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실험Q&A    1,926건 정확도순 날짜순
Q. T-vector와 insert의 size가 같은 경우 cloning어떻게 해요..
vector에 cloning을 했는데 제 insert가 3kb인데요 T-vector도 3kb size더라구요-- 어거 어쩐지 enzyme cut을 해주면 one band가 나와서... 고민 잠깐 했는데.. 어떻게 ...
A.  vector중간에 있는 enzyme도 함께 reaction해주면 insert 3kbp에 뜰테고 글구 아래쪽에 vector가 쪼개져서 밴드 나올테죠... 간단하게 말해서 벡터를 쪼개서 ...
답변 3  |  2008.01.11
Q. insert와 vector의 크기가 비슷한 경우의 cloning
하다보니 밴드가 겹치는 건 아니었는데 insert를 자르려다 보니 밑의 vector에 해당하는 밴드도 약간 자르게 되더라구요. 다행히 purify 결과물을 ...
A.  insert 위치에 분자량이 비슷한 DNA는 사라집니다. insert를 elution하기에 편합니다 ...
답변 3  |  2010.02.11
Q. cloning완성후 초반에 계획했던 insert size와 sequencing 결과 size가 다릅니다...
99%로 일치하였습니다. 근데 문제는... insert size가 제가 처음에 계획했던 1182bp가 아니라 1056bp라는 것입니다. 보니까 끝부분에 약 100bp가 없는 것으로 ...
A.  A novel isoform? A novel deletion mutant? Just simple cloning error? All up to you. Something new, then a good science. Something wrong, then just a happening.
답변 1  |  2012.08.08
Q. insert 확인이 pcr로는 되는데 제한효소로는 안보여요ㅜㅜ
pcr 결과가 더 믿을만한 걸까요? insert들어간거라고 믿고 발현시켜볼까요? 빨리 실험은 마무리 져야 하는데 섣불리 생각해서는 하루~ 이틀을 그냥 ...
A.  가짜인 것 같습니다. 보통 colony-PCR할 경우 insert가 제대로 들어갔다면 PCR product가 소위 떡밴드로 나옵니다. 약하게 나온 경우, 큰 기대하지 않는 것이 ...
답변 3  |  2008.01.14
Q. insert가 없어용ㅠㅠ
문제 인가요???? gel상에 plasmid DNA만 보이고 insert가 없어요 우선 ligation을 check하려고 하는데요, ligation 후 gel 사진을 보면 ligation을 알 수 있다고 ...
A.  생화학님 전에도 비슷한 질문 올렸었죠? 저랑 몇분이서 조언을 드렸었는데. 콘트롤이 없는 실험은 문제가 생기면 항상 해석이 안되서 고생합니다. ...
답변 3  |  2010.01.05
Q. vector에 insert를 삽입했는데 결과 좀 봐주세요!!  |  첨부파일 첨부파일
ㅠㅠㅠ (4000bp에 가까운거같습니다) insert는 900bp 정도 구요.. 저만 이러는 것인지.. -ㅅ- cloning 할때. vector size가 줄어듭니까? 아니면.. 전기영동의 ...
A.  보이는 것과 같이 insert가 들어가 있지 않은 vector를 동일하게 처리해서 비교 해 보거나, sequencing으로 cloning 성공 여부를 확인하는 것이 좋을 듯 ...
답변 4  |  2010.02.23
Q. Cloning & insert
발견됬습니다.] 제 생각에는 원래 생각했던 insert외에 다른 것이 들어갔다고 생각이 드는데 어떻게 이런 게 생기는지...모르겠습니다. ...
A.  최근 저희 실험실에서도 어느날부터 그런 문제가.. 저는 1kb 정도가 더 길게 위로 쉬프트 되어 나옵니다. 근데 짤리는 갯수나, 정상 사이즈일때 패 ...
답변 2  |  2015.07.23
Q. vector만 보이고 insert는 안보여요
또 우리가 원하는 ligation이 제대로 되었다면 insert와 vector만 보여야 되는데 vector아래의 band는 왜 나온건가요.. 이것역시 ligation이 되지않은 supercoil로 ...
A.  답변 1 : 우선 상용vector를 쓰셨으면 모르겠지만 vector의 정제가 덜 된듯하네요 답변 2 : Self일 ... circular 형태의 vecto linear 형태의 vector 그리고 insert
답변 1  |  2011.06.03
Q. insert가 너무 작으면 ligation이 잘 안되나요??
잘 되지 않는 것인가 해서 작은 size의 insert를 ligation 해보시거나, 조언 해주실 분 있으신가요? ...
A.  neb.com/#!/ligation 위 웹사이트를 이용하셔서 insert:vecotr 비를 7:1 이나 5:1로 높여서 transformation 해보세요. ligation은 어떤 프로토콜을 사용하시는지 ...
답변 3  |  2018.07.26
Q. Vector Ligation을 위해서 insert를 꼭 T vector에 넣어야 하는 건가요?
중합은 primer에서부터 이루어지니까 정확히 insert 부분이 PCR product로 나오는 것 아닌가요...? 바보같은 질문일 수도 있겠지만, 여쭈어봅니다 ...
A.   보관용으로 넣어주는거에요. 그 Insert를 앞으로도 계속 쓸거라면, 그리고 ligation 시킬 발현 또는 다양한 종류의 여타 실험용 벡터를 사용한다든지 ...
답변 2  |  2013.12.16
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