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실험Q&A    366건 정확도순 날짜순
Q. RBC lysing buffer 관련 질문입니다
주세요...ㅠ.ㅠ 보통 실험하는 것은 암 환자의 혈액에서 RBC를 제외한 MNC(mononuclear cell) 분리 입니다.. 아...자꾸 세포가 죽어나서 미치겠네요... ------------------------------------------------------------------------------ ...
A.  저같은 경우는 0.165M NH4Cl 만 사용합니다. 물론 만든후에 필터를 하고 sterlized condition을 유지하구요. Spleen에서 RBC를 lysis하는데 전혀 문제없이 사용중입니다.
답변 2  |  2009.05.12
Q. RBC lysis method
세포 내에 존재하는 RBC를 제거하려고 합니다.. 저는 피콜로 이용하여 분리를 하였는데.. 분리층에 ... 편했는데. 이 버퍼 사용 시 particle의 문제 어케하나요? RBC 제거 후 다시 피콜을 사용해야하나요 ...
A.  직전까지도 아주 잘 흔들어주어야 분리가 잘 됩니다....RBC lysis buffer는 FACS등의 기계를 이용하여 실험할때 사용합니다. 살아있는 cell에 좀 안좋을듯 하네요...(잘은 모르지만)PBS를 많이 넣어주고 많이 ...
답변 2  |  2006.01.18
Q. RBC 제거에 대해서 궁금합니다..
. RBC를 제거하고 나면 pellet은 완전한 흰색인가요? 제가 처음이라 RBC가 제거 된건지 아닌지 잘 모르겠네요.. 답변 부탁드립니다. ...
A.   제대로 제거되면 pellet이 완전한 하얀색이 됩니다. 물론 RBC가 완전히 제거되지는 않을 수 있습니다. 버퍼를 한번 더 처리하시는 것도 효과가 있을 겁니다. 신선한 blood사용시에 더 좋은 결과를 얻을 수 ...
답변 1  |  2005.08.28
Q. RBC 제거
primary culture후 세포 counting을 할때 RBC 와 세포가 구분이 가질 않습니다. RBC lysis buffer도 사용해 봤는데..세포에 damage 가 있는거 같아서요 RBC도 깨끗하게 없어지지도 않구. 좋은 방법 있으시면 도와주세요~
A.  RBC는 세포배양중에 자연스럽게 제거가 됩니다. 2-3일정도 지나면요 근데 프라이머리 컬쳐하면 님께서 말 ... 적출하세요. 도움되시길 빌겠습니다. 제일 중요한것은 RBC 혼입보다 박테리아 오염이죠. ...
답변 3  |  2005.12.23
Q. RBC 제거
rat에서 primary cell을 추출하여 사용하고 있습니다 이때 RBC를 제거하기 위해 모아진 펠렛에 소량을 물을 넣 ... 거의 대부분이 뭉쳐져서 풀어지질 않았어요 ㅜ ㅜ RBC lysis buffer 를 사야만 하는 걸까요 ...
A.  RBC lysis buffer를 넣고서 RBC를 제거한 뒤에 배지에 옮기시는게 아닌가요?? RBC lysis buffer는 굳이 사지 않아도 만들어쓰면 되는데 말이죠;;;
답변 2  |  2008.07.04
Q. RBC lysis buffer 의 원리
RBC lysis 버퍼가 저장액이라 상대적으로 삼투압에 민감한 적혈구를 터트려서 죽이는정도로 ... lymphocyte에 적게 영향을 미친다고 그러는데 또한 핵이 있는 RBC는 안 깨트린다는데 원리가 뭘까요?????? ...
A.   2. 말씀하신 ammonium chloride로 구성된 buffer인데요. 이건 RBC를 제거한 후 cell function 실험들에 사용하기에 적합한 거라고 생각하시면 될거 같습니다. 물론 FACS용으로 사용해도 무방합니다 ...
답변 1  |  2006.10.23
Q. RBC lysis buffer
. filter하니깐.. 그나마 투명해지던데요.. 원래 그런건가요?? RBC lysis buffer조성은... NH4CL 8.29g KHCO3 1g Na2EDTA 37.2g 하고 물 200ml해서 5X 만들었는데요.. ...
A.  추운날에 salt 결정 때문에 그렇게 된거에요 실온도 요즘은 추워서 뿌옇게 되여 37도씨 인큐베이터에 넣으면 되요 .
답변 3  |  2009.12.29
Q. MTT assay 로 RBC를 보려면....
MTT assay법으로 RBC를 측정하고 붉은색은 control로 보정계산하면 가능한건가요..?? RBC를 본 paper를 찾아보고 있던 중에... 여쭤봅니다...
A.  assay로 해보세요. 조작도 간단하고 좋습니다. 0.8% RBC suspension을 만들어서 원하는 chemical을 가하고 37도에서 배양한 다음 상층액의 흡광도를 보는 것입니다. ELISA로 측정하시면 되고 확실한 방법은 논문을 ...
답변 2  |  2010.01.31
Q. RBC를 제거하는 이유
안녕하세요. 혈액에서 DNA,RNA를 추출하는 경우 RBC lysis buffer를 사용하는데 RBC를 제거해야 하는이유가 있나요? 찾아보다 궁금하여 질문드려요...
A.  때 있으나마나 라는 이야기 이구요. 그러므로 필요없는 RBC가 터져서 나온 단백질 등등 물질이 이 후 반응에 영향을 줄 수 있고 하므로 Lysis 를 하고 핵이 있는 혈구세포들 만으로 시작하는 것이 ...
답변 2  |  2016.08.29
Q. RBC lysis buffer
어디서 구입하여 사용하시나요? 혹시 Sigma Aldrich 외에 RBC lysis buffer를 좀더 쉽게 구할 수 있는 곳이 없을지 궁금해서요. 만들어 쓰기도 당장의 chemical들을 보유하고 있지 않아서요 ㅠㅠㅠㅠ 아시는 ...
A.  할때라면 증류수 조금에 10초 정도 반응후 10x PBS를 넣으면 RBC 다깨집니다, 급하시면 이렇게 하셔도 무관합니다. ACK buffer는 lymphocyte에 데미지를 잘 안준다고 한다지만 아무래도 cell 데미지를 줘서 희석을 ...
답변 1  |  2015.05.26
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