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실험Q&A    3,134건 정확도순 날짜순
Q. SDS-PAGE
SDS-PAGE 를 할때 단백질이 똑바로 내려가지 안네요. 10% separating, 5% stacking gel 임니다. 어떻게 하면 똑바로 내려가게 할수 있을까요?
A.  낮은 volt로 천천히 runing 하세요. 계속 그럼 젤을 사서 쓰세요
답변 4  |  2001.08.31
Q. 고수님들 조언을 부탁드립니다. SDS-PAGE  |  첨부파일 첨부파일
이상하네요. 무엇이 잘못 된건지 잘 모르겠습니다. SDS-PAGE 관련 시약은 전부 다시 만들어서 사용했습니다. 빈 곳은 1x loading buffer를 채웠습니다. 내려가는 모습은 산같이 내려갑니다. 단백질이 있는 ...
A.  사진을 보니 separation은 아주 잘 되었습求? Western을 하시면 좋은 결과가 나올 겁니다. 다만 3번째 lane을 보시면 무지하게 많은 단백질들이 보이는데 양을 줄이세요. 오른 편의 두 lane을 보시면 분리도 잘 ...
답변 2  |  2005.02.08
Q. SDS-PAGE 샘플의 끌림현상의 이유
SDS-PAGE 샘플의 끌림현상의 이유에는 어떤것들이 있나요? 제가 생각할수 있는건 1. 프로테인 양이 너무 많을때 2. 셀 스핀다운이 제대로 안됐을때 3. 너무 빨리 런 했을때 (볼테이지가 너무 높을때) 4. ...
A.  의해 결과는 완전히 다른 모양으로 나올수 있는 것이 SDS-PAGE입니다. 시약의 quality나 buffer의 조성에 따라 영향을 받는 경우도 많지만 대개 90%이상은 샘플의 문제로 생각됩니다. 1. 전기영동 키트의 ...
답변 11  |  2008.06.15
Q. SDS-PAGE과정 중 100℃에서 변성 후 냉각하는 이유
SDS-PAGE 실험 중에 sample과 loading buffer를 섞어서 100℃ 끓는물에서 5분간 변성시킨 뒤 ice에서 5분간 냉각시켜서 전기영동에 사용하였는데요 1. 변성시키는 이유는 제가 찾아본 바로는 SDS가 단백질을 ...
A.  일그러지기도 하구요. 충분히 gel을 굳히는 시간을 두던지, SDS-PAGE 장치에 셋팅하여 Buffer로 충분히 평형화 하던지 하면 없어질 것으로 보입니다 (개인적인 의견 ...
답변 3  |  2011.02.22
Q. SDS-PAGE 후 protein elution 하는 방법??
Tween 20 이나 Triton-x-100 같은 다른 detergent는 안되나요? 3. SDS-PAGE 후 단백질 elution kit 나 방법 등이 있나요? 현재 422 electro-eluter 라는 모듈로 elution을 해보았는데 너무 수득률이 낮아 다른 방법을 찾아보고 ...
A.  젤 뭉개서 집어넣으면 단백질 뽑아주는 일루터 팔아요
답변 2  |  2010.07.26
Q. SDS-PAGE 시료 준비 및 수행시 disulfide bond 형성 가능성?  |  첨부파일 첨부파일
업체 홈페이지에서 따온 standard chromatogram, 최종 단백질 SDS-PAGE 사진입니다. 1은 시료를 non-reducing sample buffer(b-mercaptoethanol이 없습니다)와 섞은 것 2은 시료를 non-reducing sample buffer(b-mercaptoethanol이 ...
A.  비특이적 단백질이라 생각됩니다. 단지 처음 정제할때 같이 딸려나온거 or 약한 결합 벡터나 셀라인 스페시픽하게 패턴이 나오는 경우도 있어요 박테리아 셀에서 컬쳐시 컬쳐를 좀 못하면 (O.D가 높거 ...
답변 18  |  2012.12.16
Q. A-PAGE와 SDS-PAGE의 차이가 궁금합니다.
. A-PAGE보다 SDS-PAGE를 선호하는 이유3. 그럼에도 불구하고 SDS-PAGE가 아닌 A-PAGE가 계속 사용되는 이유 이 3가지를 잘 설명해주세요ㅠㅠㅋ 논문들이나 검색을 해봐도 안 나옵니다 ...
A.  acid PAGE와 SDS-PAGE는 비교대상이 아닙니다. SDS-PAGE는 분자량에 따라 단백질을 분리하는 가장 보편적 ... SDS-PAGE가 acid PAGE를 대체한 것이 아닙니다. 따라서 SDS-PAGE가 2000년대 이후 선호된 것도 아닙니다 ...
답변 2  |  2014.02.03
Q. 단백질 분리 실험에서 SDS-PAGE
2번이나 SDS-PAGE에 보관을 한다고 되어있는데 여기서 SDS-PAGE가 무슨역할을 하는지 모르겠습니다. 알려주시면 정말 감사드리겠습니다. 혹시라도 맨 마지막에 the loading buffer A(10mM phosphate, 1mM EDRA, pH6.5)에 ...
A.  SDS PAGE는 실험 기법의 이름입니다. Sodium Dodecyl Sulfate Poly Acrylamide Gel Electrophoresis의 약자입니다. 한글로 말해보자면 SDS를 첨가한 폴리아크릴아마이드 젤 전기영동 정도면 되겠네요. SDS PAGE의 목적은 단 ...
답변 5  |  2016.09.14
Q. Tricine SDS PAGE...?
궁금해서 올립니다. 1.Tricine SDS PAGE는 우리가 쓰고있는 SDS-PAGE 처럼 단백질을 loading하고 내리는 것처럼 사용하나요.. 2. SDS-PGAE gel전기영동하는 SET에 tricine gel을 만들어 쓸수 있나요... 3. Tricine gel ...
A.   100mM Tricine, 0.1% SDS Anode buffer : 200mM Trisma, pH 8.9 with HCl Gel은 SDS-PAGE와 동일하게 만드시고 윗탱크와 아랫탱크에 각각 buffer를 구분해 부어주신 후 loading하여 달리면 됩니다. 하지만 그리 잘 되는 방법은 ...
답변 4  |  2004.06.05
Q. sds-page 에서 well에서 로딩한 뒤 sample 이 내려가지 않아요ㅠ
30분 안쪽으로 굳었구요 ) 이렇게 gel을 2장 만들었구요 SDS-PAGE 카세트에 gel 을 끼운다음 SDS 탱크와 연결하고 running buffer를 카세트 안쪽부터 채웠습니다. 이때 탱크 가득 buffer를 채웠습니다. 10X running ...
A.  1. 잘 안굳는 다면 대부분 Aps 문제입니다. Aps를 fresh하게 만들어서 사용해보세요 3. 전류가 반대로 걸렸나 보네요. 샘플이 아래로 내려가지 않고 퍼졌다는건 양극과 음극을 반대로 걸어줘서 그랬을 확 ...
답변 4  |  2015.09.22
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