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실험Q&A    691건 정확도순 날짜순
Q. taq polymerase 정제, 그리고 dialysis에 대해서...
무엇인가 잘못된 것인지 모르겠네요 2. dialysis가 끝난 taq은 어느정도 dilution을 해야 activity를 볼 수 있는건가요? 급한건데 이 분야 잘 아시는 분들은 꼭 알려주시면 감사하겠습니다 ...
A.  ul로 사용을 하는데, 실제 활성 unit은 assay를 해봐야 합니다. Taq polymerase 1unit은 30분간 72C에서 10nmol의 dNTP를 사용하여 DNA를 만들어 내는 양입니다 ...
답변 2  |  2008.03.15
Q. taq농도를 증가시켰을 경우
PCR 초보라서.. 이것저것 물어보게 되네요.. taq농도를 2배정도 증가시켰을 경우 buffer와 dNTAP의 농도도 그 만큼 증가시켜야 하나요? 너무 기초적인 질문 인것 같기도 한데, 잘 모르겠습니다.
A.  만약 전체 볼륨을 2배가까이 한다면 그렇게 해야 겠지만요. 나머지 버퍼랑 dNTp는 적정량을 벗어나면 결과에 영향을 미칠것 같네요, 해보진 않았지만^^'''' 그리고 효소를 너무 많이 넣는것도 좋지 않습 ...
답변 2  |  2007.04.13
Q. taq 정제중에 Nucleic acid removal에 관한 protocol 중에서  |  첨부파일 첨부파일
//www.abgene.com/downloads/article-TaqBiphasicExtract.pdf 참고한 논문입니다. The crude cell-free extract was made up to 10% saturated sterile dibasic potassium phosphate (pH 10.3), and mixed well for several seconds. 이말이 정확하게 어떻게 ...
A.  후자입니다.
답변 1  |  2010.07.26
Q. Taq polymerase dilution해서 사용
Taq의 activity 떨어지는건 아닌가 생각이됩니다. 혹시 Taq polymerase를 dilution해서 보관해서 사용하시거나 아니면 다른 방법으로 위와 같은 문제는 해결하는 방법이 있을까요 ...
A.  굳이 dilution해서 보관하시고 싶다면 storage buffer에 하시는게 좋습니다. 보통 tris, edta, glycerol, dtt 등이 들어가는데 정확한 조성은 sheet에 적혀있을것같네요
답변 2  |  2017.12.04
Q. taq efficiency
할 수 없을 것 같습니다. 제 실험 특성상 실험실에서 만든 taq을 대량으로 써야 하거든요. 그래서 이 문제를 해결할 방법이 무엇이 있을지 이렇게 질문을 합니다. PCR condition에서 무엇을 조정을 하면 조금 ...
A.  조절해 보시기 바랍니다....그러나 이미 다 알려진 Taq Polymerase의 특성에 대해서 다시 실험을 해야 한다는 것은 제가 보기에는 ''바퀴를 새로 발명하는'' 일 같아 보이네요. ...
답변 1  |  2006.06.16
Q. Taq polymerase 추천 부탁드립니다.
저희 lab에서는 cloning 용 taq으로는 TaKaRa사의 Ex-Taq을 쓰고 일반 PCR에는 Genet Bio -Ex Prime Taq을 쓰고 있습니다. 다른 실험실에서는 어떠한 Taq을 쓰고 계신지, 적당한 가격의 효율 좋은 taq 추천 부탁드립니다^^
A.  저희는 인트론과 엘피스 둘다 쓰는데요~둘다 만족하고 있습니다.
답변 3  |  2012.12.16
Q. Taq polymerase과 mutation
doubling 때마다 반 정도는 mutation을 한다고 하던데... 제가 Taq으로 증폭시킨 단편을 cloning하고 하나의 transformant를 선별해 stock해 놓았는데요.. 그러면 이게 제가 키울 때마다 mutation을 일으킨다는 ...
A.  PCR product에 mutation된 것이 있다는 예기 입니다.. mutation된 것이 gene의 발현에 특이적인것이 아니면 큰 상관은 없지만... 예를 들어 nucleotide 하나가 바뀌어 단백질이 같은 단백질이 나오는경우 (CGC -> CGA : ...
답변 2  |  2008.07.05
Q. Ex TAKARA taq polymerase 사용 조언 부탁드립니다.
아니면 다른 이유가 있을까요? 2. 설명서에서 TAKARA Ex taq polymerase를 넣을 때 5U/㎕을 0.25㎕ 넣어 주길레 최종 polymerase의 농도를 계산해 보니 0.25㎕/50㎕ *5U해서 0.025U 가 나왔습니다. 1U은 1분당 1 mol의 ...
A.  다카라코리아에서 발간한 PCR백전백승 링크 입니다. https://www.ibric.org/scicafe/read.php?id=3561&Page=1&Board=scicafe000352&FindIt=&FindText= 보시면 도움 될 거에요
답변 2  |  2020.07.23
Q. Taq+Pfu polymerase
-> ligation ~~~~~~ 쭈욱 실험을 진행하면 되는지요? Taq hot start와 Pfu를 비교할 경우에도 Pfu가 훨씬 더 정확한지요..? 그리고 PCR 진행 시 Template의 양이 너무 많으면 PCR이 진행되지 않는 경우가 있다는데 이런 ...
A.  제한효소 부위가 있어야겠죠. 아니면 만들어서 붙이거나. * Taq hot start와 Pfu를 비교할 경우에도 Pfu가 훨씬 더 정확한지요..? -> 네 그렇습니다. hot start 는 정확도를 올리는 것보단 PCR 의 첫 단계에서 ...
답변 2  |  2016.04.15
Q. taq polymerase에 관한 질문입니다
pcr을 이용한 실험논문을 보다보니, ABI사의 gold taq을 많이 사용하던데 이 taq의 장점과 단점은 무엇이 ... mutation typing을 할때 대부분 promega의 go taq을 사용하고 있는데. 이 taq과는 어떻게 다른걸까요 ...
A.  밴드만 보기 위함 입니다. 많이들 사용 하시더라구요 go taq은 잘 모르겠어요 카다록 보먄 그방 나올듯...
답변 2  |  2011.06.14
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