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| Q. Northern blot에 대해.. |
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Northern blot을 하고자 하는 학생입니다..
그런데..RI를 사용하지 않고 실험을 하고자 합니다..
혹 사용하시거나.. 괜찮다고 생각하시는 회사제품이 있으면.. 추천바랍니다..
아.. 그리고 ECL로 실험을 ... |
| A. Radioacive를 사용하지 않고는 northern을 잘하기가 힘들것 같군요..
Dig도 한번 사용해본적이 있는데 별로 인것 같더군요. |
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답변 2 | 2003.09.26 |
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| Q. northern probe 에 대해서.. |
| northern probe에 대해서 질문입니다.
RNA 수준을 확인하는데, PCR product를 사용하죠?
RNA probe를 사용해야하는거 아닌가요?
어떤 원리가 있을 것 같은데요...
또 sense RNA는 안되겠죠?
장마철에 건강조심들 ... |
| A. 좋을듯합니다.
제가 진행한 실험들의 경우 PCR product 로 northern 했을때 이상한 band가 나오는 경우가 종종 있더라구요~ ... |
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답변 2 | 2004.06.08 |
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| Q. Northern Blot 잘 안되네요.. |
| 더 적게 넣으면 문제가 되나요?
4. RNA denature 가 잘 안되도 northern에 문제가 되나요?
5. formaldehyde agarose gel를 이 너무 약하던데요, 그냥 agarose gel 쓰면 안될까요?
답변 꼭 꼭 부탁드립니다.
꼭 도와 주세요 ... |
| A. 따르시고 좀 익숙해 지시면 간단한 방법을 찾아보세요.
Northern이 어려운 것은 RNA가 너무 쉽게 깨져나간다는데 있습니다 ... |
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답변 1 | 2004.03.09 |
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| Q. northern blot (DIG) size marker |
| 되었습니다.
아직 실험은 시작하지 않았고
이제 Roche northern starter kit 주문하고 필요한 시약 주문해 놓은 상태입니다.
다른 것들은 대부분 다 준비가 되어 가는거 같은데 하나 문제가
marker를 무얼 ... |
| A. 구입하시는게 좋을 듯 합니다.
저도 DIG을 이용해서 Northern 해봤는데..
Roche에서 나오는 size marker 썼습니다.
이건 나중에 Ab 붙이고 chemi로 찍으면
Marker도 같이 나와서 size 대조가 쉬워요...
그리고 2ul/lane ... |
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답변 2 | 2007.12.24 |
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| Q. Northern Blot kit 질문 |
| Northern Blot kit 제품 추천좀 받을 수 있을까요?
DIG로 하려고 하는데..
게시판 성격에 맞는 질문인지 모르겠는데 아니라면 죄송합니다. |
| A. 구글에서 'northern blot kit DIG' 으로 검색을 해보니
ROCHE 제품이 뜨네요. |
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답변 2 | 2013.03.15 |
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| Q. methylene blue sol (Northern blot) |
| northern membrane 염색하는 methylene blue solution 만드는 법 알려주십시오.
제가 알기로는 0.04% in 0.5M sodium acetate (ph5.2)인데,
궁금한 것은 sodium acetate 만들때도 DEPC water로 만들어야 할까요?
답변 부탁드립니다. ... |
| A. 그냥 증류수를 사용하셔도 무관합니다.
RNA가 membrane에 transfer된 후에는 깨져도 큰 상관이 없습니다. 오히려 transfer효율이나 hybridization 효율을 높이기 위해 일부러 깨기도 합니다.
DEPC는 RNA를 녹이는 물 ... |
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답변 1 | 2006.01.17 |
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| Q. northern transfer에서. |
| 궁금합니다.
northern할때 transfer하고나서 gel을 UV에 비춰보면 marker가 보이나요?
transfer가 안된건지... 아니면 원래 transfer가 잘 안되어서 보이는건지... 궁금합니다...
만약 보이는게 아니라면 어떤 방법 ... |
| A. gel을 UV에 비췄을때 marker가 안 보여야 transfer가 완전히 되었다고
볼수있죠. |
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답변 1 | 2003.06.09 |
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| Q. northern background 줄이는 방법 좀... |
| 어렵게 northern blot을 처음 배워서 했습니다.
원하는 밴드는 정확이 나왔습니다만....
background가 문제입니다.
unspecific band도 있고 검게 나오기도 하고요....
좀 깨끗하게 나오는 방법이 없나요?
hybridization ... |
| A. Hybridization이나 wash를 할때 좀 심하게 흔들어 주세요.
Spot으로 나오는 background는 probe를 넣을 때 농축 probe가 membrane표면에 과도하게 닿아서 생기는 현상이 많습니다. 전반적으로 검게 나오는 것은 probe의 ... |
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답변 2 | 2004.05.03 |
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| Q. northern 할때 membrane transfer가 끝나면 안전한가요?? |
| northern 할때 membrane transfer가 끝나면 안전한가요??
transfer한 membranse을 autoclave도 되지 않은 D.W.로 희석한 SSC를 가지고 WASH했는데.. 괜찮을까 모르겠습니다.
언제부터가 안전한지....
아시는분은 가르쳐주세요.. |
| A. Membrane에 일단 붙으면 그다음은 안전합니다. 하지만 실험은 항상 조심해야죠. |
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답변 2 | 2004.05.02 |
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| Q. northern blot 질문 드립니다.. |
| 지금 DIG을 이용해서 노던 실험을 하고 있습니다.
그런데 실험 결과가 가끔 일정하게 나올질 않아서 걱정입니다.
어디가 문제인지 테스트를 하고는 있지만 답이 명확하지 않네요.
노던을 할때 RNA의 상 ... |
| A.
저도 DIG을 이용해 고생만하다 표기한 적이 있습니다. Northern이라면 눈을 감고도 할 정도였지만, 포닥시절에 이를 세팅한다고 설치다가 6개월을 날려먹은 이후론 누구에게나 비추하는 방법입니다. 물론 ... |
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답변 1 | 2008.10.10 |
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