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실험Q&A    2,429건 정확도순 날짜순
Q. plasmid상의 gene 제거 방법
가능한 툴에 대한 조언 부탁드립니다. 현재 제가 다루는 plasmid가 50kb에서 250kb정도의 크기 입니다. 선배님들의 답변 부탁드립니다 ...
A.  사용하는 plasmid의 map은 알고계시나요? 알고 계시면 제한효소를 사용하여 유전자 deletion을 한번 검토해 보시고 또 다른 방법으로는 S1 nuclease deletion이 가능한지 유전자 서열을 검토해 보시기 바랍니다.
답변 3  |  2010.12.09
Q. plasmid 보관에 대해서
plsmid를 한국에서 캐나다로 보내려고 하는데 드라이아이스 없이 그냥 간단하게 보내려고 하는데 동결건조나 에탄올 침전등을 하려고 합니다. 이렇게 해도 이상이 없는지 궁금하고.. 그냥 아무처리한 ...
A.  에탄올 침전하여 pellet상태로 그냥 보내시면 됩니다.
답변 2  |  2004.10.23
Q. pUBC2 라는 plasmid를 이용하려고 합니다..
plasmid를 이용해서 클로닝하라고 말씀하셨는데요... 웹에 이 plasmid에 대한 정보를 찾을 수가 없네요...ㅠㅠ 혹시 사용해 보신 분이나 map, sequence, host 등의 정보를 아시는분이계시면 함께 공유해 주셨으면 ...
답변 0  |  2007.07.21
Q. plasmid
다른 데서 A라는 molecule을 넣은 GFP를 받았는데요. human을 원했는데 mouse를 주셨더라구요.. human과 mouse사이에 8%정도의 차이가 있는데 human cell에transfection해도 되나요? 그냥 생각엔 안될거같은데 혹시나 ...
A.  이왕이면 human protein을 human cell에서 expression 시키느 것이 좋은데요.. 단순 localization이라면 그냥 하셔도 무방할거 같습니다..
답변 2  |  2009.08.07
Q. plasmid prep 시 RNA 제거 어떻게 하나요
prep으로 plasmid를 뽑았는데 RNA가 훨씬 많이 뽑힌 것 같아요-.-;; 이럴경우 RNA만 제거하는 방법이 없을까요.. nano drop으로 농도를 재면 엄청 많이 나오는데 gel로 확인이 잘 안되서 RNA라고 생각됩니다 그리고 ...
A.  sol 1에 RNase A 안 넣으시는지? kit도 P1에 RNase 넣어 사용합니다.
답변 4  |  2010.07.14
Q. mega-plasmid isolation
확인하기가 어렵네요 250kb정도의 plasmid인데 혹시 이정도의 plasmid를 gel상에서 탐침해 보시거나 prep.해보시 선배님들 제가 참고로 할수 있는 논문이라던가 protocol을 부탁드립니다 ...
A.  강시님 감사합니다. 말씀해주신 방법으로 한번 해보겠습니다.
답변 2  |  2010.06.15
Q. plasmid DNA by alkaline lysis method  |  첨부파일 첨부파일
open circular plasmid DNA라 생각됩니다만....... 깨끗하게 supercoiled plasmid DNA만 분리하려 합니다. 제가 무슨 방법을 잘못해서 이런 결과가 나왔는지 아시는 고수님들 답변 꼭좀 부탁드립니다.. ...
A.  첨부파일 추가
답변 7  |  2006.06.06
Q. plasmid DNA 전기영동 실험 도와주세요ㅜㅜ  |  첨부파일 첨부파일
다 처리한 lane에는 맨 위쪽은 역시 잘리지 않은 재조합된 plasmid DNA-대략 8kb, 그 아래는 효소에 의해 잘린 DNA-대략 5~6kb, 맨 아래 희미하게 보이는 band는 insert DNA-대략 2kb라고 생각했습니다 그리고 XbaI만 ...
A.  낮고, DNA ladder의 각 band size가 확인이 안 되긴 합니다만, plasmid DNA를 그냥 달리면 보통 2개 band가 보이는데요, 그건 별로 안 중요합니다. EcoRI과 XbaI으로 single cut 했을 때, DNA가 모두 digestion 됐다면 single ...
답변 3  |  2013.05.17
Q. plasmid prep 후..
나와서요..아님 chromosomal DNA가 잘려서 섞인것일까요? 3. plasmid 추출후 linear DNA가 나올 수 있는이유와 제한효소처리(3곳을 인식하는 제한효소)후 나와야 할 위치외에 더 많은 곳에서 밴드가 나오게 된다면 ...
A.  또 각각 dimer, trimer 등 multimer등으로 존재할 수도 있습니다. plasmid DNA가 여러형태로 나오는 것은 cell의 상태나 vector의 origin등에서 원인을 찾을 수 있지만 gDNA가 오염되는 것은 prep방법상의 문제일 ...
답변 1  |  2003.12.29
Plasmid DNA를 대량 정제할 때 효율을 높일 수 있는 방법은 무엇일까요?
washing step을 2번 반복한 뒤 vacuum 상태에서 건조하면 순수한 plasmid DNA pellet을 얻을 수 있습니다. 대학원생 (2015-05-14 14:47) [나만의 노하우] 노하우라고 하기는 좀 그렇지만^^ 저는 마지막 과정에서 ...
프로토콜
 |  2015.05.06
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MCO-20AIC | 조선대학교 산학협력단 | 2003.12.30
분주기(Multi-channel automation)
Biomek 3000 | 국립수산과학원 | 2010.07.19
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