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실험Q&A    427건 정확도순 날짜순
Q. Immunoprecipitation troubleshooting에 관한 질문입니다.
대한 실험을 하게되었는데요. Immunoprecipitation을 하기 전에 troubleshooting을 포함한 이론에 대해 공부를 해야하는데, troubleshooting에 대한 자료를 찾기 힘든데요. 어디에서 자료를 찾을 수 있을까요 ...
A.  구글에서 (www.google.co.kr) "immunoprecipitation protocol"를 키워드로 검색해 보세요. 감당하기 어려울 정도로 많은 자료들이 있습니다.
답변 1  |  2013.09.29
Q. immunoprecipitation
petridish에 어느정도의 protein A와 항체를 넣으면 적당할까요? immunoprecipitation에 경험이 많으신 선생님들의 조언 부탁드립니다 ...
A.  wash 하실때 centrifuge 하시죠? rpm은 어느정도인가요? 3000 rpm 이상이면 튜브 바닥에 고이 모일텐데요. 1000 p pipet으로 조심히 buffer을 제거하는 수 밖에 없습니다. 그리고 저는 IP할때 (western을 하든 kinase assay ...
답변 3  |  2008.10.03
Q. Immunoprecipitation할 때, clarification의 의미가..
처음 해보게 된 초보 석사생입니다.ㅠ Immunoprecipitation할 때, 처음 protein A sepharose를 먼저 붙이고나서 incubation을 하고, 다시 centrifuge를 해서 sup을 얻고, 거기에다시 antibody를 붙이고 protein A 를 다시 붙이게 ...
A.  Sample에 만약 IgG가 존재하거나 또는 protein A와 결합할 수 있는 어떤 물질이 존재한다라고 했을때 이는 background로 나타납니다. 따라서 사전에 이를 없애주는 목적입니다.
답변 1  |  2010.01.22
Q. immunoprecipitation시 cell lysis 조건 궁금해요.
때마다 결과가 만족스럽지 못한데요. cell lysis할때 immunoprecipitation에 적합한 buffer 조건 (ex, PBS, or RIPA) 과 lysis 방법( ex, sonication, or pipetting in detergent, or stroking in pestle or etc..)에 대해서 조언을 듣고 ...
답변 0  |  2008.01.05
Q. immunoprecipitation (면역침강) 관련
제가 immunoprecipitation을 하기위해서 magnet bead(M280)에 항체를 코팅해서 단백질들을 잡아놓았습니다. 현재상태[bead--항체--단백질] 혹시 이 상태에서 항체[Bead, 항체---단백질], or 단백질[Bead--항체 단백질] ...
A.  이런경우 단백질에 항체와 binding하는 부분을 protein합성을 해서 protein만 떨어 드리는 방법이 있고 항체가 붙어 있어도 상관없다면 bead와 binding지 않은 항체를 넣어서 단백질을 떨어뜨리는 방법이 있습 ...
답변 1  |  2014.08.12
Q. Immunoprecipitation 원리가.
Immunoprecipitation 기법을 이용한 논문을 보는데..원리가 어떻게 되는지 궁금해서요..그래야 데이타 해석이 될것같아서.. 인터넷에서 찾을려고 했으나..잘 못찾겠더라구요.. 아시는분 가르쳐 주실수 있나요?
A.  공유결합에 의해 항체를 붙인 resin을 이용하여 항원을 혼합물로 부터 분리하는 방법입니다. 항체에 붙지않는 단백질들은 액상에 남아 있고 항체에 붙는 항원단배질은 resin과 함께 쉽게 분리가 됩니다.
답변 1  |  2004.05.11
Q. immunoprecipitation 시 단백질양
님들은 immunoprecipitation 시 단백질양은 보통 어느 정도로 하시나요??
A.  발현이 많은 것은 100ug 정도 사용하고 적은 것은 500ug - 1mg정도를 사용합니다.
답변 1  |  2007.07.11
Q. Immunoprecipitation할 때
- Immunoprecipitation할 때 왜 ~55kD에서 IgG heavy chain band 가 보이게 되는건가요? - 그리고 저희는 negative control로 normal mouse IgG를 사용하는데 왜 그러는지 궁금합니다. 너무 당연한 질문인거 같은데 이해를 ...
A.  IP는 tube내에서 target을 먼저 일차 antibody로 잡고 target과 antibody의 complex를 protein A bead로 잡아내는 방식입니다. 따라서 IP후 target/antibody/protein A bead 를 끓여주면 target은 물론 antibody까지 떨어져 나와 SDS ...
답변 2  |  2007.08.27
Q. immunoprecipitation
하는 protein에 대한 Ab는 WB가 가능하다고 되어 있지 않고 Immunoprecipitation만 가능하다고 나와있는데요, IP는 실험후 WB로 확인을 해야 한다고 하는데 반드시 그렇게 해야하는 건가요? WB가 가능하다면 굳이 ...
A.  coomassie로 사이즈를 확인해서 대충은 볼수 있겠지만, 아무래도 western blot을 하는게 좋겠지요? IP용이라는 Ab가 western blot에서도 되는지를 우선 테스트해보세요. 되면 좋은거죠 ㅎ ㅎ ㅎ
답변 1  |  2007.12.18
Q. Immunoprecipitation western blot 결과에 대해서 궁금합니다
FLAG-tagged protein을 immunoprecipitation 하는데 western blot결과에 대해서 질문드립니다. FLAG tag antibody를 amine-reactive resin에 바인딩해서, FLAG-tagged protein을 잡아내려고 하는데, 최종 elution을 FLAG tag antibody를 ...
A.  제 생각엔 wash을 너무 많이 (또는 오래) 하신것 같습니다. 다시 말해 다 떨어져 나갔을수도.. 4번의 wash는 이미 dilution된 상태라 단백질이 있더라도 웨스턴에서 안잡혔을수도 있구요... 일단 wash 횟수 ...
답변 2  |  2019.10.10
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