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실험Q&A    2,061건 정확도순 날짜순
Q. SDS-PAGE
SDS-PAGE 를 할때 단백질이 똑바로 내려가지 안네요. 10% separating, 5% stacking gel 임니다. 어떻게 하면 똑바로 내려가게 할수 있을까요?
A.  낮은 volt로 천천히 runing 하세요. 계속 그럼 젤을 사서 쓰세요
답변 4  |  2001.08.31
Q. 고수님들 조언을 부탁드립니다. SDS-PAGE  |  첨부파일 첨부파일
이상하네요. 무엇이 잘못 된건지 잘 모르겠습니다. SDS-PAGE 관련 시약은 전부 다시 만들어서 사용했습니다. 빈 곳은 1x loading buffer를 채웠습니다. 내려가는 모습은 산같이 내려갑니다. 단백질이 있는 ...
A.  사진을 보니 separation은 아주 잘 되었습求? Western을 하시면 좋은 결과가 나올 겁니다. 다만 3번째 lane을 보시면 무지하게 많은 단백질들이 보이는데 양을 줄이세요. 오른 편의 두 lane을 보시면 분리도 잘 ...
답변 2  |  2005.02.08
Q. SDS-PAGE gel 만들 때..
SDS-PAGE gel를 만들 때, upper gel comb를 넣고 만들잖아요. 예전엔 안 그랬는데, 요즘에 만들면 맨마지막 well은 잘 안 만들어져요. sol이 옆으로 새서 그런것 같기도 하고요. 아니면 물이 증발해서 날라간것 ...
A.  Gel이 굳을 때 물이 빠져나옵니다. 이를 고려하여 좀더 넉넉히 gel solution을 부어주세요.
답변 1  |  2006.04.11
Q. SDS-PAGE 및 zymogram에 대해 질문드립니다.
맞는 것인가요? 명백히 정확한 단백질 size가 아닐텐데... SDS-PAGE를 기본으로 한 zymogram 결과로부터 알 수 있는 정보는 어디까지인지 궁금합니다 ...
A.  시료를 끓였을 때랑 끓이지 않았을 때랑 단백질에 무슨 일이 일어나는지 생각해 보세요. 그리고, 단백질이 monomer 인 것이랑 dimer 또는 multimer 일 때 어떤 변화가 생길지.. zymogram 의 목적이 뭔지 아시죠? ...
답변 1  |  2016.05.20
Q. SDS-PAGE 질문 있습니다.
정제하여 SDS-PAGE에서 확인을 위해 running을 해보았습니다. 그런데.. stacking gel에서 running gel로 sample이 넘어 가질 않네요...;;;; Marker도 stacking gel에서 안내려 가고 있습니다. ;;; acrilamide 만들때 은박지로 ...
A.  Acryalmide stock이 맛이 간 경우, 전기영동속도는 무지 느려지지만, 전혀 이동을 하지 않는 것은 아닙니다. 뭔가 사용하신 buffer들에 문제가 있는듯 합니다.
답변 1  |  2009.11.19
Q. SDS PAGE질문입니다
sds page를 할려고합니다 근데 샘플을 loading buffer와 mix한 후 100도에서 5분간 열처리 하고나니 샘플이 굳어잇던데 원인을 아시는분 있으신지요?
A.  샘플이 조직에서 얻은 것이라면 결합조직에 존재하는 collagen등의 polymer 단백질들이 많을 수 있습니다. 열을 가했다가 식히면 gelling이 되는 것들입니다. sample buffer에 비해 너무 많은 단백질을 넣으면 ...
답변 1  |  2013.01.15
Q. SDS-PAGE 샘플문제
샘플에 기름기가 많아서 깨끗하게 분리가 안되네요.. 지금 샘플버퍼로 섞어 놨는데요 해결방법좀 알려주세요
답변 0  |  2008.01.10
Q. SDS-PAGE 에서 protein을 extraction 하려고 하는데요
제가 PAGE gel에서 protein을 exxtraction 하고자 하는 목적은 MALDI-TOF-MS 분석을 하기 위해서 입니다. 검색을 통해서 찾아보니 그냥 diffusion 방법을 쿠마시 염색을 해도 된다 안된다 여러가지 의견이 있던데 쿠 ...
A.  얼마전에 dialysis kit를 찾다가 본건데, geba flex tube라고.. 암튼.. 그 kit에서는 stain한 gel을 가지고 extraction하더라고요.. kit한번 알아보시고 어떻게 했는지 알면 하실수 있을거같네요..
답변 2  |  2008.08.20
Q. SDS-PAGE 결과 분석 좀 봐주세요  |  첨부파일 첨부파일
1KDa에 해당하는 단백질을 SDS-PAGE를 걸어서 확인을 하였습니다. 그런데, one-band만 떠야 하는데 제 눈에는 two band로 보이는데..이걸 원밴드로 봐야 하는지,,smear된걸로 봐야 하는지 해석 좀 해주세요. ...
A.  Gel을 만들 때 천천히 굳히고. 전기영동 속도도 조금 천천히 해 보세요.. single band로 보이네요..
답변 3  |  2008.10.24
Q. SDS PAGE gel
12% SDS PAGE gel에서 band로 확인 할 수 있는 최소 단백농도는 어느 정도 입니까 ?
A.  아시다시피 Acrylamide 농도에 따라 Page-gel 농도가 결정 돼는 것이고요 단백질 분자량에 따라 gel % 가 졀정 돼는 것이지 % dependent 하게 농도로 결정 돼지는 않습니다. Clone 에서 Plasmid에서 보고자 하는 발현 ...
답변 2  |  2009.06.17
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