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실험Q&A    602건 정확도순 날짜순
Q. pi staining (FACS)
FACS로 pi staining과 hoechst staining하여 viability를 확인하려 합니다 cell cycle이나 apoptosys는 관심없고 단순히 죽은세포/전체세포를 확인하고자 합니다. viability확인시 세포를 EtOH로 고정하면 모두 죽은걸로 ...
A.  고정을 한 후, FACS로 찍으면 200피크 앞.. 즉 G0/G1앞쪽에 뜨는 subG1 피크가 apoptosis(죽은 cell) 를 나타내 주는 것입니다. 그것을 확인하면 되는것 아닌가요??
답변 2  |  2013.05.09
Q. pi staining을 하려는데 정보가 하나두 없어요
pi staining을 하려는데 정보가 하나두 없어요. 논문에도 자세하게 나와있지 않고 조금씩 다르고 혹시 프로토콜을 얻을수 있을까요?? 참고해서 새로 셋업해야할듯해서요..^^
A.  정보가 없다는 말씀은 그만큼 절실하게 찾아보지 않았다는 말씀으로 들리네요. 구글만 쳐보셔도 아주 자세한 프로토콜들이 넘칩니다.
답변 3  |  2006.09.06
Q. pi staing시 에탄올 처리 안할경우
알수록 더 어려워지네요~ㅋ pi staining 어느정도 이해가 마니 됬구요~~^^ 실험은 혹시나 해서 EtOH처리 경우와 비처리 경우로 나누어서 실험을 수행해 봤습니다. EtOH 처리 경우는 생각했던데로 ...
답변 0  |  2006.09.21
Q. pi staining protocol과 분석에 대해 궁금합니다.
00rpm 10min cetrifuge) 5. RNase 10ug/ml 처리후 epp tube 두개로 나눔 6. PI stain 3uM & not stain. RT 15min incubation. 7. FACs analyse 이상인데요... 제일 궁금한것은 처음에 꼭 70% EtOH 처리를 해줘야 하는가? 입니다. FACs를 ...
A.  우선 왜 실험을 하려고 하시는지 목적이 분명치 않으신 것 같네요. 보통 PI로 염색을 하고 FACS로 ... 70% EtOH를 처리하는 것은 고정과 permeablization해주기 위해서 PI에서 꼭 해줘야 합니다. 그럼 이만. ...
답변 5  |  2006.09.12
Q. pi staining 시 cell counting하나요?
pi staining할때 cell counting해서 cell 갯수 맞춰주고 하나여? 만약에 안하면 그래프자체가 시프트 되서 보일수가 있나요?? 예전에 했을때는 거의 같은위치에 나왔는데.. 요즘에는 그래프마다 위치가 약간씩 ...
답변 0  |  2006.10.09
Q. 일반 전기영동 장치에서 단백질의 pI 잴 수 있다던데요...
알아보니... 1. 일반적인 전기영동 장치에서 단백질들의 pI를 잴 수 있다고 하더군요. 정말인가요? GE healthcare에 전화해 보니 Ampholine이라는 제품으로 이렇게 할 수 있다고 하던데... 혹시 해보신 분 ...
A.  것입니다. 또한 band 모양도 그리 이쁜 편은 아니기 때문에 pI 근사치를 구하는 것에 만족해야 한다는 것입니다 ...
답변 2  |  2006.11.23
Q. PI3 kinase assay 관련 질문입니다.
처음으로 PI3 kinase assay에 관한 실험을 하게 되었는데요.. 여기저기 프로토콜을 찾아봐도 신통치가 않네요.. 혹시 PI3 kinase assay 하시는 분 계시면 도움을 좀 얻고 싶은데요.. protocol이나 괜찮은 사이트 ...
A.  PI3-K ELISA (Echelon BioSciences) & 그리고 upstate 홈페이지에도 전형적인 kinases assay for PI3K 프로토콜 있습니다.
답변 1  |  2007.02.12
Q. pi staining 찍을때... FL2로도 찍나요??  |  첨부파일 첨부파일
전 여태까지 FL3로 하는 것으로 알구있어서.. FL3로 찍구 있었는데... FL2로 찍은 논문이 있어서.. 궁금증이 생겨버리네요,,, FL2로 찍어두 큰 문제가 없나요''? 오히려 더 잘나오나요? 논문 첨부할께요~~^^
A.  PI가 원래 FL2와 FL3에서 같이 뜹니다. 그러므로 combination하는 다른 형광에 따라 FL2혹은 FL3를 골라 쓰시면 됩니다.
답변 1  |  2006.10.18
Q. pi staining 급질이요...  |  첨부파일 첨부파일
이제서야 FACS를 다뤄보는 터라 많이 부족한 학생입니다... cell cycle analysis를 해보았는데요... CEN, CTN QC particle을 통해서 나름 보정도 마쳤습니다... HEK293 cell을 가지고 했는데 첨부한 그림에서 보시면 아 ...
A.  어던 FACS 기계와 sw인지 몰라 정확히는 말씀 드리기 힘드나 CEN, CTN QC particle 보정한것 이 위의 두 그래프인지.. 그래프에 점으로 나온 모든 cell을 다 분석하여 나타낸것이 아래 그래프인가요? 그렇다면 ...
답변 1  |  2009.01.07
Q. PI staining시 어떤 제품인지...
PI for fluorescence (70335) PI solution for fluorescence (81845) PI 95~98% (p4170) PI solution (p4864) 아시는분 계시면 좀 알려주세요...^^ ...
답변 0  |  2006.11.29
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모델명 없음 | 충남대학교 | 2007.07.12
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