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실험Q&A    12건 정확도순 날짜순
Q. LR reaction (gateway) 후 sequencing problem
LR reaction을 통해서 expression ... pDS_GFP_XB를 이용하여 LR reaction 후 sequencing을 진행하였는데 sequencing 결과를 보면 pDS_XB_GFP C-terminal vector에 대한 결과가 나옵니다... pDS_GFP_XB를 sequencing을 통해서 확인을 하고 ...
답변 0  |  2016.01.28
Q. LR reaction 사이즈
ccdB, Cm, Spec, Size 13,000) LR reaction 반응후에 (destination vector ... 하나 이렇게 뜨는데요 LR reaction 이 잘못됐다면 13,000에 뜨지 않아야 되는데 13,000에 밴드가 뜨는것도 이상하고 entry vector 사이트에 뜨는것도 ...
A.  제한효소 등등으로 확인된 entry 클론을 destination vector에 LR 반응해서 E.coli 형질전환을 하고, 콜로니를 얻어 키운 후 제한효소로 자른 거 맞지요? - LR 반응하여 얻은 클론을 여러 개 잘라 보신거죠? LR ...
답변 2  |  2010.09.24
Q. LR reaction 에 대한 질문입니다!
발현을 보려고 합니다. LR reaction 하고 Transfomation까지 해서 콜로니 형성됨이 확인되었습니다. 여기서 Insert 확인을 할때 콜로니 PCR해서 확인해야 하는지, 엔자임 처리를 해서 확인해야 하는지 ...
A.  벡터와 유전자 모두를 방향성있게 확인하는 것이 좋습니다. pEarlygate100 시리즈라면 형광 퓨전이죠? 유전자 내부에 C말단 방향으로 forward 프라이머를 하나 만들고. 벡터에 들어있는 형광 유전자의 N말단 ...
답변 3  |  2014.09.15
Q. LR reaction 제발 알려주세요ㅠㅠㅠ
굳이 LR reaction을 사용하는 이유가 뭔가요? 제한효소 처리 하면 안되나요??
A.  저는 제한효소를 이용한 라이게이션만 하고 있는데, 지금까지 문제없이 되고 있습니다.
답변 2  |  2019.12.12
Q. LR reaction 한후 seqeuncing을 했더니..
LR reaction, transformation해서 얻은 콜로니를 prep해서 seqeuncing 했습니다. destination vector의 앞부분에 CaMV promoter가 있어서 그걸로 앞부분 읽고, Insert 중간 부분 primer 제작해서 읽었는데 그 뒷부분은 읽히고 ...
답변 0  |  2014.10.31
Q. multisite gateway(LR reaction)
요즘 multisite gateway system을 사용하여 LR reaction을 진행중에 있습니다. 제가 진행하는 LR은 L4와 R4/ L1과 R1/ L2와 R2를 반응시켜 2개의 construct를 한 destination vector에 넣는 것 입니다. upload_image ' 이런식으로 ...
답변 0  |  2020.01.14
Q. bp lr reaction 후 바로 트랜스포메이션이 필수 인가요?
영문 변환이 안됩니다. 이해 부탁드립니다. 개인적 실험 일정에 의해서 비피 엘알 리액션 후에, 그 다음날 트랜스포메이션을 하고자 하는데. 경험이 없어서 이것이 괜찮은지 아닌지 모르겠네요. 보통 ...
A.  냉동보관해도 됩니다.
답변 1  |  2015.04.24
Q. LR recombination 왜이렇게 안될까요..
요즘 LR recombination 실험을 하는데요 ... 4ul, enzyme 2ul, 5xbuffer 2ul : total 10ul reaction) 25도씨 overnight 반흥 후 proteinase ... 있는지 지적 부탁드려요 LR 고수분들 답변 기다립니다 ...
A.  가능성이 있습니다. 제 후배가 저랑 같이 동시에 LR reaction을 진행했는데 저는 제대로 TE를 썼고 후배는 실수로 DW를 사용했습니다. 제 plate에는 수백개의 콜로니가 떴지만 후배는 겨우 십여개의 ...
답변 8  |  2014.07.22
Q. 너무나 궁금합니다. 답변 꼭꼭~~!! 부탁드려요.>_<
좌절하고 있습니다.ㅠ LR reaction을 통해 cloning한 pDEST32 ... colony가 형성되어서 LR reaction을 통해 올바르게 cloning된 colony라고 판단하였습니다. (LR reaction이 일어나지 않은 pDEST32 vector가 insert된 E.coli의 ...
A.  불용성 침전이 형성됨. 이게 흰 침전임. 4. 혹시 enzyme reaction할때 plasmid가 사라질 수 있는가 -> 제가 했던 실수가 하나 있긴 합니다. 두 종류의 enzyme을 사용했구요(speⅠ, EcoRⅠ) 각각의 enzyme에 사용되는 ...
답변 1  |  2009.03.07
Q. cDNA library에서 DNA size fraction 방법
stainging 하게 되면 뒤에 있을 BP reaction, LR reaction에 영향을 주는 것일까요?? (3) Column을 이용해서 cDNA를 Size freaction할 수 있는 kit 혹시 추천해 주실 것이 있나요??(<3kb, 3~5kb, 5~7kb, >7kb로 size fraction할 ...
답변 0  |  2009.03.10
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