 그런데 Trizol 안의 phenol이 mRNA를 없애지 않나요??? ...
A.  phenol의 pH와 관련이 있습니다. 높은 pH에서 DNA는 수층에 가는반면, 낮은 pH에서는 RNA가 수층에 위치하게 됩니다. phenol은 Chloroform과 물이 있는 경우 chloroform층으로 갑니다. 따라서 수층에 섞일 수 있는 ...
답변 2  |  2009.12.05
Q. trizol 처리시에
trizol 500ul로 긁어서 튜브에 모았고 실수한 sample만 pbs 1ml+ trizol 500ul가 되어버렸네요 ㅜㅜ 불안해서 평소보다 더 많이 열심히 긁었는데 lysis가 잘 되지않았을까 걱정입니다. 내일 실험해보면 결과가 ...
A.  저도 같은 경험을 한적이 있었는데, lysis에 문제는 없었습니다.
답변 1  |  2015.11.18
Q. Trizol을 이용한 RNA prep에서.
가능성이 있다고 써있군요....혹시 그 보다 적은 양의 trizol을 써서 RNA를 깨끗하게 뽑는분 있으신지 궁금합니다 ...
A.  in my case I use 1ml of Trizol for 100 mm dish. It works fine for me.
답변 1  |  2006.03.03
Q. Trizol reagent + chloroform 대신 PCI 로 aqueous RNA?
했는데, 그냥 써도 될까요? ㅠㅠ 질문을 정리하자면, 1ml Trizol + 200ul PCI sol. --> 470ul upper aqueous phase + 500ul isopropanol --> precipitation 해도 될까요? 그냥 chloroform만 넣었을 때랑 비교해서 어떤 점이 ...
A.  모두 phenol 이지만 가장중요한것은 pH 가 크게 다릅니다. Trizol 은 산성, PCI 의 phenol은 중성에 가깝습니다. 즉 산성의 phenol 이 중성의 phenol 과 섞여 pH 가 올라갔을 것이고 그만큼 산성의 phenol에 녹지 않는 ...
답변 1  |  2016.10.02
Q. Trizol을 이용하여 bacteria cell (gram nega)에서 RNA isolation 질문이요!!
O/N. 2. Culture 1mL을 9,000 rpm(12,000 g), 4도, 10분간 centri 후 trizol 1mL에 suspending하여 22.5도에서 5분 incubation. 3. BCP 200uL 첨가하여 15초간 강하게 hand-shaking 후, 22.5도에서 3분 incubation. 4. 12000g, 4도, 15분간 centri 후 50 ...
A.  작은 량의 검체로 DNA, RNA 추출시 pellet이 눈에 안보이는 경우 허다합니다. 눈에 안보여도 그냥 있을 거니 생각하고 시험 진행하시면 됩니다. 추출한 RNA 용도가 뭔지는 모르겠지만, PCR을 할때 대량의 DNA, ...
답변 5  |  2010.03.25
Q. TRIZOL로 RNA 추출하는데 관한 질문이요...
그리고 trizol로 RNA 뽑을때 DNase처리가 필요한가요? trizol manual protocol 보면 DNase 처리하라는 말이 없던데 어떻게 해야 되는지 모르겠어요. 부탁드립니다 ...
A.  하층액 trizol 중간 cell debris+ gDNA 상층액 RNA Trizol에 페놀이 들어있어 처리안함 페놀이 단백질 변성(DNase)] 상층액 회수시 중간층이 딸려 오지 않도록 조심 아까워도 상층액 2/3 에서 3/4 정도만 회수
답변 2  |  2010.10.21
Q. nucleozol 과 trizol의 차이
말씀하신걸들었는데 이것들이 왜 그렇게 되고 nucleozol과 trizol의 차이점을 알고싶습니다 ㅠㅠ 아 그리고 페놀은 rna를 가라앉히려고 사용한 아이소 프로페놀로부터 나온것이 맞을까요? ...
A.  Trizol은 중성 페놀이 주 성분이기 때문에 수용액으로 추출했을 경우 층이 나눠지지만 극미량의 페놀이 수용액에 녹아들어갑니다. 수용액에 녹아들어간 페놀을 제거하기 위해서는 클로로포름으로 1 ~ ...
답변 3  |  2019.05.30
Q. blood RNA 뽑을때 trizol 가능한가요?
혈액에서 RNA 뽑을때 trizol 로 뽑아도 잘 나오나요? blood 는 trizol ls 라고 따른 용액이 있다고 하는데요. 그냥 trizol로는 RNA 가 잘 뽑히지 않는건지 아님 quality 에 문제가 생기는지 궁금합니다.
답변 0  |  2014.08.06
Q. RNA extraction 할 때 사용하는 TRIzol
하는 실험에서 DNA의 양이 너무 많아서 한번 실험할때 3번의 TRIzol을 사용하기 때문에 가격의 압박이 들어와서요 ㅜ ...
A.  그냥 acidic phenol을 사용하세요. phenol을 DW와 섞어서 강하게 mix해주고, 가만히 두면 층이 갈라집니다. 윗 ... 가만히 두면 또 두 층으로 갈립니다. 그러면그 아래층, phenol을 TRIZOL처럼 사용하면 됩니다 ...
답변 2  |  2012.04.26
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